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Invitrogen™
Sistema de expresión ViraPower™ HiPerform™ T-REx™ Gateway™
El sistema de expresión ViraPower™ HiPerform™ T-Rex™ Gateway™ incluye todos los componentes necesarios para generar lentejas, incluyendo el kit vectorial,Más información
| Número de catálogo | Cantidad |
|---|---|
| A11141 | 20 reacciones |
Número de catálogo A11141
Precio (USD)
-
Cantidad:
20 reacciones
El sistema de expresión ViraPower™ HiPerform™ T-Rex™ Gateway™ incluye todos los componentes necesarios para generar lentejas, incluyendo el kit vectorial, la línea celular 293FT y el kit de soporte. Este kit combina las tecnologías lentiviral ViraPower™ HiPerform™, T-Rex™ y Gateway™ de Invitrogen para facilitar la clonación a base de recombinación sencilla y la expresión de alto nivel a base de lentiviral, regulada (tetraciclina inducible), de un gen objetivo en células de mamíferos divisorias y no divisorias. El vector pLenti6.3⁄ TO⁄ V5-DEST está equipado con dos elementos genéticos clave, lo que lo convierte en un vector HiPerform™: el elemento regulador postranscripcional Woodchuck (WPRE) y la secuencia central de la Polypurine Tract (cPPT) del gen de la integrasa VIH-1 producen al menos 4 veces más en la expresión de proteínas que los vectores que carecen de estos elementos.
Ventajas
• Genera lentivirus incompetente para la replicación para la transducción de células de mamíferos divisorias y no divisorias
• Fácil recombinación basada en la™ tecnología Gateway
• Expresión estable, a largo plazo, regulada por tetraciclina
• Expresión de proteínas mejorada, hasta 4 veces o más, en comparación con los sistemas tradicionales de expresión viral
Características principales
• WPRE (elemento regulatorio postranscripcional Woodchuck) del virus de la hepatitis woodchuck, aumenta la expresión transgénica y el cPPT (tracto polipurino central) del gen de la integrasa VIH-1, aumenta el número de copias del lentivirus que se integra en el genoma del huésped, aumentando así el título viral. Juntos, el WPRE y cPPT hacen que la expresión de proteínas en la mayoría de los tipos de células sea cuatro veces mayor en comparación con otros vectores que no contienen estos elementos.
• Promotor híbrido que consiste en el promotor del citomegalovirus humano (CMV) y dos sitios de operador de tetraciclina 2 (TetO2) para la expresión regulada de alto nivel del marcador de
• Selección de blasticidina del gen objetivo para la selección estable bajo control del promotor SV40
El kit incluye
• Kit de vectores ViraPower™ HiPerform™ T-Rex™ Gateway™ (N.º de cat.: A11144)
• Kit de soporte lentiviral ViraPower™ BSD (N.º de cat.: K497000)
• Línea celular 293FT (N.º de cat.: R70007)
• Mezca de encimas Gateway™ LR Clonase™ II Plus (N.º de cat.: 12538120)
• E. coli One Shot™ Stbl3™ químicamente competente (N.º de cat.: C737303)
• Geneticina™ (N.º de cat.: 10131035)
• Plásmido de control positivo pENTR™ Gus
Para uso en investigación solamente. No diseñado para uso diagnóstico o terapéutico.
Ventajas
• Genera lentivirus incompetente para la replicación para la transducción de células de mamíferos divisorias y no divisorias
• Fácil recombinación basada en la™ tecnología Gateway
• Expresión estable, a largo plazo, regulada por tetraciclina
• Expresión de proteínas mejorada, hasta 4 veces o más, en comparación con los sistemas tradicionales de expresión viral
Características principales
• WPRE (elemento regulatorio postranscripcional Woodchuck) del virus de la hepatitis woodchuck, aumenta la expresión transgénica y el cPPT (tracto polipurino central) del gen de la integrasa VIH-1, aumenta el número de copias del lentivirus que se integra en el genoma del huésped, aumentando así el título viral. Juntos, el WPRE y cPPT hacen que la expresión de proteínas en la mayoría de los tipos de células sea cuatro veces mayor en comparación con otros vectores que no contienen estos elementos.
• Promotor híbrido que consiste en el promotor del citomegalovirus humano (CMV) y dos sitios de operador de tetraciclina 2 (TetO2) para la expresión regulada de alto nivel del marcador de
• Selección de blasticidina del gen objetivo para la selección estable bajo control del promotor SV40
El kit incluye
• Kit de vectores ViraPower™ HiPerform™ T-Rex™ Gateway™ (N.º de cat.: A11144)
• Kit de soporte lentiviral ViraPower™ BSD (N.º de cat.: K497000)
• Línea celular 293FT (N.º de cat.: R70007)
• Mezca de encimas Gateway™ LR Clonase™ II Plus (N.º de cat.: 12538120)
• E. coli One Shot™ Stbl3™ químicamente competente (N.º de cat.: C737303)
• Geneticina™ (N.º de cat.: 10131035)
• Plásmido de control positivo pENTR™ Gus
Para uso en investigación solamente. No diseñado para uso diagnóstico o terapéutico.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Resistencia bacteriana a los antibióticosAmpicilina (AMPR), blasticidina (BsdR)
Método de clonaciónGateway™
Sistema constitutivo o inducibleInducible
Tipo de entregaLentiviral
Para utilizar con (aplicación)Expresión de proteínas
Para utilizar con (equipo)Gateway™, HiPerform™, T-REx™, ViraPower™
Enzima de la pasarelaLR Clonase™ II Plus, LR Clonase™ II
Agente inductorDoxiciclina, tetraciclina
de control principalExpresión viral
N.º de reacciones20 Reactions
Enzima de PCRPolimerasa de corrección
Línea de productosGateway, HiPerform, T-REx, ViraPower
Tipo de productoSistema de expresión
Etiqueta de proteínaMarcador epítopo V5
Cantidad20 reacciones
Origen de replicaciónOrigen de pUC
Agente de selección (eucariótico)Blasticidina
Marcador de selección eucariotaBsdR
Promotor del marcador de selecciónPromotor de PGK
Elementos especialesWPRE, cPPT
Tipo de célula293-FT
FormatoKit
PromotorCMV/TO
VectorpLenti
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Contenido
El sistema de expresión The ViraPower™ HiPerform™ T-Rex™ Gateway™ incluye los siguientes componentes:
• Kit de vectores ViraPower™ HiPerform™ T-Rex™ Gateway™ (N.º de cat.: A11144) que incluye:
6 ug del vector pLenti6.3⁄TO⁄V5-DEST (40 µl de vector a 150 ng⁄µl en el tampón TE, pH 8,0) 20 ug devector TR pLenti3.3⁄ (40 µl de vector a 0,5 µg⁄µl en tampón TE, pH 8,0) 10 ug de plásmido pLenti6.3⁄TO⁄V5-GW⁄lacZ (20 µl de plásmido a 0,5 µg⁄µl en el tampón TE, pH 8,0) 1 ml de tetraciclina (10 mg⁄ml en agua)
• Kit de soporte Bsd lentiviral ViraPower™ (n.º de cat. K497000), que incluye:
195 ug de la mezcla de envase para lentiviral ViraPower™ (contiene 195 uL de una mezcla deplásmidos pLP1, pLP2 y pLP⁄ VSVG, a 1 ug⁄uL en el tampón TE, pH 8,0) 0,75 ml de Lipofectamine™ 2000 (N.º de cat.: 11668027) 50 mg de polvo de blasticidina (N.º de cat.: R21001)
• Línea celular 293FT (N.º de cat.: R70007): 1 vial que contiene 3 x 106 células congeladas en 1 ml de medio de congelación.
• Mezcla de enzimas Gateway™ LR Clonase™ II Plus (n.º de cat. 12538120): 40 uL de mezcla de encimas Gateway™ LR Clonase™ II Plus y 40 uL de solución de proteinasa K a una concentración de 2 ug⁄ml.
• E. coli químicamente competente One Shot™ Stbl3™ (n.º de cat.: C737303): 21 X 50 uL de células Stbl3™, 6 ml de S.O.C. Medio y 50 uL de ADN de control pUC19 (10 pg⁄uL).
• Geneticin™ (N.º de cat.: 10131035): 20 ml de solución de Geneticin™ (50 mg⁄ml).
• Plasma de control positivo pENTR™ Gus
Almacenamiento
• Vectores: -20 °C
• Mezcla de envasado ViraPower™: -20 °C
• Mezcla de enzimas LR Clonase™ II: -20 °C para almacenamiento de hasta 6 meses, -80 °C para almacenamiento a largo plazo
• Tetraciclina: -20 °C (protegido de la luz)
• Basticidina: -20 °C
• Geneticina: 4 °C o -20 °C
• Lipofectamine™ 2000: 4 °C (no congelar)
• E. coli químicamente competente OneShot™ Stbl3™: -80 °C
• Células 293 FT: Nitrógeno líquido
• Control positivo pENTR™ Gus: -20 °C
El sistema de expresión The ViraPower™ HiPerform™ T-Rex™ Gateway™ incluye los siguientes componentes:
• Kit de vectores ViraPower™ HiPerform™ T-Rex™ Gateway™ (N.º de cat.: A11144) que incluye:
• Kit de soporte Bsd lentiviral ViraPower™ (n.º de cat. K497000), que incluye:
• Línea celular 293FT (N.º de cat.: R70007): 1 vial que contiene 3 x 106 células congeladas en 1 ml de medio de congelación.
• Mezcla de enzimas Gateway™ LR Clonase™ II Plus (n.º de cat. 12538120): 40 uL de mezcla de encimas Gateway™ LR Clonase™ II Plus y 40 uL de solución de proteinasa K a una concentración de 2 ug⁄ml.
• E. coli químicamente competente One Shot™ Stbl3™ (n.º de cat.: C737303): 21 X 50 uL de células Stbl3™, 6 ml de S.O.C. Medio y 50 uL de ADN de control pUC19 (10 pg⁄uL).
• Geneticin™ (N.º de cat.: 10131035): 20 ml de solución de Geneticin™ (50 mg⁄ml).
• Plasma de control positivo pENTR™ Gus
Almacenamiento
• Vectores: -20 °C
• Mezcla de envasado ViraPower™: -20 °C
• Mezcla de enzimas LR Clonase™ II: -20 °C para almacenamiento de hasta 6 meses, -80 °C para almacenamiento a largo plazo
• Tetraciclina: -20 °C (protegido de la luz)
• Basticidina: -20 °C
• Geneticina: 4 °C o -20 °C
• Lipofectamine™ 2000: 4 °C (no congelar)
• E. coli químicamente competente OneShot™ Stbl3™: -80 °C
• Células 293 FT: Nitrógeno líquido
• Control positivo pENTR™ Gus: -20 °C
Preguntas frecuentes
Can I perform the single-step protocol for the BP/LR Clonase reaction using BP Clonase enzyme and LR Clonase enzyme instead of BP Clonase II enzyme and LR Clonase II enzyme?
Do you have a recommended single-step protocol for BP/LR recombination?
How can I move my gene of interest from a Gateway-adapted expression clone to a new Destination vector as I have lost the entry clone?
Can I purchase the 5X LR Clonase buffer or 5X BP Clonase buffer separately?
Do you offer Gateway vectors for expression in plants?
Citations & References (2)
Citations & References
Abstract
Functional constraints of nuclear-mitochondrial DNA interactions in xenomitochondrial rodent cell lines.
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:10908562
'The co-evolution of nuclear and mitochondrial genomes in vertebrates led to more than 100 specific interactions that are crucial for an optimized ATP generation. These interactions have been examined by introducing rat mtDNA into mouse cells devoid of mitochondrial DNA (mtDNA). When mtDNA-less cells derived from the common mouse (Mus
Expression of mtDNA and nDNA encoded respiratory chain proteins in chemically and genetically-derived Rho0 human fibroblasts: a comparison of subunit proteins in normal fibroblasts treated with ethidium bromide and fibroblasts from a patient with mtDNA depletion syndrome.
Journal:Biochim Biophys Acta
PubMed ID:9540845
Although much progress has been made in identifying genetic defects associated with mitochondrial diseases, the protein expression patterns of most disorders are poorly understood. Here we use immunochemical techniques to describe subunit expression patterns of respiratory chain enzyme complexes II (succinate dehydrogenase: SD) and IV (cytochrome c oxidase: COX) in