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Invitrogen™

Sistema de expresión ViraPower™ II Lentiviral Gateway™

El sistema de expresión ViraPower™ II Lentiviral Gateway™ incluye todos los componentes necesarios para generar lentivirus, incluido el kit deMás información
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Número de catálogoCantidad
K367201 kit
Número de catálogo K36720
Precio (USD)
-
Cantidad:
1 kit
El sistema de expresión ViraPower™ II Lentiviral Gateway™ incluye todos los componentes necesarios para generar lentivirus, incluido el kit de vectores, la línea celular 293FT y el kit de soporte.Este kit combina las tecnologías lentiviral ViraPower™ II Lentiviral y Gateway™ de Invitrogen para facilitar la clonación a base de recombinación sencilla y la expresión de alto nivel a base de lentiviral de un gen objetivo en células de mamíferos divisorias y no divisorias.El vector pLenti6.2⁄V5-DEST™ del kit tiene el promotor del CMV para impulsar la expresión constitutiva del gen objetivo en células de mamíferos.El sistema lentiviral ViraPower™ II utiliza el promotor PGK en lugar del promotor SV40 en el vector lentiviral para dirigir la expresión persistente a largo plazo del marcador de selección estable de la blasticidina.

Ventajas
• Genera lentivirus incompetente para la replicación para la transducción de células de mamíferos que se dividen y no se dividen
• Fácil recombinación basada en la tecnología Gateway™
• Expresión estable, a largo plazo

Características principales
• Promotor CMV para la expresión constitutiva de alto nivel del gen objetivo
• Marcador de selección de blasticidina para seleccionar de forma estable y bajo control de un promotor de PGK y conseguir expresión constante a largo plazo

El kit incluye
• Kit de vectores pLenti6.2⁄V5-DEST™ Gateway™ (n.º ref. V36820)
• Kit de soporte Bsd lentiviral ViraPower™ (n.º ref. K497000)
• Línea de células 293FT (n.º ref. R70007)

Solo para uso en investigación.No está previsto para ningún uso terapéutico o de diagnóstico.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Sistema constitutivo o inducibleConstitutivo
Tipo de entregaLentivírico
Para utilizar con (aplicación)Expresión viral
Tipo de productoSistema de expresión lentiviral
Cantidad1 kit
Agente de selección (eucariótico)Blasticidina
VectorpLenti
Método de clonaciónGateway
Línea de productosGateway, ViraPower
PromotorCMV
Etiqueta de proteínaEtiqueta de epítopo V5
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Kit de vectores pLenti6.2⁄V5-DEST™ Gateway™
• 6 µg de vector pLenti6.2⁄V5-DEST™ (40 µl de vector a 150 ng⁄µl en tampón TE, pH 8,0)
• 10 µg de plásmido pLenti6.2⁄V5-GW⁄lacZ™ (20 µl de plásmido a 0,5 µg⁄µl en tampón TE, pH 8,0)
E. coli químicamente competente One Shot™ Stbl3™ (n.º de cat. C737303): 21 x 50 µl de células Stbl3™, 6 ml de medio S.O.C. y 50 µl de ADN de control pUC19 (10 pg⁄µl).

Kit de soporte ViraPower™ Bsd Lentiviral (n.º de cat. K497000)
• 195 µg de mezcla de envasado ViraPower™ (contiene 195 µl de una mezcla de plásmidos pLP1, pLP2 y pLP⁄VSVG a 1 µg⁄µl en tampón TE, pH 8,0)
• 0,75 ml de Lipofectamine™ 2000 (n.º de cat. 11668027)
• 50 mg de polvo de blasticidina (n-º de cat. R21001)
• Línea celular 293FT (n.º de cat R70007): 1 vial que contiene 3 X 106 células congeladas en 1 ml de medio de congelación.

Almacenamiento
• Vectores: -20 °C
• Mezcla de envasado ViraPower™: -20 °C
• Blasticidina: -20 °C
• Lipofectamine™ 2000: 4 °C (no congelar)
E. coli químicamente competente One Shot™ Stbl3™: -80 °C
• Células 293 FT: Nitrógeno líquido

Preguntas frecuentes

Can I perform the single-step protocol for the BP/LR Clonase reaction using BP Clonase enzyme and LR Clonase enzyme instead of BP Clonase II enzyme and LR Clonase II enzyme?

In the single-step protocol for the BP/LR Clonase reaction, we would not recommend substituting the BP Clonase II/LR Clonase II enzymes with BP Clonase /LR Clonase enzymes as this would result in very low recombination efficiency.

Do you have a recommended single-step protocol for BP/LR recombination?

Yes, we have come up with a single-step protocol for BP/LR Clonase reaction (http://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/cloning/gateway-cloning.html#1), where DNA fragments can be cloned into Destination vectors in a single step reaction, allowing you to save time and money.

How can I move my gene of interest from a Gateway-adapted expression clone to a new Destination vector as I have lost the entry clone?

We would recommend performing a BP reaction with a Donor vector in order to obtain an entry clone. This entry clone can then be used in an LR reaction with the Destination vector to obtain the new expression clone.

Can I purchase the 5X LR Clonase buffer or 5X BP Clonase buffer separately?

We do not offer the 5X LR Clonase buffer and 5X BP Clonase buffer as standalone products. They are available as part of the enzyme kits.

Do you offer Gateway vectors for expression in plants?

We do not offer any Gateway vectors for expression in plants.