Glutathione Reductase Fluorescent Activity Kit

El kit de la actividad de la glutatión reductasa (para uso exclusivo en investigación) es un ensayo que permite determinar la actividad fluorescente y está diseñado para la detección y cuantificación de la actividad de la glutatión reductasa en muestras de suero, plasma, eritrocitos y lisados celulares.

Este kit completo listo para usar incluye placas negras de 96 pocillos, estándar de glutatión reductasa (200 mU/ml), sustrato de glutatión reductasa y otros componentes para realizar el ensayo. Para utilizar este kit se necesita un lector de microplacas de 96 pocillos capaz de leer emisiones fluorescentes a 510 nm, con excitación a 390 nm.

Características de rendimiento
• Tipo de ensayo: kit de actividad fluorescente
• Tipos de muestra: suero, plasma, eritrocitos y lisados celulares
• Sensibilidad: 0,009 mU/ml
• Intervalo de curva estándar: 0,15 mU/ml–5 mU/ml
• Reactividad: especie humana

Contexto
La glutatión reductasa (GR) desempeña un papel indirecto pero fundamental en la prevención del daño oxidativo dentro de la célula, ya que ayuda a mantener los niveles adecuados de glutatión intracelular (GSH). El GSH, junto con la enzima glutatión peroxidasa (GP), es el agente reductor responsable de minimizar los niveles celulares de peróxido de hidrógeno nocivo. La glutatión reductasa (GR) cataliza la regeneración del glutatión (GSH). La GR es una flavoproteína dimerica ubicua de 100 a 120 kDa que cataliza la reducción de glutatión oxidado (GSSG) a glutatión reducido, empleando beta-nicotinamida dinucleótido fosfato (NADPH) como donante de hidrógeno.

Las moléculas como el NADPH actúan como donantes de hidruro en una variedad de procesos enzimáticos. Se ha sugerido que el NADPH también actúa como antioxidante de funcionamiento indirecto, dado su papel en la rerreducción de GSSG a GSH, lo que permite conservar el poder antioxidante del glutatión. Este ensayo está validado para usarse en suero humano, EDTA y plasma con heparina, y eritrocitos aislados. La mayoría de los lisados celulares también son compatibles. La actividad de la GR varía entre los tejidos y las especies; sin embargo, este kit permite medir la actividad de la GR en fuentes de especies distintas a la humana.

Principio del ensayo
El kit de actividad de la glutatión reductasa está diseñado para medir cuantitativamente la actividad de la glutatión reductasa (GR) en una variedad de muestras. Se proporciona un estándar de GR para generar una curva estándar para el ensayo; todas las muestras deben leerse en la curva estándar. El kit utiliza un reactivo de detección no fluorescente patentado, que se fija mediante un enlace covalente al grupo de tiol libre del GSH generado en la reducción de glutatión oxidado (GSSG), lo que genera un producto altamente fluorescente. Una vez que la muestra o el estándar se mezclan con el reactivo de detección y se incuba a temperatura ambiente, el producto fluorescente se lee a 510 nm en un lector de placas fluorescentes con excitación a 390 nm

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