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BODIPY™ 576/589 NHS Ester (Succinimidyl Ester)
El tinte BODIPY™ 576/589 es un tinte fluorescente rojo brillante con una excitación y emisión similares al tinte Alexa Fluor™568Más información
| Número de catálogo | Cantidad |
|---|---|
| D2225 también denominado D-2225 | 5 mg |
Número de catálogo D2225
también denominado D-2225
Precio (USD)
-
Cantidad:
5 mg
El tinte BODIPY™ 576/589 es un tinte fluorescente rojo brillante con una excitación y emisión similares al tinte Alexa Fluor™568 o Rhodamine Red™. Tiene un alto coeficiente de extinción y rendimiento cuántico de fluorescencia y es relativamente insensible a la polaridad de los disolventes y al cambio de pH. A diferencia de los fluoróforos altamente solubles en agua de los colorantes Alexa Fluor™ 488 y la fluoresceína (FITC), los colorantes BODIPY™ tienen propiedades hidrofóbicas únicas ideales para la coloración de lípidos, membranas y otros compuestos lipofílicos. El colorante BODIPY™ 576/589 tiene una vida útil de estado excitado relativamente larga (normalmente 5 nanosegundos o más), lo cual es útil para ensayos basados en la polarización de fluorescencia y una sección transversal grande de dos fotones para la excitación multifotónica. Además de las formulaciones reactivas de colorantes, ofrecemos el colorante BODIPY™ 576/589 conjugado con una serie de anticuerpos, péptidos, proteínas, trazadores y sustratos de amplificación optimizados para la detección y el marcado celular.
El éster NHS (o éster succinidil) de BODIPY™ 576/589 es la herramienta más popular para conjugar el colorante a una proteína o anticuerpo. Los ésteres de NHS se pueden usar para marcar aminas primarias (R-NH2) de proteínas, oligonucleótidos modificados por aminas y otras moléculas que contengan aminas. Los conjugados BODIPY™ 576/589 obtenidos presentan una fluorescencia brillante, unos anchos de banda de emisión estrechos y una vida útil de estado excitado relativamente larga, que puede ser útil para ensayos de polarización de fluorescencia y microscopia de excitación de dos fotones (TPE).
Este colorante reactivo contiene un espaciador de alquilo C3 entre el fluoróforo y el grupo éster NHS. Este espaciador ayuda a separar el fluoróforo de su punto de fijación y reduce potencialmente la interacción del fluoróforo con la biomolécula a la que se conjuga.
Información detallada sobre el éster NHS BODIPY™ 576/589:
Marca de fluoróforo: Colorante BODIPY™ 576/589
Grupo reactivo: éster de NHS (succinimidilo éster)
Reactividad: Aminas primarias en proteínas y ligandos, oligonucleótidos modificados con aminas
Ex/Em del conjugado: 575/588 nm
Coeficiente de extinción: 83.000 cm-1 M-1
Peso molecular: 426,19
Reacción de conjugación típica
Los reactivos de amina se pueden conjugar con prácticamente cualquier proteína o péptido (el protocolo proporcionado está optimizado para anticuerpos IgG). La reacción se puede ampliar para cualquier cantidad de proteína, pero la concentración de la proteína debe ser de, al menos, 2 mg/ml para obtener unos resultados óptimos. Recomendamos probar tres grados de etiquetado distintos, utilizando tres proporciones molares diferentes del reactivo en la proteína.
El éster de NHS BODIPY™ suele disolverse en dimetilformamida (DMF) anhidra o dimetilsulfóxido (DMSO) de gran calidad, y la reacción se lleva a cabo en un tampón de bicarbonato sódico de 0,1 a 0,2 M, con pH 8,3 y a temperatura ambiente durante 1 hora. Dado que la pKa de la amina terminal es inferior a la del grupo amino épsilon de lisina, puede realizar un etiquetado más selectivo de la terminal amina mediante un tampón más cercano al pH neutro.
Purificación del conjugado
Los anticuerpos marcados se separan normalmente del colorante BODIPY™ no unido mediante una columna de filtración en gel, como Sephadex™ G-25, BioGel™ P-30 o equivalente. Para proteínas mucho más o mucho menos voluminosas, seleccione un medio de filtración en gel con un corte de peso molecular adecuado o purifique por diálisis. Ofrecemos varios kits de purificación optimizados para diferentes cantidades de conjugado de anticuerpos:
Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 0,5-1 mg (A33086)
Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 20-50 µg (A33087)
Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 50-100 µg (A33088)
Más información sobre el etiquetado de proteínas y anticuerpos
Ofrecemos una amplia selección de kits de etiquetado de anticuerpos y proteínas Molecular Probes™ que se ajustan a su material de partida y a su configuración experimental. Consulte nuestros kits de etiquetado de anticuerpos o utilice nuestra herramienta de selección química de etiquetado para otras opciones. Para obtener más información acerca de nuestros kits de marcado, lea la sección 1.2 sobrekits para marcado de proteínas y ácidos nucleicos del manual de Molecular Probes™.
Creamos conjugados personalizados
Si no encuentra lo que busca en nuestro catálogo en línea, le prepararemos el conjugado de anticuerpos o proteínas que desee. Nuestro servicio de conjugación personalizada es eficiente y confidencial, y garantizamos la calidad de nuestro trabajo. Contamos con la certificación ISO 9001:2000.
El éster NHS (o éster succinidil) de BODIPY™ 576/589 es la herramienta más popular para conjugar el colorante a una proteína o anticuerpo. Los ésteres de NHS se pueden usar para marcar aminas primarias (R-NH2) de proteínas, oligonucleótidos modificados por aminas y otras moléculas que contengan aminas. Los conjugados BODIPY™ 576/589 obtenidos presentan una fluorescencia brillante, unos anchos de banda de emisión estrechos y una vida útil de estado excitado relativamente larga, que puede ser útil para ensayos de polarización de fluorescencia y microscopia de excitación de dos fotones (TPE).
Este colorante reactivo contiene un espaciador de alquilo C3 entre el fluoróforo y el grupo éster NHS. Este espaciador ayuda a separar el fluoróforo de su punto de fijación y reduce potencialmente la interacción del fluoróforo con la biomolécula a la que se conjuga.
Información detallada sobre el éster NHS BODIPY™ 576/589:
Marca de fluoróforo: Colorante BODIPY™ 576/589
Grupo reactivo: éster de NHS (succinimidilo éster)
Reactividad: Aminas primarias en proteínas y ligandos, oligonucleótidos modificados con aminas
Ex/Em del conjugado: 575/588 nm
Coeficiente de extinción: 83.000 cm-1 M-1
Peso molecular: 426,19
Reacción de conjugación típica
Los reactivos de amina se pueden conjugar con prácticamente cualquier proteína o péptido (el protocolo proporcionado está optimizado para anticuerpos IgG). La reacción se puede ampliar para cualquier cantidad de proteína, pero la concentración de la proteína debe ser de, al menos, 2 mg/ml para obtener unos resultados óptimos. Recomendamos probar tres grados de etiquetado distintos, utilizando tres proporciones molares diferentes del reactivo en la proteína.
El éster de NHS BODIPY™ suele disolverse en dimetilformamida (DMF) anhidra o dimetilsulfóxido (DMSO) de gran calidad, y la reacción se lleva a cabo en un tampón de bicarbonato sódico de 0,1 a 0,2 M, con pH 8,3 y a temperatura ambiente durante 1 hora. Dado que la pKa de la amina terminal es inferior a la del grupo amino épsilon de lisina, puede realizar un etiquetado más selectivo de la terminal amina mediante un tampón más cercano al pH neutro.
Purificación del conjugado
Los anticuerpos marcados se separan normalmente del colorante BODIPY™ no unido mediante una columna de filtración en gel, como Sephadex™ G-25, BioGel™ P-30 o equivalente. Para proteínas mucho más o mucho menos voluminosas, seleccione un medio de filtración en gel con un corte de peso molecular adecuado o purifique por diálisis. Ofrecemos varios kits de purificación optimizados para diferentes cantidades de conjugado de anticuerpos:
Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 0,5-1 mg (A33086)
Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 20-50 µg (A33087)
Kit de purificación de conjugado de anticuerpos para 50-100 µg (A33088)
Más información sobre el etiquetado de proteínas y anticuerpos
Ofrecemos una amplia selección de kits de etiquetado de anticuerpos y proteínas Molecular Probes™ que se ajustan a su material de partida y a su configuración experimental. Consulte nuestros kits de etiquetado de anticuerpos o utilice nuestra herramienta de selección química de etiquetado para otras opciones. Para obtener más información acerca de nuestros kits de marcado, lea la sección 1.2 sobrekits para marcado de proteínas y ácidos nucleicos del manual de Molecular Probes™.
Creamos conjugados personalizados
Si no encuentra lo que busca en nuestro catálogo en línea, le prepararemos el conjugado de anticuerpos o proteínas que desee. Nuestro servicio de conjugación personalizada es eficiente y confidencial, y garantizamos la calidad de nuestro trabajo. Contamos con la certificación ISO 9001:2000.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Reactividad químicaAmina
Emisión588 nm
Excitación575 nm
Etiqueta o tinteBODIPY™ 576⁄589
Tipo de productoTinte
Cantidad5 mg
Fracción reactivaEster activo, succinimidilo éster
Condiciones de envíoTemperatura ambiente
Tipo de etiquetaColorantes BODIPY
Línea de productosBODIPY
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Almacenar en el congelador (de – 5 a – 30 °C) y proteger de la luz.
Citations & References (9)
Citations & References
Abstract
Wavelength-resolved fluorescence detection in capillary electrophoresis.
Journal:Anal Chem
PubMed ID:7864386
'A multichannel laser-induced fluorescence detector for capillary electrophoresis is described. The detection system combines yoctomole limits of detection with the simultaneous acquisition of entire fluorescence emission spectra. An Ar/Kr mixed-gas ion laser provides great flexibility in excitation wavelengths, and a holographic grating and charge-coupled device detector combination allows a 500-nm
FRET analysis of protein conformational change through position-specific incorporation of fluorescent amino acids.
Journal:Nat Methods
PubMed ID:17060916
'We designed and synthesized new, fluorescent, non-natural amino acids that emit fluorescence of wavelengths longer than 500 nm and are accepted by an Escherichia coli cell-free translation system. We synthesized p-aminophenylalanine derivatives linked with BODIPY fluorophores at the p-amino group and introduced them into streptavidin using the four-base codon CGGG
Detection of the DeltaF508 mutation in the CFTR gene by means of time-resolved fluorescence methods.
Journal:Bioelectrochem Bioenerg
PubMed ID:10379562
A rapid recognition in the base sequence of nucleic acids is an important prerequisite toward the diagnosis of genetic diseases and their carrier states. We have developed a hybridisation method in which a fluorescently labeled oligonucleotide is used to detect point mutations in a target by a simple fluorescence lifetime
Molecular dynamics of labeled oligonucleotide probes used for the detection of point mutations in DNA.
Journal:Nucleosides Nucleotides
PubMed ID:10408923
The fluorescent label BODIPY 576-589 linked to the 5-end of an oligonucleotide via alkyl chain linkers can be used as a probe to detect point mutations in DNA. We have employed fluorescence anisotropy decay and dynamic fluorescence resonance energy transfer (FRET) in order to investigate the molecular origin of the
Systematic evaluation of transcellular activities of secretory phospholipases A2. High activity of group V phospholipases A2 to induce eicosanoid biosynthesis in neighboring inflammatory cells.
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:16476735
The mechanisms by which secretory phospholipase A2 (PLA2) exerts cellular effects are not fully understood. To elucidate these mechanisms, we systematically and quantitatively assessed the activities of human group IIA, V, and X PLA2s on originating and neighboring cells using orthogonal fluorogenic substrates in various mixed cell systems. When HEK293