Kit de mutagénesis dirigida en el sitio Phusion™ con células competentes DH10B

Este conjunto incluye un kit de mutagénesis dirigido por el sitio de la difusión y células competentes DH10B que están optimizadas para su uso con el kit.

Kit de mutagénesis dirigida por el sitio de la difusión
El kit de mutagénesis dirigida por el sitio de la difusión de la difusión de la difusión de la información es una herramienta versátil y eficaz para introducir mutaciones puntuales, inserciones o deleciones en cualquier tipo de ADN plasmídico. Con este kit, todo el plásmido se amplifica usando cebadores fosforilados que introducen los cambios deseados. El producto de PCR lineal amplificado, que contiene la mutación deseada, está circularizado en una reacción de unión de 5 minutos con ligasa de ADN T4. El plásmido resultante se puede transformar en las células de E.coli. Se recomienda el uso de células competentes DH10B con el kit.

La temperatura óptima de recocido para las polimerasas de ADN de la fusión puede diferir significativamente de la de las polimerasas basadas en Taq. Para obtener resultados óptimos comience por calcular con precisión su Tm con nuestra calculadora de TM.

• Método de amplificación exponencial robusto y fiable
• Sin requisitos, como vectores especiales, sitios de restricción o estado de metilación para el plásmido objetivo
• No hay necesidad de destruir la plantilla de inicio en un paso separado
• La polimerasa de ADN de alta fidelidad de fusión Hot Start II minimiza mutaciones secundarias no deseadas
• Amplificación de plasmidos grandes hasta 10 kb
• La modificación de arranque en caliente de la polimerasa previene la amplificación de productos no específicos y degradación no deseada de los cebadores antes del primer ciclo de PCR
• T4 DNA Ligase incluido en el kit; no hay pasos de purificación antes o después de la ligadura

Células competentes DH10B
Las células competentes Thermo Scientific DH10B son células de E.coli de alta eficiencia y competencia química. La cepa DH10B es adecuada para la clonación de ADN que contiene metilcitosina y metiladenina, lo que permite clonar de forma eficaz tanto el ADN genómico procariótico como el eucariótico. Estas células son ideales para la construcción de bibliotecas de ADNc utilizando vectores derivados del plásmido. Genotipo: F– mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ (ara-leu)7697 galU galK λ– rpsL(StrR) nupG.

• Alta eficacia de transformación: > 1 x 10⁹ cfu/µg de ADN pUC19
• Adecuado para aplicaciones rutinarias de clonación y mutagénesis de alto rendimiento
• Dos prácticas reacciones por envase de vial
• SOC. Medio de crecimiento incluido

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