Resina de afinidad anti-DYKDDDDK Pierce™

La resina de afinidad Thermo Scientific Pierce Anti-DYKDDDDK proporciona un método rápido y cómodo para la purificación e inmunoprecipitación (IP) de proteínas marcadas con DYKDDDDK expresadas en sistemas de expresión de proteínas in vitro, bacterias, levaduras y células de mamíferos. La secuencia de aminoácidos DYKDDDDK, comúnmente conocida como «FLAG» es reconocida por un anticuerpo monoclonal de rata de alta afinidad (clon L5) que se une covalentemente al soporte biológico UltraLink. El soporte biológico UltraLink es una resina rígida, hidrófila, altamente entrecruzada, copolimérica y porosa con alta capacidad de acoplamiento. La porosidad, rigidez y durabilidad de la resina la hacen adecuada para técnicas de flujo rápido y presión media que implican grandes volúmenes de muestras.

Para la purificación de proteínas o IP, la resina se añade a una muestra que contiene proteínas marcadas con DYKDDDDK con la etiqueta en el terminal N o C. Tras la captura de las proteínas marcadas con DYKDDDDK, las proteínas no vinculadas específicamente se pueden lavar antes de disociar las proteínas objetivo enlazadas con tampón de elución. La resina de afinidad Pierce Anti-DYKDDDDK se recomienda para su uso en columnas de purificación por centrifugación o cartuchos para instrumentos FPLC.

Las características incluyen:
• Específico: los gránulos de base únicos y el anticuerpo altamente específico minimizan la unión fuera del objetivo (baja unión no específica)
• Alta pureza: el protocolo de unión, lavado y elución optimizado permite una alta pureza
• Alto rendimiento: el método de conjugación de anticuerpos especiales ofrece un alto rendimiento
• Rápido: el protocolo de purificación completo normalmente tarda menos de 40 minutos
• Económico: el protocolo de purificación permite múltiples usos
• Versátil: los gránulos son compatibles con flujos de trabajo manuales y automáticos (p. ej., instrumentos KingFisher)
• Ampliable: disponible en tamaños de envase de resina sedimentada de 1, 5 y 50 ml para permitir inmunoprecipitaciones a menor escala o purificaciones a mayor escala

Características de la resina de afinidad Pierce Anti-DYKDDDDK:

Composición: anticuerpo anti-DYKDDDDK covalentemente enlazado al soporte biológico UltraLink, un soporte rígido altamente entrecruzado
Tamaño de partículas: 50–80 µm
Estabilidad del pH: 1–13
Velocidad lineal recomendada: <150 cm/hora
Temperatura de funcionamiento: 2–30 ⁰C; no congelar
Concentración de partículas:50 % de mezcla en solución salina tamponada con fosfato, 0,02 % de ácida sódica, pH 7,5
Capacidad de fijación: ≥3,0 mg de proteína DYKDDDDK-tGFP-HIS (∼32 kDa)/ml de resina sedimentada