Kit de detección de apoptosis de anexina V eBioscience™
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Kit de detección de apoptosis de anexina V eBioscience™

Los kits utilizan la anexina V conjugada con colorante de viabilidad para etiquetar la fosfatidilserina (PS), un marcador temprano de la apoptosis, en la membrana extracelular.
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Número de catálogoCantidadExcitación/emisiónConjugado
BMS500FI-100100 pruebas488, 535/520, 617FITC, yoduro de propidio
88-8005-74200 pruebas488, 535/520, 617FITC, yoduro de propidio
88-8006-7250 pruebas405, 546/450, 647eFluor 450, 7-AAD
88-8006-74200 pruebas405, 546/450, 647eFluor 450, 7-AAD
88-8007-74200 pruebas650, 535/660, 617APC, yoduro de propidio
88-8008-7250 pruebasPCP-eFluor 710
88-8008-74200 pruebaPCP-eFluor 710
BMS500FI-2020 pruebas488, 535/520, 617FITC, yoduro de propidio
BMS500FI-300300 pruebas488, 535/520, 617FITC, yoduro de propidio
88-8102-7250 pruebasPE, 7-AAD
88-8102-74200 pruebasPE, 7-AAD
88-8103-7250 pruebasPE/Cy7
88-8103-74200 pruebasPE/Cy7
BMS500BT-100
también denominado BMS500BT/100
100 pruebasNA, 535/NA, 617Biotina, yoduro de propidio
BMS500BT-20
también denominado BMS500BT/20
20 pruebasNA, 535/NA, 617Biotina, yoduro de propidio
BMS500BT-300
también denominado BMS500BT/300
300 pruebasNA, 535/NA, 617Biotina, yoduro de propidio
88-8005-7250 pruebas488, 535/520, 617FITC, yoduro de propidio
88-8007-7250 pruebas650, 535/660, 617APC, yoduro de propidio
Número de catálogo BMS500FI-100
Precio (USD)
562,14
Each
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Cantidad:
100 pruebas
Excitación/emisión:
488, 535/520, 617
Conjugado:
FITC, yoduro de propidio
Precio (USD)
562,14
Each
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Distinga fácilmente las células en fase temprana y tardía de la apoptosis con los kits de detección de apoptosis de anexina V eBioscience para el análisis de citometría de flujo. Estos kits utilizan la anexina V conjugada con colorante de viabilidad para etiquetar la fosfatidilserina (PS), un marcador temprano de la apoptosis, en la membrana extracelular. En la apoptosis en fase tardía, a medida que se pierde la integridad celular, tanto la anexina V como el colorante de viabilidad atraviesan y unen la PS en el interior de la membrana plasmática.
Las anexinas son una familia de proteínas de unión a fosfolípidos dependientes del calcio que se unen preferentemente a la fosfatidilserina (PS). En condiciones fisiológicas normales, la PS se encuentra predominantemente en la capa interna de la membrana plasmática. Al inicio de la apoptosis, la PS pierde su distribución asimétrica a través de la bicapa fosfolípida y se traslocaliza a la membrana extracelular marcando las células como objetivos de la fagocitosis. Una vez en la superficie exterior de la membrana, la PS puede detectarse mediante anexina V marcada con fluorescencia de una forma dependiente de calcio.

En la apoptosis en estadio temprano, la membrana plasmática excluye los colorantes de viabilidad como el yoduro de propidio (PI), el 7-AAD o los colorantes de viabilidad con fijación como el eFluor 450. Estas células se tiñen con anexina V, pero no con un colorante de viabilidad, distinguiendo así las células en apoptosis temprana. Sin embargo, en la fase tardía de la apoptosis, la membrana celular pierde la integridad, lo cual permite a la anexina V introducir también PS en el interior de la célula. Se puede utilizar un colorante de viabilidad para distinguir las células en fases tardías de apoptosis y las células necróticas (anexina V y colorante de viabilidad positivo) de las células en fases tempranas de apoptosis (anexina V positiva, colorante de viabilidad negativo).

Las tinciones de viabilidad actuales disponibles con los kits de detección de apoptosis de anexina V eBioscience incluyen FITC, eFluor 450, aloficocianina (APC), ficoeritrina (PE), PE-cianina7 y biotina.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
DescripciónKit de detección de apoptosis de anexina V-FITC eBioscience
Excitación/emisión488, 535/520, 617
Para utilizar con (equipo)Citómetro de flujo
Contenido del kit• Tampón de unión (4X), 1 frasco (50 ml)
• rh Anexina V-FITC, 1 vial (0,5 ml)
• Yoduro de propidio (20 µg/ml), 1 vial (1,8 ml)
Tipo de productoKit de detección de apoptosis
Cantidad100 pruebas
Condiciones de envíoHielo húmedo
ConjugadoFITC, yoduro de propidio
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
2 °C a 8 °C. Evite las fluctuaciones de temperatura.

Preguntas frecuentes

Is annexin V specific for any particular species?

Annexin V binding of phospholipids is not species-specific. In the presence of millimolar concentrations of Ca2+, Annexin V binds to several phospholipids, but exhibits the highest affinity for phosphatidylserine. This feature is useful for screening cells undergoing apoptosis. Phosphatidylserine is usually distributed on the inner leaflet of the lipid bilayer, but when cells start to undergo apoptosis, the phosphatidylserine moves to the outer leaflet. The translocation of phosphatidylserine to the outer leaflet makes it available for Annexin V staining. Normal, intact cells will not stain with Annexin V, while cells undergoing apoptosis will be.

Annexin V staining can be visualized by fluorescence microscopy or flow cytometry using conjugates such as Annexin V-FITC, or Annexin V-biotin in conjugation with a streptavidin-conjugated fluorophore. It is important to note that experiments with Annexin V require that the cells under study are live cells with intact membranes. It is not suitable for use with fixed cells as the membrane develops holes during the fixation process, making the phosphatidylserine on the inner face of the membrane accessible for Annexin V binding. For similar reasons, this product is also not suitable for use with tissue sections. Because necrotic cells also have numerous membrane breaches, these cells are also often stained with Annexin V. A quick way to differentiate apoptotic from necrotic cells is with a double staining regime using Annexin V-FITC (green fluorescence) and the DNA staining dye propidium iodide (red fluorescence). Propidium iodide requires membrane breaches in order to gain access to the cell nucleus.

Using the Annexin V-FITC/propidium iodide double staining regime, the following staining patterns are observed with apoptotic and necrotic cells:
1. Cells that are normal will not stain with either Annexin V-FITC or propidium iodide (indicating no phosphatidylserine on the surface and no holes in the membrane).
2. Cells that are starting to undergo apoptosis will stain with Annnexin V-FITC only (indicating phosphatidylserine on the surface but no holes in the membrane).
3. Cells that are in late apoptosis and necrotic cells will stain with both Annexin V-FITC and with propidium iodide (indicating that we cannot tell where the phosphatidylserine is located and that there are holes in the membrane).

Phosphatidylserine is an ubiquitous membrane component among mammalian species; therefore, we believe that Annexin V has utility in monitoring apoptosis with any mammalian-derived cell line. One report (O'Brien et al., 1997) has even indicated its utility in monitoring apoptosis with plant cells. Dive, C., C.D. Gregory, D.J. Phipps, D.L. Evans, A.E. Milner, and A.H. Wyllie (1992) Analysis and discrimination of necrosis and apoptosis (programmed cell death) by multiparameter flow cytometry. Biochem. Biophys. Acta 1133:275-285. Koopman, G., C.P.M. Reutlingsperger, G.A.M. Kuitjen, R.M.J. Keehnen, S.T. Pals, and M.H.J. van Oers (1994) Annexin V for flow cytometric detection of phosphatidylserine expression on B cells undergoing apoptosis. Blood 84:1415-1420. O'Brien, I.E., C.P. Reutelingsperger, and K.M. Holdaway (1997) Annexin-V and TUNEL use in monitoring the progression of apoptosis in plants. Cytometry 29(1):28-33.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.

Can I use eFluor 450-conjugated antibodies with eBioscience Annexin V Apoptosis Detection kits?

Yes, eFluor 450-conjugated antibodies are compatible with eBioscience Annexin V Apoptosis Detection kits.

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