Kit rápido de purificación de plásmidos Midi con bajo contenido de endotoxinas PureLink™
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Kit rápido de purificación de plásmidos Midi con bajo contenido de endotoxinas PureLink™

El kit de purificación de plásmidos midi bajo en endotoxinas y rápido PureLink utiliza columnas de última generación con membranasMás información
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Número de catálogoN.º de reacciones
A3622750 preparaciones
A3589225 preparaciones
Número de catálogo A36227
Precio (USD)
-
N.º de reacciones:
50 preparaciones
El kit de purificación de plásmidos midi bajo en endotoxinas y rápido PureLink utiliza columnas de última generación con membranas de sílice avanzadas que permiten el aislamiento de ADN plasmídico para transfección (inferior al 1 EU/μg) en unos 30 minutos. El protocolo simple sin precipitación produce hasta 0,4 mg de plásmido, adecuado para transfecciones estándar y todas las aplicaciones de biología molecular, como la clonación y la secuenciación.

NOTA: Para realizar este procedimiento es necesario utilizar un colector de vacío. Recomendamos nuestro colector de vacío FastVac.

Las ventajas del kit de purificación de plásmidos midi bajo en endotoxinas y rápido PureLink incluyen:
• Protocolo ultrarrápido: las innovadoras columnas a base de sílice permiten la purificación de ADN plasmídico de grado transfección en menos de 30 minutos
• Plásmido con bajo contenido de endotoxinas: el plásmido resultante contiene inferior al 1 EU/μg de endotoxinas
• Gran producción: aísle hasta 0,4 mg de ADN plasmídico de alta calidad
• Tampones de colores: el kit dispone de tampones de colores que permiten una visualización sin errores de la lisis celular bacteriana completa y su neutralización posterior

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

Especificaciones
Para utilizar con (aplicación)Clonación, PCR
N.º de reacciones50 preparaciones
Escala preparativaCultivo de entrada a escala midi de 25-100 ml para obtener rendimientos de hasta 200 µg
Línea de productosPureLink
Tipo de productoKit de purificación de plásmidos
Cantidad50 preparaciones
BásculaMidi
Condiciones de envíoTemperatura ambiente
Tiempo de prueba30 min
FormatoKit
Isolation TechnologyColumna de sílice
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
• Tampón de resuspensión, almacenar a 4 °C tras su recepción
• Tampón de lisis, almacenar a temperatura ambiente
• Tampón de precipitación, almacena ra temperatura ambiente
• Tampón de unión, almacenar a temperatura ambiente
• Tampón de lavado 1, almacenar a temperatura ambiente
• Tampón de lavado 2 (concentrado), almacenar a temperatura ambiente
• Tampón de elución, almacenar a temperatura ambiente
• Conjuntos de columna, almacenar a temperatura ambiente
• Filtros de jeringa, almacenar a temperatura ambiente
• Émbolos de jeringa, almacenar a temperatura ambiente
• Tubos de recogida, almacenar a temperatura ambiente

Preguntas frecuentes

Can I elute my plasmid from PureLink columns with water instead of TE?

For any silica columns, elution with water is generally possible. However, a buffer is preferred for stability and accuracy of absorbance readings, as pure water can have a very low pH (4 - 5).

What are endotoxins and why are their levels important for transfection?

Endotoxins are typically any cell-associated bacterial toxins that are part of the outer surface of the cell wall of gram-negative bacteria. Endotoxins can influence cell growth, cell differentiation, contractility, and protein expression in mammalian cells. Endotoxins are released during bacterial lysis, and they can subsequently reduce transfection efficiency and protein expression levels. Please review the following article for more information about endotoxins: Butash KA et al. (2000) Reexamination of the effect of endotoxin on cell proliferation and transfection efficiency. Biotechniques 29(3): 610-614, 616, 618-619.

What is the best way to determine the quality/purity of my plasmid DNA?

The ratio of absorbance at 260 nm to the absorbance at 280 nm (A260/A280) is typically used to measure purity of the sample. For DNA, the ideal A260/A280 ratio is 1.8, but it can be in the range of 1.7 - 1.9. The A260/A230 ratio is also used to determine if contamination is present. For DNA, the ideal A260/A230 ratio is between 1.8 and 2.0. DNA purity can also be examined by gel analysis. For plasmid DNA, look for a strong, single band (perhaps with a few extra bands representing multimers of the desired molecule). For genomic DNA, look for high average fragment sizes.

Do you offer a kit for plasmid extraction with endotoxin reduction?

We offer the following silica column-based plasmid purification kits for isolation of endotoxin-free or low-endotoxin plasmid DNA:
- PureLink Expi Endotoxin-Free Maxi Plasmid Purification Kit (Cat. No. A31217, A31231, A33073) (<0.1 EU/µg endotoxins):
https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/A31217
- PureLink Fast Low-Endotoxin Midi (Cat. No. A35892, A36227) or Maxi (Cat. No. A36228, A35895) Plasmid Purification Kits (<1 EU/µg endotoxins):
https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/A35892
https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/A36228

Will kit performance be affected if I exceed culture input volumes with PureLink Fast Low-Endotoxin Plasmid Purification kits?

Our recommendation is to not exceed the maximum recommended culture volumes specified in the kit manuals; using larger culture volumes means increased cell mass, which will result in reduced plasmid yield and purity.

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