TA Cloning™ Kit, with pCR™2.1 Vector and One Shot™ TOP10 Chemically Competent E. coli
TA Cloning&trade; Kit, with pCR&trade;2.1 Vector and One Shot&trade; TOP10 Chemically Competent <i>E. coli</i>
Invitrogen™

TA Cloning™ Kit, with pCR™2.1 Vector and One Shot™ TOP10 Chemically Competent E. coli

El kit TA Cloning™ con vector pCR™2.1 proporciona una estrategia de clonación rápida y de un paso para insertar directamenteMás información
Have Questions?
Cambiar vistabuttonViewtableView
Número de catálogoN.º de reaccionesVector
K20404040 reaccionespCR2.1
K20400120 reaccionespCRII
Número de catálogo K204040
Precio (USD)
-
N.º de reacciones:
40 reacciones
Vector:
pCR2.1
El kit TA Cloning™ con vector pCR™2.1 proporciona una estrategia de clonación rápida y de un paso para insertar directamente un producto de PCR amplificada con Taq en un vector plasmídico. El kit TA Cloning™ usa el vector de clonación pCR™2.1 y ligasa de ADN T4 ExpressLink™ para generar un producto de ligadura en un paso de ligadura de quince minutos a temperatura ambiente. Las reacciones suelen producir > 80 % de recombinantes que contienen insertos.

Características del kit TA Cloning™ con vector 2.1 pCR™:
Rápido y cómodo: ligación de 15 minutos a temperatura ambiente
Eficaz: detección azul/blanco y > 80 % de los clones con inserto adecuado
Flexible: elección de resistencia a kanamicina o ampicilina para la selección flexible de antibióticos
Sin complicaciones: elimina cualquier modificación enzimática del producto de PCR
Optimizado: no requiere el uso de primers de PCR que contengan sitios de restricción

El vector pCR™2.1 proporciona:
• Salientes 3'-T para la ligación directa de productos de PCR amplificados con Taq
• Promotor T7 para transcripción y secuenciación de ARN in vitro
• Un poliligador versátil con sitios EcoR I flanqueados para facilitar la escisión de insertos
• Sitios de primer directo e inverso M13 para secuenciación

Cómo funciona TA Cloning™
La polimerasa Taq tiene una actividad independiente de plantilla que añade una sola desoxiadenosina (A) a los extremos 3' de los productos PCR. El vector linealizado suministrado en este kit tiene residuos de una sola desoxiadenosina 3' (T). Esto permite a los insertos de PCR ligar eficazmente con el vector.

Configuraciones del kit
El kit TA Cloning™ se ofrece en una variedad de configuraciones: sin células competentes (K2020-20 y K2020-40), con E. coli competente químicamente One Shot™ INVF' (K2000-01 y K2000-40), con E. coli competente químicamente One Shot™ TOP10F' (K2030-01 y K2030-40) y con E. coli competente químicamente One Shot™ TOP10 (K2040-01 y K2040-40) en tamaños de kit de 20 y 40 reacciones.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

Especificaciones
Cepa bacteriana o de levaduraTOP10
Tipo de célulaE. coli químicamente competente
Método de clonaciónTA Cloning
Para utilizar con (aplicación)Clonación PCR
N.º de reacciones40 reacciones
Línea de productosOne Shot
Tipo de productoKit de clonación
PromotorT7
Cantidad40 reactions
VectorpCR2.1
FormatoKit
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Los kits TA Cloning™ contienen el vector pCR™2.1 linealizado, la ligasa de ADN T4 ExpressLink™, el tampón de ligación de ADN T4 5X ExpressLink™, dNTPs, el tampón de PCR 10X, agua esterilizada y controles. Los kits de células competentes contienen E. coli químicamente competente One Shot™, medio SOC y un plásmido de control superenrollado.

Almacene el E. coli de One Shot™ a - 80 °C. Almacene todos los demás componentes a - 20 °C. Se garantiza la estabilidad de todos los reactivos durante 6 meses si se almacenan correctamente.

Citations & References (5)

Citations & References
Abstract
Differential gene expression between developing queens and workers in the honey bee, Apis mellifera [see comments]
Authors:Evans JD, Wheeler DE
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:10318926
'Many insects show polyphenisms, or alternative morphologies, which are based on differential gene expression rather than genetic polymorphism. Queens and workers are alternative forms of the adult female honey bee and represent one of the best known examples of insect polyphenism. Hormonal regulation of caste determination in honey bees has ... More
An imprinted, mammalian bicistronic transcript encodes two independent proteins.
Authors:Gray TA, Saitoh S, Nicholls RD
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:10318933
Polycistronic transcripts are common in prokaryotes but rare in eukaryotes. Phylogenetic analysis of the SNRPN (SmN) mRNA in five eutherian mammals reveals a second highly conserved coding sequence, termed SNURF (SNRPN upstream reading frame). The vast majority of nucleotide substitutions in SNURF occur in the wobble codon position, providing strong ... More
PCR-mediated recombination: a general method applied to construct chimeric infectious molecular clones of plasma-derived HIV-1 RNA.
Authors:Fang G, Weiser B, Visosky A, Moran T, Burger H
Journal:Nature Medicine
PubMed ID:9930876
A PCR-based approach was developed that provides a powerful tool for engineering recombinant molecules without reliance on restriction sites. DNA sequences were first amplified by high-fidelity PCR using Pfu polymerase; they were then used both as 'megaprimers' and templates in subsequent asymmetric long PCR amplifications to form chimeric clones. To ... More
Sequence evolution and copy number of Ty1-copia retrotransposons in diverse plant genomes.
Authors: Navarro-Quezada Aura; Schoen Daniel J;
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:11752395
Sequence evolution of the reverse transcriptase (RT) gene in retrotransposons belonging to the Ty1-copia class was studied in 11 plant species. Phylogenetic reconstruction of the evolutionary history of RT sequences indicated a strong pattern of purifying selection, manifested as high ratios of third to first plus second codon position substitutions, ... More
Immunogene therapy of tumors with vaccine based on Xenopus homologous vascular endothelial growth factor as a model antigen.
Authors: Wei Y Q; Huang M J; Yang L; Zhao X; Tian L; Lu Y; Shu J M; Lu C J; Niu T; Kang B; Mao Y Q; Liu F; Wen Y J; Lei S; Luo F; Zhou L Q; Peng F; Jiang Y; Liu J Y; Zhou H; Wang Q R; He Q M; Xiao F; Lou Y Y; Xie X J; Li Q; Wu Y; Ding Z Y; Hu B; Hu M; Zhang W;
Journal:Proc Natl Acad Sci U S A
PubMed ID:11553767
Overcoming immune tolerance of the growth factors associated with tumor growth should be a useful approach to cancer therapy by active immunity. We used vascular endothelial growth factor (VEGF) as a model antigen to explore the feasibility of the immunogene tumor therapy with a vaccine based on a single xenogeneic ... More