El kit de amplificación de PCR Applied Biosystems NGM Detect es el primer kit STR de 6 colorantes diseñado específicamente para aquellos laboratorios que utilizan el conjunto estándar europeo (ESS) de loci. El kit ofrece una sensibilidad excelente y proporciona una configuración de marcador alternativa al formato del kit de amplificación de PCR NGM SElect para maximizar la recuperación de información, incluso a partir de muestras de tareas degradadas.
Al igual que con todos los kits STR de Applied Biosystems, el kit de detección de NGM es de grado de ADN forense ISO18385, lo que le da una idea al elegir este kit para sus muestras de trabajo.
Las características principales del kit de detección de NGM son:
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Aumento de las búsquedas de bases de datos en virtud de la priorización de marcadores con la mayor representación en bases de datos históricas
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Posicionamiento optimizado de SE33 en la gama sub-350 bp para respaldar el análisis de mezcla
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Compatibilidad de amplificación doble cuando se asocia con el kit de selección NGM
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Alta sensibilidad gracias a una nueva formulación de la mezcla maestra, junto con la capacidad de añadir hasta 15 μL de muestra a la reacción
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Tiempo de ciclo de PCR rápido—<60 min
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Marcador Y adicional que permite la confirmación de género
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Sistema de control de calidad integrado para verificar la configuración de la reacción y evaluar la presencia de inhibición en la muestra
Mayor búsqueda en la base de datosEl conjunto estándar europeo (ESS) de loci se estableció para permitir el intercambio transfronterizo de información y estaba compuesto por siete marcadores SGM/SEFiler Plus. El ESS se amplió a 12 loci en 2009 para incluir más marcadores que permitan una mayor compatibilidad entre los países vecinos.
Por ello, un gran número de perfiles históricos de la escena del crimen contenidos en las bases de datos consisten en datos de marcadores SGM/SEFiler Plus. Cuando se trata de casos difíciles, como casos que implican muestras degradadas, la recuperación de la información es limitada. En esta situación, la recuperación de los marcadores SGM/SEFiler Plus es clave para producir un perfil de ADN parcial que tenga el máximo solapamiento con los datos más antiguos contenidos en las bases de datos, lo que proporciona una mayor probabilidad de coincidencia y proporciona valiosos resultados de investigación.
El kit NGM Detect aprovecha al máximo el espacio que ofrecen los 6 colorantes y presenta un posicionamiento optimizado de los marcadores, colocando los marcadores SGM/SEFiler Plus en el rango de bajo peso molecular (LMW) para ayudar a garantizar la mayor compatibilidad con los conjuntos de datos históricos y la posibilidad de una mayor probabilidad de generar pistas de investigación.
Posicionamiento optimizado de SE33El marcador SE33, altamente polimórfico, es útil para el análisis de mezclas, pero se extiende hasta 500 pb en la mayoría de los kits de STR. Como resultado, es uno de los primeros marcadores en abandonar las muestras degradadas. En el kit NGM Detect, SE33 se extiende a un máximo de 351 bp para ayudar a aumentar significativamente las posibilidades de recuperación de este marcador altamente informativo en muestras difíciles.
Compatibilidad de amplificación dobleLa amplificación doble, en la que se usan dos kits de STR diferentes para amplificar una muestra, es una estrategia que puede usarse para confirmar o ampliar el resultado de un perfil de ADN para aumentar la confianza en el resultado final en el primero y para obtener información adicional en el segundo.El kit NGM Detect es un compañero avanzado del kit NGM SElect, que presenta los mismos loci, pero con diferentes secuencias de cebadores y diferente colocación de los marcadores. Cuando se utilizan los dos kits en combinación, diferentes secuencias de cebadores proporcionan confianza en que el perfil de consenso generado refleja el «verdadero» genotipo de la muestra. El posicionamiento de marcadores complementario coloca loci mini-STR en el kit NGM Detect en el intervalo de alto peso molecular (HMW) del kit NGM Select y viceversa, lo que significa que se pueden recuperar alelos adicionales de muestras degradadas cuando se utilizan los dos kits en combinación. Juntos, el sistema NGM Detect y NGM Select ofrecen 12 mini-STR independientes.
Sistema de control de calidad integradoEl ensayo IQC consta de dos secuencias sintéticas que no se encuentran en la naturaleza con cebadores específicos para cada uno de los objetivos. Proporciona una confirmación positiva de que el ensayo funciona como se esperaba en un ciclo dado.
Este sistema es especialmente útil para confirmar la validez de los resultados negativos y también se puede utilizar para distinguir muestras degradadas en comparación con las que contienen inhibidores de PCR, lo que complementa el análisis de datos e informa de las decisiones de procesamiento posteriores.
La experiencia es importanteEl kit NGM Detect forma parte de un flujo de trabajo de ADN forense totalmente integrado y validado, respaldado por una formación, un servicio y un apoyo globales superiores. Tendrá a su disposición científicos de servicio técnico y especialistas en aplicaciones de campo para responder a sus preguntas técnicas, revisar los datos y hacer recomendaciones sobre cómo llevar a cabo los ensayos y solucionar los resultados. Todos estos recursos ayudan a garantizar el éxito al utilizar las soluciones de identificación humana de Applied Biosystems en su laboratorio.
También ofrecemos una amplia gama de servicios profesionales de identificación humana (HPS) para ayudar a poner en línea nuevos kits y flujos de trabajo. Desde 2007, el equipo de HPS ha completado más de 400 proyectos de validación exitosos en todo el mundo con un personal de más de 20 especialistas de asistencia técnica, cada uno con un promedio de 8 años de experiencia forense en el mundo real, proporcionando a los clientes formación y asistencia técnica en profundidad sobre nuestros instrumentos, productos químicos y software.
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