Agarosa magnética anti-DYKDDDDK Pierce™

La agarosa magnética Thermo Scientific Pierce Anti-DYKDDDDK proporciona un método rápido y cómodo para la purificación e inmunoprecipitación (IP) de proteínas marcadas con DYKDDDDK de sistemas de expresión de proteínas in vitro, bacterias, levaduras y células de mamíferos. La secuencia de aminoácidos DYKDDDDK, comúnmente conocida como FLAG, es reconocida por un anticuerpo monoclonal de rata de alta afinidad (clon L5) que se une covalentemente a una partícula central de agarosa incrustada en magnetita.

Para la purificación de proteínas, la agarosa magnética se añade a una muestra que contiene proteínas marcadas con DYKDDDDK con la etiqueta en el terminal N o C. Las proteínas capturadas se separan magnéticamente del sobrenadante, y las proteínas no vinculadas específicamente se pueden lavar antes de disociar las proteínas marcadas con DYKDDDDK enlazadas con tampón de elución. La agarosa magnética se elimina de la solución mediante un soporte magnético o un instrumento como el procesador de partículas magnéticas KingFisher Flex. Los instrumentos automatizados son especialmente útiles para la purificación de mayor rendimiento y la detección de condiciones de purificación.

Las características incluyen:
Específico: los gránulos de base únicos y el anticuerpo altamente específico minimizan la unión fuera del objetivo (baja unión no específica)
Alta pureza: el protocolo de unión, lavado y elución optimizado permite una alta pureza
Alto rendimiento: el método de conjugación de anticuerpos especiales ofrece un alto rendimiento
Rápido: el protocolo de purificación completo normalmente tarda menos de 40 minutos
Económico: el protocolo de purificación permite múltiples usos
Versátil: los gránulos son compatibles con flujos de trabajo manuales y automáticos (p. ej., instrumentos KingFisher)

Características de la agarosa magnética Pierce Anti-DYKDDDDK:

Composición: anticuerpo anti-DYKDDDDK covalentemente enlazado a un soporte de agarosa magnética altamente entrecruzada
Magnetización: ferromagnético con baja remanencia
Tamaño de gránulo: 10–40 μm
Concentración de gránulos: 25 % de mezcla en solución salina tamponada con fosfato, 0,01 % de detergente Tween-20, 0,02 % de ácida sódica, pH 7,2
Capacidad de fijación: ≥3,2 mg de proteína DYKDDDDK-tGFP-HIS (∼32 kDa)/ml de gránulos sedimentados