Jump-In™ CHO-K1 Kit
Jump-In™ CHO-K1 Kit

Jump-In™ CHO-K1 Kit

El kit Jump-in™ CHO-K1 permite la integración selectiva de material genético en un lugar R4 específico prediseñado en la líneaMás información
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Número de catálogoCantidad
A141481 Kit
Número de catálogo A14148
Precio (USD)
-
Cantidad:
1 Kit
El kit Jump-in™ CHO-K1 permite la integración selectiva de material genético en un lugar R4 específico prediseñado en la línea celular Jump-In™ CHO-K1, para crear una línea celular estable e isogénica con menos esfuerzo y en menos tiempo que los métodos tradicionales de ingeniería celular.

La alta eficiencia de retargeting, hecha posible gracias a los lugares R4 en la línea celular CHO-K1, permite el uso del grupo isogénico para experimentos adicionales sin necesidad de selección clonal. De forma alternativa, la alta eficiencia de retargeting permite seleccionar fácilmente un clon positivo estable que expresa su gen de interés.

El kit Jump-In™ CHO-K1 le permite:

• Desarrollar de forma rápida y eficaz grupos celulares isogénicos diseñados de forma estable en aproximadamente la mitad del tiempo en comparación con los métodos tradicionales de ingeniería celular
• Utilizar la expresión isogénica de un locus genómico definido como la solución ideal para el análisis comparativo de familias de genes, isoformas u ortólogos
• Generar varias líneas celulares en paralelo mediante el flujo de trabajo simplificado
• Acceder fácilmente a la tecnología sin licencias complicadas y sin tener que interpretar las restricciones

Ahorre tiempo con la generación rápida y eficiente de líneas celulares manipuladas
Con el kit Jump-In™ CHO-K1 puede generar grupos celulares funcionales en tan solo dos semanas sin el laborioso aislamiento y análisis de clones, y el protocolo optimizado facilita la generación de varias líneas celulares al mismo tiempo. Incluso la generación de líneas de células clonales se puede hacer con menos tiempo y esfuerzo debido al alto porcentaje de clones positivos. Además, la tecnología Jump-In™ le permite generar un número ilimitado de líneas celulares sin los requisitos restrictivos de las licencias.

Amplíe sus capacidades experimentales
El kit Jump-In™ CHO-K1 es la solución ideal para células y ensayos donde las tecnologías de ingeniería transitoria son problemáticas, así como para las difíciles El kit también proporciona una manera conveniente de crear paneles diana de familias de genes, isoformas u ortólogos. Los genes que codifican para proteínas de gran tamaño o proteínas multiunidad dejarán de suponer un problema, ya que los vectores de destino Gateway™ aceptan inserciones grandes.

El kit incluye:
• Vector pA CMV de dest. pJTI™ R4 (100 µg)
• Vector de int. pJTI™ R4 (100 µg)
• Células Jump-In™ CHO-K1 (2 viales de 1 ml cada uno)

Solo para uso en investigación. No diseñado para uso terapéutico o de diagnóstico en animales o humanos.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Línea de célulasJump-In™ CHO-K1
Sistema de expresiónMamífero
FormatoKit
de control principalDesarrollo de líneas celulares estables, integración dirigida
Tipo de productoKit CHO-K1
PromotorCMV
Cantidad1 Kit
Agente de selección (eucariótico)Higromicina
Tipo de sistemaJump-In™
Línea de productosJump-In
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
El kit incluye:Célula
Jump-in™ CHO-K1
spJTI™ R4 Int (vector de integrasa)
pJTI™ R4 DEST CMV pA (vector de destino)

Al recibirlo, almacenar inmediatamente las células en nitrógeno líquido y los vectores a - 20 °C. Las células almacenadas a - 80 °C pueden perder rápidamente la viabilidad.

Preguntas frecuentes

I am planning to generate a Jump-In platform cell line. Do you recommend mapping the site of integration and checking against the database to pick a clone where integration has occurred in a "good" hot spot?

We would recommend engineering an expression marker/reporter in the plasmid used to create the platform line, and then screening the platform line for expression of this marker to identify a high-expressing locus. Otherwise, the process can get quite labor-intensive, as multiple lines would have to be screened after retargeting.

Does the pJTI PhiC31 Int vector contain a nuclear localization signal (NLS), and would adding an NLS increase the efficiency of site-specific integration at pseudo attP sites?

The pJTI Phic31 Int vector does not contain an NLS. Adding an NLS could increase the efficiency of site-specific integration at pseudo attP sites, but there are no data to support it. There is one paper describing the use of an NLS on a PhiC31 integrase vector, but the authors didn't measure integration into pseudo attP sites.

In the Jump-In system, how much DNA or what controls do I need to include in order to get one integration event?

The amount of DNA to be used to obtain single copies should be determined by control experiments done in the absence of integrase. The same amount of DNA that yields less than 5 colonies in the absence of integrase should be used in the presence of integrase. Typically, the integrase expression plasmid makes up most of the amount of DNA used for transfection.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Expression Support Center.

When should I use the Jump-In Fast system versus the Jump-InTI system?

We recommend using the Jump-In Fast system if you need stable mammalian expression and want to quickly generate well-expressing clones. You can have well-expressing clones with one or more integrations at the PhiC31 pseudo-att P sites. A Southern blot is necessary to confirm the number of integrated events. Use the Jump-InTI system if you need isogenic expression, where every cloned gene would be expressed from the same locus in the same background, with no chromosomal position effects.

What is the difference between the Jump-In and Flp-In systems?

The Jump-In system is PhiC31-integrase mediated and is a stable, targeted, and irreversible mammalian expression system. It consists of the Jump-In Fast system that involves a single integration step and the Jump-InTI (targeted integration) system that needs two integration steps, both of which are targeted and irreversible. In contrast, the Flp-In system is a stable, targeted mammalian expression system that is reversible. The first integration is random (integration of pFRT/lacZeo), and the second integration (integration of the Flp-In expression vector) is targeted but reversible.