pHrodo™ Red Phagocytosis Particle Labeling Kit for Flow Cytometry
pHrodo™ Red Phagocytosis Particle Labeling Kit for Flow Cytometry
Invitrogen™

pHrodo™ Red Phagocytosis Particle Labeling Kit for Flow Cytometry

• Detecta específicamente fagocitosis y endocitosis con colorante fluorogénico sensible al pH - discrimina endcitosados de partículas adherentes y extracelulares•Más información
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Número de catálogoCantidad
A100261 kit
Número de catálogo A10026
Precio (USD)
2.093,04
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Cantidad:
1 kit
Precio (USD)
2.093,04
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• Detecta específicamente fagocitosis y endocitosis con colorante fluorogénico sensible al pH - discrimina endcitosados de partículas adherentes y extracelulares
• Variabilidad de señal reducida y temporización mejorada en experimentos sensibles - sin necesidad de pasos de lavado o de desactivación de la tinción
• Fluorescencia roja brillante - multiplexado cómodo con tintes verdes como GFP, Fluo-4, o calceína

Consulte la guía de selección para todos los indicadores de pHrodo utilizados en la obtención de imágenes, citometría de flujo y ensayos de microplacas.

La tinción pHrodo™ Red ofrece resultados más rápidos y precisos que cualquier otro ensayo de fagocitosis

La nueva tinción pHrodo™ Red a base de rodamina sensible al pH, patentada por Molecular Probes™, no es fluorescente a pH neutro, pero se vuelve rojo brillante con la acidificación. Puesto que es tanto fluorogénico como sensible al pH, la tinción pHrodo™ Red puede usarse como sensor específico de eventos fagocíticos; la acidificación del fagosoma después de la fagocitosis se caracteriza por la fluorescencia roja. Por lo tanto, es una herramienta ideal para estudiar la fagocitosis y su regulación por fármacos y / o factores ambientales.

Rápido y reproducible

No se necesitan pasos de lavado ni de desactivación de tinciones, ya que el colorante pHrodo™ Red no es fluorescente fuera de la célula, lo que hace que el protocolo de tinción sea sencillo y rápido. La eliminación de los pasos de lavado y de la desactivación de la tinción también mejora la reproducibilidad de los ensayos, especialmente en aquellos basados en lectores de placas.

Aplicaciones flexibles

Utilice conjugados de pHrodo™ Red BioParticles™ para el análisis práctico de la fagocitosis de bacterias grampositivas o gramnegativas, o la forma pHrodo™ Red aminoreactiva para el etiquetado de microorganismos o proteínas de su elección.

Compatible con múltiples plataformas
Los conjugados de tinción pHrodo™ Red se pueden utilizar en lectores de placas, microscopía de fluorescencia de imágenes y aplicaciones de citometría de flujo. El kit de etiquetado de partículas de fagocitosis pHrodo™ Red y el kit de fagocitosis pHrodo™ Red E. coli BioParticles™ para citometría de flujo fueron diseñados para realizar mediciones rápidas y cómodas de la actividad fagocítica en muestras de sangre completa mediante citometría de flujo. Los kits incluyen todos los reactivos necesarios para evaluar la ingestión de partículas y la lisis de glóbulos rojos. El kit de etiquetado también contiene los reactivos necesarios para el etiquetado de microorganismos con la tinción pHrodo™ Red. Se suministran suficientes reactivos en ambos kits para aproximadamente 100 ensayos.

La absorción y la emisión óptima de fluorescencia máxima del conjugado pHrodo™ Red BioParticles™ es de aproximadamente 560 nm y 585 nm, respectivamente. Sin embargo, el fluoróforo se excita fácilmente con el láser de iones de argón de 488 nm instalado en la mayoría de los citómetros de flujo.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Método de detecciónFluorescente
Tipo de colorantepHrodo™ Red
FormatoFrasco(s)
Cantidad1 kit
Condiciones de envíoTemperatura ambiente
Emission560⁄585
Para utilizar con (equipo)Citómetro de flujo
Línea de productospHrodo
Tipo de productoKit de etiquetado de partículas de fagocitosis roja
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Contiene tampón de lisis (10 ml), tampón B (200 ml), tampón de lavado (200 ml), 1 vial de éster de succinimidilo pHrodo™ Red (1 mg, producto liofilizado), 1 vial de DMSO (0,5 ml), 1 frasco de bicarbonato de sodio (50 ml, 0,1 M, pH 9,3). Almacenar en el refrigerador

Preguntas frecuentes

I am performing a phagocytosis assay of macrophages engulfing pHrodo-labeled bacteria. What do you recommend for fixation after the phagocytosis?

pHrodo is relatively non-fluorescent until it enters the acidic phagosome, at which point its fluorescence increases. If you fix the sample, the pHrodo will only reflect the pH of the buffer the cells are in, and not the pH of the phagosome. For this reason, we do not recommend fixing samples. If you want to see how many cells engulfed the labeled bacteria, fix the cells and then place the fixed cells in an acidic buffer for the assay.

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Citations & References (3)

Citations & References
Abstract
SLAM is a microbial sensor that regulates bacterial phagosome functions in macrophages.
Authors:Berger SB, Romero X, Ma C, Wang G, Faubion WA, Liao G, Compeer E, Keszei M, Rameh L, Wang N, Boes M, Regueiro JR, Reinecker HC, Terhorst C,
Journal:Nat Immunol
PubMed ID:20818396
'Phagocytosis is a pivotal process by which macrophages eliminate microorganisms after recognition by pathogen sensors. Here we unexpectedly found that the self ligand and cell surface receptor SLAM functioned not only as a costimulatory molecule but also as a microbial sensor that controlled the killing of gram-negative bacteria by macrophages. ... More
Ehrlichia chaffeensis infections in Drosophila melanogaster.
Authors:Luce-Fedrow A, Von Ohlen T, Chapes SK,
Journal:Infect Immun
PubMed ID:19687202
Ehrlichia chaffeensis is an obligate, intracellular bacterium, transmitted by the tick Amblyomma americanum, and is the causative agent of human monocytic ehrlichiosis infections. We previously demonstrated that E. chaffeensis is capable of growing in Drosophila S2 cells. Therefore, we tested the hypothesis that E. chaffeensis can infect adult Drosophila melanogaster. ... More
Chemotactic network responses to live bacteria show independence of phagocytosis from chemoreceptor sensing.
Authors:Meena NP, Kimmel AR
Journal:Elife
PubMed ID:28541182
Aspects of innate immunity derive from characteristics inherent to phagocytes, including chemotaxis toward and engulfment of unicellular organisms or cell debris. Ligand chemotaxis has been biochemically investigated using mammalian and model systems, but precision of chemotaxis towards ligands being actively secreted by live bacteria is not well studied, nor has ... More