Las ADN polimerasas de alta fidelidad Thermo Scientific Phusion establecen un nuevo referente para PCR de alto rendimiento. Con una tasa de errores 50 veces menor que la de Taq y 6 veces inferior a la de Pfu, las polimerasas de ADN de alta fidelidad Phusion son una opción excelente para la clonación y otras aplicaciones que requieren alta fidelidad. Las ADN polimerasas Phusion ofrecen un rendimiento sólido con tiempos de protocolo cortos, incluso en presencia de inhibidores de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Además, generan una mayor producción con menos cantidad de enzimas que otras ADN polimerasas.

Mediante el uso de ADN polimerasa de alta fidelidad Phusion Hot Start II, la amplificación prosigue sin la producción de productos inespecíficos debido a la combinación de ADN polimerasa Phusion y un ligando Affibody específico unido reversiblemente que inhibe la actividad de ADN polimerasa a temperatura ambiente.
El ligando Affibody también inhibe la actividad de exonucleasa 3´→5´ de la polimerasa, lo que evita la degradación de los cebadores y del ADN del molde durante la preparación de la reacción. A temperaturas que potencian la actividad de la polimerasa, se libera el ligando, lo que activa completamente la polimerasa. La ADN polimerasa Phusion Hot Start II se reactiva inmediatamente a altas temperaturas, por lo que no requiere un paso de activación independiente en los protocolos de PCR.

Aspectos destacados

• Configuración de la reacción a temperatura ambiente
• No hay amplificación no específica y degradación de cebadores durante la preparación de la reacción
• Reactivación en tiempo cero debido a la tecnología de inicio en caliente única
• Alta fidelidad (52X Taq)
• PCR rápida debido a tiempos de extensión cortos (15-30 s/kb)
• Reacciones sólidas, optimización mínima necesaria
• Gran producción con cantidades mínimas de enzimas
• Disponibles en un formato de tampón Green que permite la carga directa en geles (F-537S o F-537L)

Aplicaciones

• PCR de alta fidelidad
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• Amplificación de moldes difíciles (con gran contenido en GC)
• Generación de moldes para secuenciación
• PCR multiplex
• PCR de largo alcance
• Clonación
• Mutagénesis
• Micromatrices

Uso de ADN polimerasas Phusion
Las reglas de recocido para ADN polimerasas Phusion son diferentes a las de muchas ADN polimerasas comunes (como las ADN polimerasas Taq). Para obtener resultados óptimos, utilice nuestra calculadora de Tm en www.thermofisher.com/tmcalculator.