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Kit de ensayo de citometría de flujo Click-iT™ EdU Alexa Fluor™ 647
El kit de ensayo de citometría de flujo Click-iT™ EdU Alexa Fluor™ 647 proporciona un ensayo simplificado y más sólidoMás información
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| Número de catálogo | Cantidad |
|---|---|
| C10424 | 50 ensayos |
| C10419 | 100 ensayos |
Número de catálogo C10424
Precio (USD)
1.153,44
Each
Cantidad:
50 ensayos
Precio (USD)
1.153,44
Each
El kit de ensayo de citometría de flujo Click-iT™ EdU Alexa Fluor™ 647 proporciona un ensayo simplificado y más sólido para analizar la replicación de ADN en las células proliferantes en comparación con los métodos de BrdU tradicionales. El ADN recién sintetizado se analiza mediante el láser de 633/5 nm del citómetro de flujo.
• Exacto--Resultados superiores comparado con los ensayos BrdU
• Rápido--Resultados en tan solo 90 minutos
• Económico--Más ensayos por kit
Ver la guía de selección para todos los ensayos Click-iT™ EdU y Click-iT™ Plus EdU para citometría de flujo.
Un método avanzado que le da resultados superiores a BrdU
el método más preciso de análisis de proliferación es la medición directa de la síntesis de ADN. Originalmente, este procedimiento se realizaba mediante la incorporación de nucleósidos radiactivos, es decir, 3H-timidina. Este método fue reemplazado por la detección basada en anticuerpos del análogo nucleósido bromodesoxiuridina (BrdU). Los kits de ensayo de citrometría de flujo Click-iT™ EdU son una novedosa alternativa al ensayo de BrdU. EdU (5-etinil-2´-desoxiuridina) es un análogo de la timidina que se incorpora al ADN durante la síntesis de ADN activa. La detección se basa en la química de clic: una reacción covalente catalizada con cobre entre una azida y un alqueno. En esta aplicación, el alqueno se encuentra en la fracción de etinil de EdU, mientras que la azida se acopla a los tintes Alexa Fluor™ 488, Alexa Fluor™ 647 o Pacific BlueTM. Se utilizan métodos de citometría de flujo estándar para determinar el porcentaje de células de fase S en la población (Fig. 1).
Unas condiciones moderadas permiten el uso con tintes de ciclo celular y anticuerpos.
Las ventajas del etiquetado Click-iT™ EdU resultan fácilmente evidentes durante la realización del ensayo (Fig. 2). El pequeño tamaño de la azida del tinte permite la detección eficaz de los EdU incorporados utilizando condiciones moderadas, mientras que la fijación basada en aldehído estándar y la permeabilización de detergente son suficientes para que el reactivo de detección Click-iT™ obtenga acceso al ADN. Esto ocurre de manera diferente en los ensayos de BrdU donde se requiere la desnaturalización del ADN (mediante HCl, calor o digestión con ADNasa) para exponer la BrdU de forma que pueda detectarla un anticuerpo anti-BrdU. El procesamiento de las muestras para el ensayo de BrdU puede provocar una alteración de la señal de la distribución del ciclo celular, además de la destrucción de los sitios de reconocimiento de los antígenos cuando se utilice el método HCl. Por el contrario, el kit de proliferación de células EdU listo para su uso es compatible con tintes de ciclo celular. Este kit de ensayo EdU también se puede multiplexar con anticuerpos contra marcadores de superficie e intracelulares.
Protocolo rápido y sencillo
El protocolo Click-iT™ EdU se basa en los pasos de fijación mediante aldehído y permeabilización de detergente para el etiquetado de anticuerpos inmunohistoquímicos, pero EdU es compatible con
otros agentes de fijación/permeabilización, incluyendo la saponina y el metanol. En tan solo cinco pasos podrá empezar a analizar sus datos de proliferación celular:
• Tratar las células con EdUM
• Reparar y permeabilizar las células
•Detectar las células en fase S con el cóctel de detección Click-iT™ durante 30 minutos
• Lavar una vez
• Analizar
Consiga resultados exactos de manera económica
Al aumentar el número de ensayos por kit, el kit de ensayo de citometría de flujo Click-IT™ EdU Alexa Fluor™ 647 es más barato que los ensayos BrdU tradicionales, por lo que es la opción ideal para experimentos grandes.
Solo para uso en investigación. No diseñado para uso diagnóstico o terapéutico en humanos ni en animales.
• Exacto--Resultados superiores comparado con los ensayos BrdU
• Rápido--Resultados en tan solo 90 minutos
• Económico--Más ensayos por kit
Ver la guía de selección para todos los ensayos Click-iT™ EdU y Click-iT™ Plus EdU para citometría de flujo.
Un método avanzado que le da resultados superiores a BrdU
el método más preciso de análisis de proliferación es la medición directa de la síntesis de ADN. Originalmente, este procedimiento se realizaba mediante la incorporación de nucleósidos radiactivos, es decir, 3H-timidina. Este método fue reemplazado por la detección basada en anticuerpos del análogo nucleósido bromodesoxiuridina (BrdU). Los kits de ensayo de citrometría de flujo Click-iT™ EdU son una novedosa alternativa al ensayo de BrdU. EdU (5-etinil-2´-desoxiuridina) es un análogo de la timidina que se incorpora al ADN durante la síntesis de ADN activa. La detección se basa en la química de clic: una reacción covalente catalizada con cobre entre una azida y un alqueno. En esta aplicación, el alqueno se encuentra en la fracción de etinil de EdU, mientras que la azida se acopla a los tintes Alexa Fluor™ 488, Alexa Fluor™ 647 o Pacific BlueTM. Se utilizan métodos de citometría de flujo estándar para determinar el porcentaje de células de fase S en la población (Fig. 1).
Unas condiciones moderadas permiten el uso con tintes de ciclo celular y anticuerpos.
Las ventajas del etiquetado Click-iT™ EdU resultan fácilmente evidentes durante la realización del ensayo (Fig. 2). El pequeño tamaño de la azida del tinte permite la detección eficaz de los EdU incorporados utilizando condiciones moderadas, mientras que la fijación basada en aldehído estándar y la permeabilización de detergente son suficientes para que el reactivo de detección Click-iT™ obtenga acceso al ADN. Esto ocurre de manera diferente en los ensayos de BrdU donde se requiere la desnaturalización del ADN (mediante HCl, calor o digestión con ADNasa) para exponer la BrdU de forma que pueda detectarla un anticuerpo anti-BrdU. El procesamiento de las muestras para el ensayo de BrdU puede provocar una alteración de la señal de la distribución del ciclo celular, además de la destrucción de los sitios de reconocimiento de los antígenos cuando se utilice el método HCl. Por el contrario, el kit de proliferación de células EdU listo para su uso es compatible con tintes de ciclo celular. Este kit de ensayo EdU también se puede multiplexar con anticuerpos contra marcadores de superficie e intracelulares.
Protocolo rápido y sencillo
El protocolo Click-iT™ EdU se basa en los pasos de fijación mediante aldehído y permeabilización de detergente para el etiquetado de anticuerpos inmunohistoquímicos, pero EdU es compatible con
otros agentes de fijación/permeabilización, incluyendo la saponina y el metanol. En tan solo cinco pasos podrá empezar a analizar sus datos de proliferación celular:
• Tratar las células con EdUM
• Reparar y permeabilizar las células
•Detectar las células en fase S con el cóctel de detección Click-iT™ durante 30 minutos
• Lavar una vez
• Analizar
Consiga resultados exactos de manera económica
Al aumentar el número de ensayos por kit, el kit de ensayo de citometría de flujo Click-IT™ EdU Alexa Fluor™ 647 es más barato que los ensayos BrdU tradicionales, por lo que es la opción ideal para experimentos grandes.
Solo para uso en investigación. No diseñado para uso diagnóstico o terapéutico en humanos ni en animales.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Método de detecciónFluorescente
Tipo de coloranteAlexa Fluor™ 647
FormatoTubo(s)
Características ecológicasMenos peligroso
Cantidad50 ensayos
Condiciones de envíoTemperatura ambiente
Emission650⁄670
Para utilizar con (equipo)Citómetro de flujo
Línea de productosClick-iT
Tipo de productoKit de ensayo de citómetros de flujo
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Contiene EdU (5-etinil-2'-desoxiuridina), azida Alexa Fluor™ 647, dimetilsulfóxido anhidro (DMSO), fijador Click-iT™, tampón de permeabilidad y lavado Click-iT™ a base de saponina, sulfato de cobre (II) y aditivo tampón Click-iT™ EdU.Almacenar entre 2 °C y 8 °C Desecar y proteger de la luz.
Preguntas frecuentes
I will be performing a cell proliferation assay using Click-iT EdU kit. At what point can I stop overnight, or do I have to perform all the steps continuously?
Can I combine Click-iT or Click-iT Plus reactions with phalloidin conjugates used for actin staining?
Are the Alexa Fluor azides from Click-iT EdU kits available separately?
I am observing no signal or very low specific signal for my click-labeled samples. What can I do to improve the signal?
I am observing high non-specific background when I image my Click-iT EdU TUNEL-labeled samples. What is causing this and what can I do to reduce the background?
Citations & References (4)
Citations & References
Abstract
Polybrene inhibits human mesenchymal stem cell proliferation during lentiviral transduction.
Journal:PLoS One
PubMed ID:21887340
'Human mesenchymal stem cells (hMSCs) can be engineered to express specific genes, either for their use in cell-based therapies or to track them in vivo over long periods of time. To obtain long-term expression of these genes, a lentivirus- or retrovirus-mediated cell transduction is often used. However, given that the
Identifying disruptors of male germ cell development by small molecule screening in ex vivo gonad cultures.
Journal:BMC Res Notes
PubMed ID:23631647
'Germ cell development involves formation of the spermatogenic or oogenic lineages from the bipotential primordial germ cells. Signaling mechanisms in the fetal testis and ovary determine whether germ cells enter the male or female developmental pathway, respectively. These signaling processes underpin an important phase of germ cell development, disruption of
Constitutive phosphorylation of GATA-1 at serine²6 attenuates the colony-forming activity of erythrocyte-committed progenitors.
Journal:
PubMed ID:23717580
We previously reported that IL-3 signaling induces phosphorylation of GATA-1 at the serine²6 position, which contributes to IL-3-mediated anti-apoptotic response. Here, we demonstrate that phosphorylation of GATA-1 at serine²6 is also transiently induced in cells of the erythroid lineage (primary erythroblasts and erythrocyte-committed progenitors [EPs]) by erythropoietin (EPO), the principal
Aeroallergen challenge promotes dendritic cell proliferation in the airways.
Journal:J Immunol
PubMed ID:23267021
Aeroallergen provocation induces the rapid accumulation of CD11c(+)MHC class II (MHC II)(+) dendritic cells (DCs) in the lungs, which is driven by an increased recruitment of blood-derived DC precursors. Recent data show, however, that well-differentiated DCs proliferate in situ in various tissues. This may also contribute to their allergen-induced expansion;