Blasticidina S HCl, polvo

La blasticidina S es un antibiótico peptídico nucleósido aislado de Streptomyces griseochromogenes. Es un potente inhibidor de la síntesis de proteínas tanto en bacterias como en células eucariotas, pero también es activo contra hongos, nematodos, y células tumorales. La blasticidina S actúa bloqueando la hidrólisis de peptidil-ARNt inducida por factores de liberación e inhibe la formación de enlaces peptídicos. Se utiliza como agente de selección en células de mamíferos y bacterianas. La concentración de trabajo recomendada oscila entre 1 y 30 µg/ml en función de la línea de células y 25–100 µg/ml para selección bacteriana. La muerte celular se produce rápidamente, y las líneas de células de mamíferos estables y resistentes a la blasticidina se pueden generar en menos de una semana.

La resistencia a la blasticidina S se debe a BSR y BSD, aisladas de Bacillus cereus K55-S y Aspergillus terreus, respectivamente. El gen de resistencia a la BSR codifica la blasticidina S deaminasa, que cataliza la conversión de blasticidina S en deaminohidroxiblasticidina S. La deaminohidroxiblasticidina S es un derivado sin actividad biológica de la blasticidina S y no interactúa con los ribosomas procariotas o eucariotas ni los inhibe. El gen de resistencia a la BSD también codifica una blasticidina S deaminasa, que cataliza una reacción similar a la BSR deaminasa.

Con fines de selección de bacterias, el contenido de sal del medio LB debe mantenerse bajo (< 90 mM) y el pH no debe superar los 7,0 para conservar la actividad de la basticidina S. Se recomienda una curva de destrucción para determinar la concentración mínima efectiva de blasticidina S para eliminar células no resistentes.

Aplicaciones
Consultar protocolos detallados sobre la selección de blasticidina en células de mamíferos, E. coli y levadura.