Template Generation System II Kit

La tecnología de transposón Thermo Scientific es la primera tecnología que permite a los científicos insertar fragmentos de ADN lineal construidos en un blanco de ADN circular o lineal de forma aleatoria y muy eficiente. El kit Sistema de generación de moldes Thermo Scientific II (kit TGS II) se basa en la reacción de transposición del bacteriófago Mu. Este sistema se ha simplificado para trabajar in vitro, y se ha construido un transposon Mu artificial, denominado Entranceposon. La reacción es catalizada por una sola enzima, la transposasa MuA.

El kit TGS II proporciona las herramientas para insertar el Entranceposon en ADN extraño en lugares aleatorios. La inserción de un Entranceposon en ADN objetivo desconocido proporciona sitios de unión de primer para diferentes aplicaciones. En un único tubo de reacción tiene lugar un reacción de transposición in vitro simple y rápida.

Características:

• Proporciona moldes para la secuenciación de ADN de forma más sencilla y con menos tiempo de manipulación que cualquier otro método
• Miles de moldes listos para secuenciar a partir de una única reacción de transposición: Suficiente para secuenciar incluso grandes clones de ADN (por ejemplo, clones de BAC) sin fragmentación o subclonación
• El mapeo simple de las inserciones de Entranceposon por PCR de colonias o digestión de enzimas de restricción permite la secuenciación dirigida. Se necesitan menos reacciones de secuenciación para completar una secuencia que la secuenciación shotgun
• Primers universales: El kit incluye primers de secuenciación y mapeo, no se requieres primers personalizados.
• Secuencia bidireccional: Se puede utilizar un solo clon de molde para secuenciar el ADN flanqueante en ambos lados de la inserción de Entranceposon
• Hay tres genes de resistencia antibiótica diferentes disponibles en cada kit TGS II
• Todos los componentes necesarios, así como el manual de instrucciones detallado para realizar las reacciones, vienen incluidos en el kit. TGS II Kit es una versión actualizada del TGS I Kit.

Aplicaciones
el kit Template Generation System II está diseñado para insertar un Mou transposon artificial en ADN objetivo desconocido para proporcionar sitios de unión de primer para:

• Secuenciación rápida de moldes sin cebador walking ni cebadores personalizados
• Secuenciación de grandes clones de ADN directamente sin la engorrosa fragmentación en una biblioteca
• Inserción de sitios de cebado de PCR en el ADN objetivo con una secuencia desconocida
• Mutagénesis de inserción aleatoria de ADN clonado; amplificación directa, mapeo o secuenciación utilizando cebadores en el sitio de inserción
• Secuenciación con transposones frente a secuenciación tradicional
• Aplicaciones especiales:
• Secuenciación de BAC
• Reacción de transposición en ADN objetivo lineal