Kits de etiquetado de proteínas fluorescente
Kits de etiquetado de proteínas fluorescente
Invitrogen™

Kits de etiquetado de proteínas fluorescente

Forme conjugados colorante-proteína estables en todo el espectro con cualquier de nuestros 16 kits de etiquetado de proteínas disponibles para su uso en diversas aplicaciones de microscopía de fluorescencia, incluidos la citometría de flujo, IHC/IF/ICC, FISH y análisis de gran contenido.
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Número de catálogoEtiqueta o tinte
D20655Biotin (DSB-X)
A10170Alexa Fluor 350
A10235Alexa Fluor 488
A10237Alexa Fluor 546
A10238Alexa Fluor 568
A20173Alexa Fluor 647
F10240FITC (fluoresceína)
O10241
también denominado O-10241
Oregon Green 488
P30012Pacific Blue
Número de catálogo D20655
Precio (USD)
1.036,80
Each
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Etiqueta o tinte:
Biotin (DSB-X)
Precio (USD)
1.036,80
Each
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Listos para su uso en solo 90 minutos, nuestros kits de etiquetado de proteínas incluyen columna de centrifugación preempaquetada de fácil uso para una rápida retirada del colorante y una recuperación habitual superior al 85 %. Cada kit contiene suficiente reactivo para 3–5 reacciones de conjugación de proteínas. Nuestros kits proporcionan mejores resultados debido a una menor fluorescencia de fondo, menos uniones no específicas y flujos de trabajo más sencillos para la conjugación de proteínas con 16 fluoróforos distintos.

• Etiquete con fluorescencia 1 mg de proteínas por reacción (tres reacciones por kit)
• Etiquete 0,5–3 mg por reacción con el kit de etiquetado de proteínas DSB-X Biotin (cinco reacciones por kit)
• Proteínas etiquetadas listas para su uso en 90 minutos. (∼15 minutos de manipulación)
• Purifique proteínas con rapidez eliminado el colorante no unido rápidamente utilizando las columnas de centrifugación preempaquetadas con una recuperación del >85 %
• Incluye instrucciones detalladas para la determinación del grado de etiquetado (DOL)

Cada kit de etiquetado de proteínas contiene todo lo necesario para realizar de 3-5 reacciones de etiquetado independientes y purificar los conjugados resultantes. El colorante reactivo tiene una fracción de éster succinimidilo (SE) o éster tetrafluorofenil (TFP) que reacciona eficazmente con las aminas primarias de las proteínas para formar conjugados de colorante–proteína estables. Cada vial de colorante reactivo suministrado en el kit es suficiente para etiquetar 1 mg de diversas proteínas purificadas, incluidos factores de crecimiento, citocinas, nanocuerpos, enzimas, moléculas de adhesión celular y anticuerpos.

El etiquetado directo de fluoróforos permite el uso de diversos anticuerpos primarios del mismo isotipo (derivados de la misma especie) en el mismo experimento. Las proteínas de estabilización, como BSA, deben eliminarse de la muestra antes del etiquetado.

Distintos kits de etiquetado de proteínas
Azul fluorescente Alexa Fluor 350—excitación y emisión máximas de 346/442 nm
Verde fluorescente Alexa Fluor 488—excitación y emisión máximas de 494/519 nm; excitado con una línea de láser de argón de 488 nm y se detecta con filtros estándar FITC/Cy2
Amarillo fluorescente Alexa Fluor 532—excitación y emisión máximas de 530/554 nm; excitado con una línea láser de Nd:YAG de 532 nm y se detecta con filtros estándar de rodamina 6G
Naranja fluorescente Alexa Fluor 546—excitación y emisión máximas de 554/570 nm; excitado con una línea láser de He-Ne de 543 nm y se detecta con filtros estándar TRITC/Cy3
Naranja fluorescente Alexa Fluor 555—excitación y emisión máximas de 555/565 nm; excitado con una línea láser de He-Ne de 543 nm y se detecta con filtros estándar TRITC/Cy3
Naranja rojo fluorescente Alexa Fluor 568—excitación y emisión máximas de 577/603 nm; excitado con una línea láser de Kr de 568 nm y se detecta con filtros estándar de rodamina rojo/Cy3.5
Rojo fluorescente Alexa Fluor 594—excitación y emisión máximas de 590/617 nm; excitado con una línea láser de Kr o He-Ne de 594 nm y se detecta con filtros estándar Texas rojo
Rojo lejano fluorescente Alexa Fluor 633—excitación y emisión máximas de 632/647 nm
Rojo lejano fluorescente Alexa Fluor 647—excitación y emisión máximas de 650/668 nm; excitado con una línea de láser de Kr o He-Ne de 633 o 635 nm y se detecta con filtros estándar APC/Cy5.
Rojo lejano fluorescente Alexa Fluor 660—excitación y emisión máximas de 663/690 nm
Fluorescente cercano al infrarrojo Alexa Fluor 680—excitación y emisión máxima de 680/700 nm
Verde fluorescente Fluorescein-EX—excitación y emisión máxima de 494/518 nm
Verde Oregon 488—excitación y emisión máxima de 496/524 nm
Pacific Blue—colorante violeta excitable mediante luz con una excitación y emisión máxima de 410/455 nm
Texas Red-X—excitación y emisión máxima de 595/615 nm
DSB-X Biotin—Los conjugados se pueden unir de forma reversible a proteínas de unión de proteína, como estreptavidina o avidina. La concentración (mg/ml) de la preparación de anticuerpo etiquetado con DSB-X Biotin se puede determinar midiendo la absorbancia de la muestra dializada a 280 nm y dividiendo este valor entre 1,3 o 1,4 cuando se mida en una solución en una cubeta con una trayectoria de 1 cm. DSB-X Biotin no se absorbe de manera significativa a 280 nm.

Para etiquetar cantidades más pequeñas de anticuerpos (∼100 μg), recomendamos nuestros kits de etiquetados de anticuerpos. Consulte el manual del usuario del kit de etiquetado de proteínas para obtener más información sobre protocolos, pesos moleculares y el grado de etiquetado de cada colorante.

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Especificaciones
ColorIncolora
Método de detecciónA base de biotina
Tipo de etiquetaBiotina y otros haptenos
Escala de etiquetadoDe 0,5 a 3 mg
Línea de productosDSB-X
Tipo de productoKit de etiquetado de proteínas
Cantidad1 kit
Condiciones de envíoTemperatura ambiente
Reactividad químicaAmina
Labeling TargetProteínas
Etiqueta o tinteBiotin (DSB-X)
SolubilidadDMSO (dimetilsulfóxido)
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Almacenar en refrigerador a entre 2 °C y 8 °C

Preguntas frecuentes

How can I biotinylate my antibodies if the antibody concentration is low?

Given that the concentration of your antibodies is low, the biotinylation efficiency will be reduced (the lowest concentration given in the protocol is 0.5 mg per mL). In-house, we have not used less than 0.5 µg per mL of antibody, but increasing the amount of DSB-X biotin (Table 1 in manual for DSB-X Biotin Protein Labeling Kit (Cat. No. D-20655) from 2µL to 4µL in the coupling reaction might increase the efficiency).

Biotinylation of 0.5 mg per mL antibody according to the protocol:
0.5 mg per mL x 0.2 mL = 0.1 mg antibody
Yield of biotinylated antibody: (0.1 mg antibody x 0.85%) in 0.2 mL = 0.4 mg per mL
Amount of biotinylated antibody in 25 µL: 0.4 mg per mL x 25 µL = 10 µg antibody in 25 µL, which is in the recommended range (5-50 µg for 5 x 10e7 cells).

Biotinylation of 0.2 mg per mL: 0.2 mg per mL x 0.2 mL = 0.04 mg antibody
Yield of biotinylated antibody: (0.04 mg antibody x 0.85%) in 0.2 mL = 0.17 mg per mL
Amount of biotinylated antibody in 25 µL: 0.17 mg per mL x 25 µL = 4 µg antibody in 25 µL, which is slightly outside the recommended range.

Note: Antibody may be easily concentrated without affecting the biological activity by using centrifuge concentrators (i.e., Centricon filter columns).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Citations & References (8)

Citations & References
Abstract
Easily reversible desthiobiotin binding to streptavidin, avidin, and other biotin-binding proteins: uses for protein labeling, detection, and isolation.
Authors:Hirsch JD, Eslamizar L, Filanoski BJ, Malekzadeh N, Haugland RP, Beechem JM, Haugland RP
Journal:Anal Biochem
PubMed ID:12419349
'The high-affinity binding of biotin to avidin, streptavidin, and related proteins has been exploited for decades. However, a disadvantage of the biotin/biotin-binding protein interaction is that it is essentially irreversible under physiological conditions. Desthiobiotin is a biotin analogue that binds less tightly to biotin-binding proteins and is easily displaced by ... More
A novel signaling pathway: fibroblast nicotinic receptor alpha1 binds urokinase and promotes renal fibrosis.
Authors:Zhang G, Kernan KA, Thomas A, Collins S, Song Y, Li L, Zhu W, Leboeuf RC, Eddy AA,
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:19690163
'The nicotinic acetylcholine receptor alpha1 (nAChRalpha1) was investigated as a potential fibrogenic molecule in the kidney, given reports that it may be an alternative urokinase (urokinase plasminogen activator; uPA) receptor in addition to the classical receptor uPAR. In a mouse obstructive uropathy model of chronic kidney disease, interstitial fibroblasts were ... More
Presensitizing with a Toll-like receptor 3 ligand impairs CD8 T-cell effector differentiation and IL-33 responsiveness.
Authors:Ngoi SM, St Rose MC, Menoret AM, Smith DE, Tovey MG, Adler AJ, Vella AT,
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:22689946
'The synthetic double-stranded RNA poly(I:C) is commonly used as an adjuvant to boost CD8 T-cell function; however, polyinosinic:polycytidylic acid [poly(I:C)] can also suppress autoimmune disease. The mechanism by which a single adjuvant achieves two distinct immunoregulatory roles is unknown. Although it is clear that coadministration of poly(I:C) with antigen elicits ... More
Identification of alpha-enolase as a nuclear DNA-binding protein in the zona fasciculata but not the zona reticularis of the human adrenal cortex.
Authors:Wang W, Wang L, Endoh A, Hummelke G, Hawks CL, Hornsby PJ,
Journal:J Endocrinol
PubMed ID:15642786
'In order to establish whether there are differences in DNA-binding proteins between zona fasciculata (ZF) and zona reticularis (ZR) cells of the human adrenal cortex, we prepared nuclear extracts from separated ZF and ZR cells. The formation of DNA-protein complexes was studied using an element in the first intron of ... More
Diabetes induces stable intrinsic changes to myeloid cells that contribute to chronic inflammation during wound healing in mice.
Authors:Bannon P, Wood S, Restivo T, Campbell L, Hardman MJ, Mace KA,
Journal:
PubMed ID:24057002
Acute inflammation in response to injury is a tightly regulated process by which subsets of leukocytes are recruited to the injured tissue and undergo behavioural changes that are essential for effective tissue repair and regeneration. The diabetic wound environment is characterised by excessive and prolonged inflammation that is linked to ... More