Nucleasa universal Pierce™ para la lisis celular
Nucleasa universal Pierce™ para la lisis celular
Thermo Scientific™

Nucleasa universal Pierce™ para la lisis celular

La nucleasa Universal Pierce de Thermo Scientific de lisis celular es ideal para una amplia variedad de aplicaciones en lasMás información
Have Questions?
Cambiar vistabuttonViewtableView
Número de catálogoCantidad
887005 kU
88702100 kU
8870125 kU
Número de catálogo 88700
Precio (USD)
107,95
5 kU
Añadir al carro de la compra
Cantidad:
5 kU
Pedido a granel o personalizado
Precio (USD)
107,95
5 kU
Añadir al carro de la compra
La nucleasa Universal Pierce de Thermo Scientific de lisis celular es ideal para una amplia variedad de aplicaciones en las que se requiere una digestión completa de ácidos nucleicos al preparar lisados celulares.

Características de la nucleasa Universal Pierce de lisis celular:

Amplio espectro: degrada todas las formas de ADN y ARN
Enzima de máxima calidad: la nucleasa cuenta con una pureza del ≥99 %, probada por SDS-PAGE
Actividad sólida: actividad específica 100 veces mayor que la ADNasa I
Versátil: puede emplearse con una gran variedad de reactivos de lisis celular

La nucleasa Universal Pierce de lisis celular es una endonucleasa genéticamente manipulada de Serratia marcescens. La enzima se produce y purifica a partir de la E. coli y consta de dos subunidades idénticas de 30 kDa con dos enlaces críticos de disulfuro. Esta endonucleasa degrada de forma indiscriminada ADN y ARN monocatenario, bicatenario, lineal y circular y es eficaz en una amplia gama de temperaturas y pH. Esta enzima tiene una alta actividad específica (100 veces mayor que la ADNasa I) y una mayor estabilidad térmica en comparación con otras nucleasas. La nucleasa Universal Pierce es una enzima con ≥99 % de pureza, libre de cualquier actividad de proteasas medible y se suministra a 250 U/µl. La nucleasa Universal Pierce de lisis celular tiene el mismo rendimiento que la nucleasa Benzonase™ (EMD Merck).

Aplicaciones:
• Uso con B-PER, Y-PER u otros reactivos de lisis celular comerciales o caseros y/o interrupción mecánica para reducir la viscosidad de los extractos de proteínas
• Eliminar el ADN y el ARN de las preparaciones de proteínas recombinantes previas al procesamiento posterior

La nucleasa Universal Pierce de lisis celular se utiliza frecuentemente para reducir la viscosidad de los extractos de proteínas bacterianas y de mamíferos para su aplicación posterior mediante la eliminación de ácidos nucleicos de las preparaciones de proteínas. La enzima digiere completamente los ácidos nucleicos a oligonucleótidos que son menos de 5 bases de longitud. La nucleasa Universal Pierce de lisis celular ayuda a separar el sedimento del lisado del sobrenadante, favorece la filtración del lisado tratado, mejora el tiempo de procesamiento de la cromatografía y aumenta el rendimiento global de la proteína. Así mismo, se ha demostrado que la endonucleasa mejora la compatibilidad de los extractos de proteínas para la electroforesis en gel 2D. Una unidad corresponde a la cantidad de enzima necesaria para producir un cambio de 1,0 en la absorbancia a 260 nm de ADN de arenque sometido a ultrasonidos durante 30 minutos a 37° C, como se ha determinado con el uso de la nucleasa estándar en el ensayo de actividad volumétrica de la Serratia marcescens de Merck™.

Productos relacionados
Solución de nucleasa microcócica (≥1 unidad/µl)

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

Especificaciones
DescripciónNucleasa universal Pierce para la lisis celular
EnzimaNucleasa
FormulaciónEnzima con una pureza de al menos el 99 % a 250 u/ul en glicerol al 50 % (v/v), 20 mM de NaCl, 2 mM de MgCl, 20 mM de Tris, pH 8,0
Cantidad5 kU
Tipo de reactivoEnzimas para lisis celular
Suficiente para200 ml de lisado
FormularioLíquido
Línea de productosPierce
Tipo de productoNucleasa universal
Unit Size5 kU
Contenido y almacenamiento
Se debe guardar en un lugar fresco, seco y bien ventilado, protegido de la luz solar directa.

Preguntas frecuentes

At which concentration/dilution should the Pierce Universal Nuclease for Cell Lysis (Cat. No. 88700) be used, and what is the suggested incubation time and incubation temperature?

We would suggest the following procedure (note that you should determine yourself empirically the optimal incubation time, incubation temperature and also dilution): Please add 25 U or 0.1 µL Pierce Universal Nuclease for Cell Lysis (Cat. No. 88700) to 1 mL of cell lysate (dilution 1:10,000) and incubate at room temperature for 10-15 minutes. If you want to dilute the Nuclease for facilitating pipetting, please do this with Tris- or PBS-buffer at pH 7-8.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Purification and Isolation Support Center.

After cell lysis, my mass spectrometry sample is very viscous and difficult to pipette. How do I reduce the sample viscosity?

High sample viscosity after lysis is due to release of DNA from the nucleus. Sonication or addition of a nuclease such as the Pierce Universal Nuclease (Cat. No. 88700, 88701, or 88702) can be used to degrade DNA and reduce sample viscosity.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Mass Spectrometry Support Center.

Can you explain how the B-PER Bacterial Protein Extraction Reagent lyses cells?

The B-PER Reagent solution contains a proprietary, mild, non-ionic detergent in 20 mM Tris-HCl, pH 7.5. It effectively disrupts cells and solubilizes native or recombinant proteins without denaturation. The reagent creates holes in the cell membrane that will leak out cytosolic proteins. The sample may become very viscous when the bacterial chromosome is released. We recommend adding DNAse I (Cat. No. 90083) to the reagent to reduce viscosity. For better lysis efficiency and if there are inclusion bodies, we recommend adding Lysozyme (Cat. No. 90082) to the reagent. Alternatively, you may purchase the B-PER Bacterial Protein Extraction Reagent with Enzymes Kit (Cat. No. 90078 or 90079) that includes the B-PER Bacterial Protein Extraction Reagent, DNase I, and Lysozyme.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Purification and Isolation Support Center.

Citations & References (1)

Citations & References
Abstract
p53 is active in murine stem cells and alters the transcriptome in a manner that is reminiscent of mutant p53.
Authors:Yan H, Solozobova V, Zhang P, Armant O, Kuehl B, Brenner-Weiss G, Blattner C
Journal:
PubMed ID:25719246
Since it was found that p53 is highly expressed in murine embryonic stem cells, it remained a mystery whether p53 is active in this cell type. We show that a significant part of p53 is localised in the nucleus of murine embryonic stem cells and that the majority of this ... More