5-(3-Aminoallyl)-dUTP (50 mM)

Cuando se incorpora al ADN, el 5-(3-aminoalilo)-dUTP proporciona un grupo reactivo para la adición de otros grupos químicos El dUTPMás información

Número de catálogo	Cantidad
AM8439	50 μL

Número de catálogo AM8439

Precio (USD)

Cantidad:

50 μL

Pedido a granel o personalizado

Cuando se incorpora al ADN, el 5-(3-aminoalilo)-dUTP proporciona un grupo reactivo para la adición de otros grupos químicos El dUTP modificado es incorporado fácilmente por la transcriptasa inversa. La modificación del aminoalilo permite la reacción posterior con compuestos amino-reactivos, como los ésteres de N-hidroxisuccinimida (NHS); por lo tanto, el ADNc modificado con aminoalilo puede etiquetarse con cualquier moiedad de grupoamino-reactivo.

Uso de este nucleótido modificado:
Utilice el 5-(3-aminoalilo)-dUTP como se recomienda en su protocolo de transcripción inversa. La sustitución del 30–80 % del dTTP por 5-(3-aminoalilo)-dUTP puede ser útil, pero la proporción exacta dependerá de los objetivos del experimento

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

Especificaciones

Línea de productosAmbion

Tipo de productoNucleótidos

Método de purificaciónHPLC

Cantidad50 μL

Condiciones de envíoHielo seco

Concentración50 mM

Para utilizar con (aplicación)Nucleic Acid Labeling

FormularioLíquido

Etiqueta o tinteAminoalil

Unit SizeEach

Contenido y almacenamiento

Almacenar a -70 °C o menos. Evite los ciclos múltiples de congelación/descongelación. Las alícuotas del producto pueden almacenarse a corto plazo a -20 °C. No almacenar en congeladores sin escarcha.

Preguntas frecuentes

Why are there only two amino-modified nucleotides in the dNTP mix for cDNA indirect labeling (aminoallyl-dUTP and aminohexyl-dATP) intead of all four nucleotides being modified? Would more modified nucleotides have an adverse effect on the microarray?

Using four modified nucleotides rather than two can cause fluorescence quenching since the fluorophores are positioned very closely to one another. Use of two amino-modified nucleotides in the cDNA synthesis reaction (rather than one) results in a greater incorporation of fluorescent dye and higher signal intensity with small amounts of RNA starting material. Unbiased incorporation of amino-modified dNTPs and the high efficiency of the coupling reaction result in an even distribution of fluorescent signal and high overall levels of fluorescence, increasing the sensitivity and reproducibility of array hybridizations. In addition to quenching, a very high dye density on the cDNA will interfere with hybridization and, therefore, yield lower microarray fluorescence signals. We found that the use of 2 amino-modified nucleotides (at the appropriate concentration) results in optimal incorporation and high microarray signals.

Can dU-containing DNA produced by amplification with dUTP be cut by restriction enzymes?

You will need to confirm with the manufacturer of the restriction enzyme you are using to find out whether or not it can recognize dUTP-containing DNA.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our PCR and cDNA Synthesis Support Center.