Gránulos magnéticos de estreptavidina Pierce™
Gránulos magnéticos de estreptavidina Pierce™
Thermo Scientific™

Gránulos magnéticos de estreptavidina Pierce™

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Los gránulos magnéticos de estreptavidina Thermo Scientific Pierce aceleran el rendimiento de los procesos de purificación magnética automatizados de moléculas biotiniladas.

Características de los gránulos magnéticos de estreptavidina:

Gránulos de alto rendimiento: estas micropartículas superparamagnéticas no compilables, prebloqueadas y de óxido de hierro proporcionan una uniformidad excepcional para aplicaciones manuales y HTS automatizado.
Inmovilización química estable: la estreptavidina se inmoviliza mediante una reacción química resistente a la lixiviación.
Alta capacidad: los gránulos de calidad superior con alta capacidad de unión proporcionan una rápida y eficaz purificación de biomoléculas a partir de muestras complejas.
Bajo nivel de unión no específica: los gránulos estables prebloqueados ofrecen productos de purificación limpia (por ejemplo, antígeno eluido en IP con anticuerpo biotinilado) compatibles con el análisis de espectrometría de masas y otros análisis posteriores.
Rendimiento superior: capacidad de unión casi tres veces mayor que la de los gránulos habituales de otros proveedores, lo que permite el uso de cantidades menores por experimento.

Aplicaciones:
• Inmunoprecipitar antígenos (con anticuerpos biotinilados) a partir de una amplia variedad de fuentes
• Coinmunoprecipitar complejos de interacción con anticuerpos biotinilados
• Capturar interacciones de proteína-proteína en ensayos «pull-down» utilizando proteínas cebo biotiniladas
• Aislar complejos de proteínas de ADN marcadas con biotina procedentes de extractos celulares o tisulares
• Capturar oligos biotinilados de ADN monocatenario
• Aislar productos PCR biotinilados

Estos gránulos magnéticos de estreptavidina están validados y optimizados para utilizarse con plataformas magnéticas para grandes volúmenes, como los equipos Thermo Scientific KingFisher 96 y KingFisher Flex, sin dejar de ofrecer un rendimiento excelente cuando se utilizan en aplicaciones de sobremesa sencillas con un soporte magnético adecuado. Las partículas superparamagnéticas de óxido de hierro ofrecen un rendimiento superior (unión de alta capacidad y baja no especificidad) cuando se comparan con otros gránulos magnéticos disponibles en el mercado.

Los gránulos magnéticos de estreptavidina Pierce utilizan una forma recombinante de estreptavidina con una masa de 53 kDa y un punto isoeléctrico (pI) cercano a neutro. La proteína es un tetrámero con cuatro sitios de unión de biotina. A diferencia de la avidina, la estreptavidina no tiene grupos de carbohidratos, por lo que genera una baja unión no específica. La interacción de alta afinidad entre estreptavidina y biotina no se puede disociar eficientemente salvo en condiciones extremadamente duras, por ejemplo, ebullición en un tampón de carga de muestra para SDS-PAGE o guanidina 8M·HCl, pH 1,5. Por lo tanto, a menudo es posible eluir elementos de unión en una interacción compleja sin el componente biotinilado que también permite la elución.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

Especificaciones
ConcentraciónSlurry: 10 mg/mL, 1% solids
Tipo de ligandoEstreptavidina
Forma de proteínaRecombinante
Cantidad5 ml
ObjetivoBiotina
Capacidad (métrico)5 mL
FormularioLíquido
Tamaño de partículas1 μm
Línea de productosPierce
TipoGránulo magnético
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Tras su recepción, almacenar a 4 °C. El producto se envía en un paquete de hielo.

Preguntas frecuentes

Will the streptavidin-biotin bond be stable in ammonium carbonate buffer at 56 degrees C?

The streptavidin-biotin interaction is the strongest known non-covalent biological interaction between a protein and a ligand. Binding of biotin and streptavidin is very rapid and, once formed, the complex is unaffected by wide extremes of pH, temperature, organic solvents, and other denaturing agents. Normally, very harsh methods are required to dissociate the biotin from streptavidin, which will be irreversibly denatured by the procedure.

To dissociate biotinylated proteins from streptavidin, boil the beads in 0.1% SDS or SDS-PAGE buffer for 3 mins or incubate them in 8 M guanidinium hydrochloride, pH 1.5.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.

I have a dsDNA biotinylated on streptavidin Dynabeads. How can I dissociate the non-biotinylated DNA strand from the biotinylated one?

There are two methods to dissociate the non-biotinylated DNA from the biotinylated DNA strand. The following protocols are based on using 20 µL of Dynabeads Streptavidin, but are scalable. Both methods may release very small amounts of complementary biotinylated strand from streptavidin. If it is critical that no biotinylated strand is released, either adopt a different biotin modification using dual biotin (two biotin groups in sequence) or covalently bind DNA to e.g., Dynabeads M-270 Carboxylic Acid.

Using heat:

- Wash the DNA coated Dynabeads in 50 µL 1 x SSC.*
- Resuspend the beads in another 50 µL of 1 x SSC Incubate at 95 degrees C for 5 mins.
- Quickly put the tube in magnet stand for 1-2 mins and transfer the supernatant to a new tube.
- The supernatant contains your non-biotinylated DNA strand.

Using NaOH:

- Wash the DNA coated Dynabeads in 50 µL 1 x SSC.*
- Resuspend the beads in 20 µl of freshly prepared 0.15 M NaOH.
- Incubate at room temperature for 10 mins. Put the tube in magnet stand for 1-2 mins and transfer the supernatant to a new tube.
- The supernatant contains your non-biotinylated DNA strand. Neutralize the probe by adding 2.2 µL 10 x TE, pH 7.5 and 1.3 µL 1.25 M acetic acid.

Wash the Dynabeads coated with biotinylated strand once with 50 µL 0.1M NaOH, once with 50 µL of B&W buffer and once with 50 µL TE buffer.

*1 x SSC (0.15 M NaCl, 0.015 M sodium citrate. Dissolve the reagents in 800 mL water. Adjust pH to 7.0 with NaOH. Adjust the volume to 1 liter with water).

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How do I measure the binding of biotinylated molecules on streptavidin Dynabeads?

Assay the supernatant for unbound molecules. This will determine the amount of molecule bound to the Dynabeads. For nucleic acids, the concentration can be checked by OD readings, or by running a gel. For proteins, the concentration in the supernatant can be determined by a spectrometer using a protein assay like BCA. Alternatively, you can label the molecule with radioactivity or fluorescence and measure the concentration of molecule directly on the beads (former) or in the supernatant (latter).

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How many biotin binding-sites are there per streptavidin molecule?

Streptavidin is a protein composed of four identical subunits, each containing a high affinity binding site for biotin (K-D = 10 -15 M) . Streptavidin has the same biotin binding properties as avidin, but it has a low isoelectric point (pI=5) and no carbohydrate groups, resulting in low non-specific binding.

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Is the streptavidin protein in Pierce Streptavidin Magnetic Beads His-tagged?

The streptavidin in Pierce Streptavidin Magnetic Beads is not His-tagged.

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