Search Thermo Fisher Scientific
- Contáctenos
- Orden Rápida
-
¿No tiene una cuenta? Crear una cuenta
Search Thermo Fisher Scientific
Número de catálogo | Tamaño de la unidad | Precio (USD) | |
---|---|---|---|
A39260 | Contáctenos › |
Protocolo típico para el experimento de transferencia de etiquetas:
• Añada unos cuantos microlitros de reactivo Sulfo-SBED disuelto a 0,5-1 ml de proteína de cebo purificada en PBS.
• Incube la mezcla durante 30-120 minutos en hielo o a temperatura ambiente en la oscuridad.
• Desale o dialice (con luz tenue) para eliminar el exceso de Sulfo-SBED no reaccionado de la proteína de cebo etiquetada.
• Añada la proteína de cebo etiquetada al lisado celular o a otra solución que contenga los supuestos interactores de proteínas diana (presa).
• Cuando se hayan formado complejos de interacción, exponga la solución a la luz ultravioleta (365 nm) durante varios minutos.
• Analice los productos mediante uno de los siguientes métodos:
• Inmunotransferencia (Western Blotting): Separe entrecruzamientos en DTT, separe proteínas por SDS-PAGE y detectee bandas biotiniladas por Western blotting con estreptavidina-HRP.
• Purificación y espectrometría de masas o secuenciación: Purifique por afinidad proteínas biotiniladas o fragmentos de péptidos después de la digestión con tripsina y realice MS o secuenciación para caracterizar las proteínas involucradas.
Productos relacionados:
Kit de transferencia de etiquetas Sulfo-SBED Biotin - Aplicación de Western Blotting