Dextran, Tetramethylrhodamine and biotin, 3000 MW, Lysine Fixable (micro-Ruby)
Dextran, Tetramethylrhodamine and biotin, 3000 MW, Lysine Fixable (micro-Ruby)
Invitrogen™

Dextran, Tetramethylrhodamine and biotin, 3000 MW, Lysine Fixable (micro-Ruby)

Los dextranos marcados son polisacáridos hidrófilos que se usan más comúnmente en estudios de microscopía para supervisar la división deMás información
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Número de catálogoCantidad
D7162
también denominado D-7162
5 mg
Número de catálogo D7162
también denominado D-7162
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-
Cantidad:
5 mg
Los dextranos marcados son polisacáridos hidrófilos que se usan más comúnmente en estudios de microscopía para supervisar la división de células, registrar el movimiento de las células vivas e informar de las propiedades hidrodinámicas de la matriz citoplásmica. El dextrano etiquetado se introduce comúnmente en las células mediante microinyección.

¿Necesita otro espectro de emisión o un seguimiento más prolongado? Consulte nuestros otros productos de seguimiento de células de mamífero.

Especificaciones del dextrano:

Etiqueta (Ex/Em): Tetrametilrodamina y biotina (555/580)
Tamaño: 3000 PM
Carga: aniónica
Fijable: Fijable con lisina

Altos estándares de fabricación de dextranos de Molecular Probes™
Ofrecemos más de 50 conjugados de dextranos fluorescentes y biotinilados en diversos rangos de peso molecular. Los dextranos son polisacáridos hidrofílicos que se caracterizan por su peso molecular de alto a moderado, su buena solubilidad en agua y su baja toxicidad. También suelen tener baja inmunogenicidad. Los dextranos son biológicamente inertes debido a sus vínculos poli-(α-D-1,6-glucosa) poco comunes, que los hacen resistentes a la incisión por la mayoría de las glucosidasas celulares endógenas.

En la mayoría de los casos, los dextranos fluorescentes Molecular Probes™ son mucho más brillantes y tienen una mayor carga negativa que los dextranos disponible de otras fuentes. Además, utilizamos métodos rigurosos para eliminar todo el colorante no conjugado posible y, a continuación, probar nuestros conjugados de dextranos por cromatografía de capa fina para ayudar a garantizar la ausencia de contaminantes de bajo peso molecular.

Una amplia selección de sustituyentes y pesos moleculares
Los dextranos Molecular Probes™ se conjugan con biotina o una amplia variedad de fluoróforos, incluidos siete de nuestros colorantes Alexa Fluor™ (Molecular Probes dextran conjugates–Table 14.4 [Conjugados de dextranos Molecular Probes, tabla 14.4]) y están disponibles en estos pesos moleculares nominales (PM): 3000; 10.000; 40.000; 70.000; 500.000 y 2.000.000 daltons.

Carga neta y capacidad de fijación del dextrano
Empleamos acoplamiento con succinimidilo de nuestros colorantes a la molécula de dextrano, que, en la mayoría de los casos, da lugar a un dextrano neutro o aniónico. La reacción usada para producir los dextranos Rhodamine Green™ y Alexa Fluor 488 hacen que el producto final sea neutro, aniónico o catiónico. Los dextranos Alexa Fluor, Cascade Blue, Lucifer Yellow, fluoresceína y Oregon Green son intrínsecamente aniónicos, mientras que la mayoría de los dextranos etiquetados con los tintes rodamina de zwiterión B, tetrametilrodamina y Texas Red™ son esencialmente neutros. Para producir más dextranos altamente aniónicos, hemos desarrollado un procedimiento exclusivo para agregar grupos con carga negativa a los portadores de dextranos; estos productos se denominan dextranos “polianiónicos”.

Algunas aplicaciones requieren que el trazador de dextranos se trate con formaldehído o glutaraldehído para su posterior análisis. Para estas aplicaciones, ofrecemos versiones que se pueden “fijar con lisina” de la mayoría de nuestros conjugados de dextranos de fluoróforos o biotina. Estos dextranos se han unido covalentemente residuos de lisina que permiten a conjugar los trazadores de dextranos con las biomoléculas circundantes mediante la fijación con aldehído para la detección posterior mediante técnicas imunohistoquímias y ultraestructurales. También hemos demostrado que 10.000 PM de conjugados de dextranos Alexa Fluor se pueden fijar con fijadores basados en aldehído.

Aplicaciones clave con dextranos etiquetados
Hay numerosas citas que describen el uso de dextranos etiquetados. Estos son algunos de los usos más comunes:

Rastreo neuronal (anterógrado y retrógrado) en células vivas
Rastreo de linaje celular en células vivas
Rastreo neuroanatómico
Investigación de las comunicaciones intercelulares (p. ej., en uniones de comunicación, durante la cicatrización de heridas y durante el desarrollo embrionario)
Investigación de la permeabilidad vascular y la integridad de la barrera hematoencefálica
Seguimiento de la endocitosis
Supervisión de la acidificación (algunos conjugados de dextranos son sensibles al pH)
Estudio de las propiedades hidrodinámicas de la matriz citoplasmática

Solo para uso en investigación. No diseñado para uso terapéutico o de diagnóstico en animales o humanos.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Etiqueta o tinteColorantes clásicos
Tipo de productoDextrano
Cantidad5 mg
Condiciones de envíoTemperatura ambiente
Excitation/Emission555/580 nm
Línea de productosInvitrogen
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Almacenar en el congelador (de -5 a -30 °C) y proteger de la luz.

Preguntas frecuentes

I can't see the structural details of neurons when I inject my fluorescent dextran. What can I do to improve the detailed structure?

If you want to see the most detailed structure you should use the low molecular weight conjugated dextrans such as the 3,000 MW dextrans.

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Why isn't my fluorescently conjugated dextran signal retained after fixation?

Ensure that the dextran you are using is the fixable form (i.e., contains a primary amine). Dextrans that do not contain a primary amine will not be fixed. Another factor could be that the concentration of the dextran is too low, and the concentration use can be increased up to 10 mg/mL.

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Why do I lose all signal from my neuronal tracer when I do a methanol fixation on my cells?

If the tracer you chose is a lipophilic dye and fix with methanol, the lipids are lost with the methanol. If you have to use methanol fixation then choose a tracer that will covalently bind to proteins in the neurons.

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I stained my cells with a lipophilic cyanine dye, like DiI, but the signal was lost when I tried to follow up with antibody labeling. Why?

Since these dyes insert into lipid membranes, any disruption of the membranes leads to loss of the dye. This includes permeabilization with detergents like Triton X-100 or organic solvents like methanol. Permeabilization is necessary for intracellular antibody labeling, leading to loss of the dye. Instead, a reactive dye such as CFDA SE should be used to allow for covalent attachment to cellular components, thus providing for better retention upon fixation and permeabilization.

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I labeled my neurons with DiI and then fixed and permeabilized and now I have no signal. What did I do wrong?

DiI is a lipophilic dye that resides mostly in lipids in the cell, when cells are permeabilized with detergent or fixed using alcohol this strips away the lipid and the dye. If permeabilization is required CM-DiI can be used because this binds covalently to proteins in the membrane; some signal is lost upon fixation/permeabilization, but enough signal should be retained to make detection possible.

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Citations & References (13)

Citations & References
Abstract
Retrograde transport of sodium selenite and intracellular injection of micro-ruby: a combined method to describe the morphology of zinc-rich neurones.
Authors:Miró-Bernié N, Sancho-Bielsa FJ, López-García C, Pérez-Clausell J
Journal:J Neurosci Methods
PubMed ID:12906949
'Zinc is found in synaptic vesicles in a large number of glutamatergic systems. Its involvement in neurotransmission and neurological disorders has been suggested. There are methods for tracing these circuits, but they do not fill the dendritic tree. In this study, extracellular selenite injections in vivo were combined with intracellular ... More
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Authors:
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Authors:
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
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