Premo™ Halide Sensor
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Premo™ Halide Sensor

El sensor de haluro Premo™ está basado en una molécula de proteína fluorescente amarilla (YFP) sensible a los iones deMás información
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Número de catálogoCantidad
P1022920 ml
Número de catálogo P10229
Precio (USD)
-
Cantidad:
20 ml
El sensor de haluro Premo™ está basado en una molécula de proteína fluorescente amarilla (YFP) sensible a los iones de haluro. La combinación del biosensor de YFP (Venus) con la administración y expresión eficiente y no citopática de BacMam da a los investigadores una herramienta altamente sensible, robusta y fácil de usar para filtrar eficientemente los canales de iones haluros y los moduladores de transporte en sus modelos celulares de elección. No se necesitan instrumentos especializados, ya que el sensor funciona en plataformas HTS estándar. - Medición específica del canal del flujo CL de iones haluro en canales y transportadores de cloruro de voltaje y ligando - Medición rápida del flujo de cloruro en modo de alto rendimiento con resultados altamente reproducibles - Una expresión elevada potente y fiable del sensor de Venus, brillante y cuya maduración se produce rápidamente, proporciona una excelente ventana de señal - Práctico: estudie el flujo de cloruro en su modelo celular mediante la administración eficiente y no citopática del sensor de haluro Premo™ de la tecnología BacMam - Farmacológicamente relevante: los moduladores conocidos muestran un enfriamiento dependiente de la dosis y la administración de BacMam permite ensayos en células primarias El ensayo combina el sensor de haluro YFP Venus con un ion sustituto para cloruro (yoduro); al estimular el canal de cloruro o transportador, los iones de yoduro fluyen por el gradiente de concentración hacia las células y apagan la fluorescencia de YFP al unirse; la cantidad de enfriamiento es directamente proporcional al flujo de iones (canal de cloruro o actividad del transportador). Debido a la brillante fluorescencia de Venus, la ventana de señal del sensor de haluro Premo™ es excelente. Hemos demostrado la utilidad y eficiencia del sensor de haluro Premo™ como un ensayo sólido y verdadero de cloruro de HTS «sin lavado». El sensor de haluro Premo™ está preenvasado y listo para su uso inmediato. Contiene todos los componentes necesarios para la entrega y expresión celular. La detección se puede realizar en un medio completo y sin ningún paso de lavado. Para desacoplar el mantenimiento y la preparación de las células de la detección, simplemente congele las células transducidas y sáquelas 4 horas antes de la detección. Tanto las líneas celulares estables como las células primarias humanas pueden prepararse congeladas y “listas para el ensayo”.

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Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Tipo de entregaBaculovirus (sistema BacMam)
Método de detecciónFluorescente
Tipo de coloranteBasado en proteínas
FormularioLíquido
Cantidad20 ml
Condiciones de envíoHielo húmedo
ObjetivoCanales de iones
ColorAmarillo
EmissionVisible
Para utilizar con (aplicación)Viabilidad y proliferación celulares
Para utilizar con (equipo)Microscopio de fluorescencia
Línea de productosMolecular Probes, Premo
Tipo de productoSensor de haluro
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
El sensor de haluro Premo™ es un sensor farmacológicamente relevante para estudios funcionales de canales de cloruro de ligando y voltaje sincronizado. Se basa en una forma sensible a haluros de Venus, la molécula YFP más brillante disponible, lo que ofrece una excelente ventana de señal. Envasados en formato BacMam, la entrega es eficiente en una gama de tipos de células, incluidas células primarias humanas. Hemos demostrado la utilidad y eficiencia del sensor de haluro Premo™ como un ensayo sólido y verdadero de cloruro de HTS «sin lavado».
El sensor de haluro Premo™ debe almacenarse a 4 °C, protegerse de la luz y suministrarse con un potenciador (almacenar a 4 °C). Cuando se almacena como se indica, el producto es estable durante 6 meses.

Preguntas frecuentes

How can I increase the transduction efficiency with the BacMam 2.0 reagents such as the the CellLight and Premo products?

Try varying particle-to-cell ratio (PPC), incubation volume, temperature and, cell density (if adherent cells are transduced). For adherent cells, we recommend a confluence of about 70%. Following the PPC, adjusting the volume is the next best parameter to change to optimize protein expression. If that doesn't work, you can also use the BacMam Enhancer Kit (Cat. No. B10107).

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Citations & References (4)

Citations & References
Abstract
Green fluorescent protein-based halide indicators with improved chloride and iodide affinities.
Authors:Galietta LJ, Haggie PM, Verkman AS,
Journal:FEBS Lett
PubMed ID:11423120
'The green fluorescent protein YFP-H148Q is sensitive to halides by a mechanism involving halide binding and a shift in pK(a). However, a limitation of YFP-H148Q is its low halide sensitivity, with K(d)>100 mM for Cl(-). Indicators with improved sensitivities are needed for cell transport studies, particularly in drug discovery by ... More
Restoration of chloride efflux by azithromycin in airway epithelial cells of cystic fibrosis patients.
Authors:Saint-Criq V, Rebeyrol C, Ruffin M, Roque T, Guillot L, Jacquot J, Clement A, Tabary O,
Journal:Antimicrob Agents Chemother
PubMed ID:21220528
Azithromycin (AZM) has shown promising anti-inflammatory properties in chronic obstructive pulmonary diseases, and clinical studies have presented an improvement in the respiratory condition of cystic fibrosis (CF) patients. The aim of this study was to investigate, in human airway cells, the mechanism by which AZM has beneficial effects in CF. ... More
Small-molecule screen identifies inhibitors of a human intestinal calcium-activated chloride channel.
Authors:De La Fuente R, Namkung W, Mills A, Verkman AS,
Journal:Mol Pharmacol
PubMed ID:18083779
Calcium-activated chloride channels (CaCCs) are widely expressed in mammalian tissues, including intestinal epithelia, where they facilitate fluid secretion. Potent, selective CaCC inhibitors have not been available. We established a high-throughput screen for identification of inhibitors of a human intestinal CaCC based on inhibition of ATP/carbachol-stimulated iodide influx in HT-29 cells ... More
Cell-based imaging of sodium iodide symporter activity with the yellow fluorescent protein variant YFP-H148Q/I152L.
Authors:Rhoden KJ, Cianchetta S, Stivani V, Portulano C, Galietta LJ, Romeo G,
Journal:Am J Physiol Cell Physiol
PubMed ID:16987991
The sodium iodide symporter (NIS) mediates iodide (I(-)) transport in the thyroid gland and other tissues and is of increasing importance as a therapeutic target and nuclear imaging reporter. NIS activity in vitro is currently measured with radiotracers and electrophysiological techniques. We report on the development of a novel live ... More