Kits de apoptosis de células muertas con anexina V para citometría de flujo
Kits de apoptosis de células muertas con anexina V para citometría de flujo
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Kits de apoptosis de células muertas con anexina V para citometría de flujo

Evalúe la viabilidad celular con los kits de apoptosis de células muertas con anexina V y tintes fluorescentes conjugados como Alexa Fluor 488, FITC, PI, PE, APC y SYTOX Green.
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Número de catálogoCantidadEtiqueta o tinte
V351131 kitSYTOX Green, APC
V1324150 ensayosAlexa Fluor 488, yoduro de propidio
V132421 kitFITC, yoduro de propidio
V13245250 ensayosAlexa Fluor 488, yoduro de propidio
Número de catálogo V35113
Precio (USD)
1.108,08
1 kit
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Cantidad:
1 kit
Etiqueta o tinte:
SYTOX Green, APC
Precio (USD)
1.108,08
1 kit
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Diferencie fácilmente células vivas, muertas y apoptóticas durante la citometría de flujo con nuestros kits de apoptosis de células muertas con conjugados de anexina V que incluyen Alexa Fluor 488, FITC, yoduro de propidio, PE, APC y SYTOX Green. Estos conjugados distinguen células vivas, muertas o apoptóticas mediante diferentes tintes, lo cual es fundamental para confirmar la viabilidad celular y la apoptosis mediante estudios multiparamétricos.
Hay varias ventajas en el uso de kits de apoptosis de células muertas con anexina V para citometría de flujo con el fin de analizar la viabilidad celular:

Brillo superior
A diferencia de otros kits de anexina V que tienen concentraciones de proteínas o niveles de purificación más bajos, el conjugado de anexina V Alexa Fluor 488 está optimizado para la citometría de flujo para proporcionar la mayor separación posible entre células apoptóticas y vivas. El tinte Alexa Fluor 488 es un tinte verde fluorescente superior con un espectro similar al de la fluoresceína (FITC o isotiocianato de fluoresceína).

Alta eficacia de unión
Los conjugados de anexina V se obtienen a partir de cisteína-anexina altamente purificada, lo que da como resultado un aumento de la eficacia de unión y una caracterización muy precisa del proceso apoptótico.

Multiparamétrico
Muchas publicaciones requieren un mínimo de dos métodos diferentes para identificar células apoptóticas. Este kit multiparamétrico detecta fosfatidilserina (PS) sobre la superficie citoplasmática de la membrana celular, mientras que la integridad de la membrana se determina mediante yoduro de propidio.

Kit de apoptosis de células muertas con anexina V Alexa Fluor 488 y PI
El kit de apoptosis de células muertas con anexina V Alexa Fluor 488 y yoduro de propidio (PI) (V13241, V13245) se utiliza en citometría de flujo para medir la apoptosis temprana mediante la detección de la expresión de fosfatidilserina (PS) y la permeabilidad de la membrana. Cuando las células se tiñen con anexina V y yoduro de propidio, las células apoptóticas que expresan PS muestran fluorescencia verde, que se puede detectar en el canal del FITC, así como baja fluorescencia roja. Las células muertas o necróticas muestran fluorescencia de color rojo brillante y ninguna fluorescencia verde, mientras que las células vivas no muestran ninguna fluorescencia, ni verde ni roja.

Kit de apoptosis de células muertas con anexina V PE y SYTOX Green
El kit de apoptosis de células muertas con anexina V PE y SYTOX Green detecta la externalización de PS en células apoptóticas durante la citometría de flujo mediante la anexina V recombinante conjugada con la ficobiliproteína R-PE fluorescente naranja, mientras que las células muertas se detectan con la tinción de ácido nucleico SYTOX Green. Después del tratamiento con ambas sondas, las células apoptóticas muestran una fluorescencia naranja, las células muertas se muestran con una fluorescencia verde y las células vivas muestran poca o ninguna fluorescencia. Estas poblaciones pueden distinguirse fácilmente en los filtros de paso de banda de 530/30 nm y 585/42 nm con un citómetro de flujo láser de 488 nm.

Kit de apoptosis de células muertas con anexina V APC y SYTOX Green
El kit de apoptosis de células muertas con anexina V APC y SYTOX Green detecta la externalización de PS en células apoptóticas durante la citometría de flujo mediante la anexina V recombinante conjugada con aloficocianina excitada por láser rojo, y las células muertas mediante la tinción de ácido nucleico SYTOX Green. Las células apoptóticas se detectan mediante la unión de la anexina V al PS externalizado. Las células vivas muestran poca o ninguna fluorescencia, las células apoptóticas muestran fluorescencia roja y muy poca fluorescencia verde, y las células apoptóticas tardías muestran un nivel más alto de fluorescencia roja y naranja. Estas poblaciones pueden distinguirse fácilmente utilizando un citómetro de flujo con fuentes de excitación de 488 nm y 633 nm (un láser de iones de argón y uno HeNe).

Kit de apoptosis de células muertas con anexina V FITC y PI
El kit de apoptosis de células muertas con anexina V FITC y PI detecta la externalización de PS en células apoptóticas mediante la anexina V recombinante conjugada con colorante FITC verde fluorescente, y las células muertas mediante PI. Las células necróticas que se tiñen con PI muestran fluorescencia roja. Después del tratamiento con ambas sondas, las células apoptóticas muestran una fluorescencia verde, las células muertas se muestran con fluorescencia roja y verde, y las células vivas muestran poca o ninguna fluorescencia.

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
Especificaciones
DescripciónKit de apoptosis de células muertas con anexina V-APC y SYTOX Green para citometría de flujo
Excitación/emisión503, 650/524, 660
Líneas láser del citómetro de flujo633/635, 488
Para utilizar con (equipo)Microscopio de fluorescencia, citómetro de flujo
Contenido del kitContiene 1 vial de conjugado de anexina V, APC (250 µl), 1 vial de tinción SYTOX Green (100 µl) y 1 frasco de tampón de unión de anexina (solución 5X, 15 ml).
Etiqueta o tinteSYTOX Green, APC
N.º de reacciones50
Tipo de productoKit de detección de apoptosis
Cantidad1 kit
Condiciones de envíoHielo húmedo
Unit Size1 kit
Contenido y almacenamiento
Almacenar en el refrigerador (2 °C a 8 °C) y proteger de la luz.

Preguntas frecuentes

How do SYTO dyes bind to DNA?

The binding mode of SYTO nucleic acid stains is unknown. However, the behavior of these and related nucleic acid dyes suggests the following binding properties:

1.They appear to contact the solvent (suggested by sensitivity to salt, divalent cations, and in particular, SDS) and thus are likely to have contacts in the grooves.
2.All SYTO dyes appear to show some base selectivity and are thus likely to have minor groove contacts.
3.They can be removed from nucleic acid via ethanol precipitation; this characteristic is not shared by ethidium bromide and other intercalators. Likewise, the dyes are not removed from nucleic acid via butanol or chloroform extraction. These extraction methods do remove ethidium bromide from nucleic acid. 4. SYTO binding is not affected by nonionic detergents.
5. SYTO dyes are not quenched by BrdU, so they do not bind nucleic acids in precisely the same way as Hoechst 33342 and DAPI ((4′,6-diamidino-2-phenylindole).

SYBR Green I has shown little mutagenicity on frameshift indicator strains, indicating that it isn't likely to strongly intercalate.

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When using Dead Cell Apoptosis Kits with Annexin V for Flow Cytometry, what does a PI+ only population (hence Annexin V negative) correspond to?

These products are cells that died without undergoing apoptosis. A PI+ only population could be either a result of experimental condition or sample preparation.

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I trypsinized my adherent cells and labeled with annexin V, and now my flow data is showing a high percentage of apoptotic cells even for control, untreated cells. What is the problem?

Trypsinization or mechanical scraping of cells temporarily disrupts the plasma membrane, allowing annexin V to bind phosphatidylserine on the cytoplasmic surface of the cell membrane and thus leading to false positive staining. Allow the cells to recover for about 30 minutes in optimal cell culture conditions and medium after trypsinizing/scraping so that they can recover their membrane integrity before staining. For lightly adherent cell lines, such as HeLa and NIH 3T3, another option is to use non-enzyme treatments like Gibco Cell Dissociation Buffer (Cat. No. 13151014).

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Can I detect annexin V staining in an imaging assay?

Annexin V staining is not typically used in imaging experiments; it is a better reagent for flow cytometry analysis. All cells will stain to some extent, so it can be difficult to distinguish a relatively bright annexin V-stained cell from a dimmer non-apoptotic cell. Caspase activation, detected using our CellEvent Caspase 3/7 or Image-iT LIVE Caspase detection kits, is a better method for detecting apoptosis in an imaging assay.

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When should I stain adherent cells with annexin V for flow cytometric analysis? Before or after I trypsinize them?

Trypsinize first and then allow the cells to recover about 30 minutes in optimal cell culture conditions and medium before staining with annexin V conjugates. Trypsinization or mechanical scraping of cells temporarily disrupts the plasma membrane, allowing for annexin V to bind phosphatidylserine on the cytoplasmic surface of the cell membrane and thus leading to false positive staining. For lightly adherent cell lines such as HeLa and NIH 3T3, you could use a less harsh (non-enzymatic) dissociation product like Gibco Cell Dissociation Buffer (Cat. No. 13151014).

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Citations & References (4)

Citations & References
Abstract
Preclinical Evaluation of AMG 925, a FLT3/CDK4 Dual Kinase Inhibitor for Treating Acute Myeloid Leukemia.
Authors:Keegan K, Li C, Li Z, Ma J, Ragains M, Coberly S, Hollenback D, Eksterowicz J, Liang L, Weidner M, Huard J, Wang X, Alba G, Orf J, Lo MC, Zhao S, Ngo R, Chen A, Liu L, Carlson T, Quéva C, McGee LR, Medina J, Kamb A, Wickramasinghe D, Dai K,
Journal:
PubMed ID:24526162
'Acute myeloid leukemia (AML) remains a serious unmet medical need. Despite high remission rates with chemotherapy standard-of-care treatment, the disease eventually relapses in a major proportion of patients. Activating Fms-like tyrosine kinase 3 (FLT3) mutations are found in approximately 30% of patients with AML. Targeting FLT3 receptor tyrosine kinase has ... More
Temozolomide-mediated DNA methylation in human myeloid precursor cells: differential involvement of intrinsic and extrinsic apoptotic pathways.
Authors:Wang H, Cai S, Ernstberger A, Bailey BJ, Wang MZ, Cai W, Goebel WS, Czader MB, Crean C, Suvannasankha A, Shokolenkoc I, Wilson GL, Baluyut AR, Mayo LD, Pollok KE,
Journal:Clin Cancer Res
PubMed ID:23536437
'An understanding of how hematopoietic cells respond to therapy that causes myelosuppression will help develop approaches to prevent this potentially life-threatening toxicity. The goal of this study was to determine how human myeloid precursor cells respond to temozolomide (TMZ)-induced DNA damage. We developed an ex vivo primary human myeloid precursor ... More
Peiminine serves as an adriamycin chemosensitizer in gastric cancer by modulating the EGFR/FAK pathway.
Authors:Tang Q, Wang Y, Ma L, Ding M, Li T, Nie Y, Gu Z
Journal:Oncol Rep
PubMed ID:29328433
Gastric cancer (GC) is one of the most common malignancies of the digestive tract. Adriamycin (ADR) has been widely utilized in various chemotherapy regimens for treating GC, yet its long-term application may increase drug resistance resulting in treatment failure. Increasing evidence shows that bioactive natural products can be used as ... More
LncRNA HOTTIP Participates in Cisplatin Resistance of Tumor Cells by Regulating miR-137 Expression in Pancreatic Cancer.
Authors:Yin F, Zhang Q, Dong Z, Hu J, Ma Z
Journal:Onco Targets Ther
PubMed ID:32280243
This study aimed to investigate the effect of HOTTIP and miR-137 on cisplatin resistance of pancreatic cancer cells, and study the mechanism of the effect of HOTTIP on the resistance to cisplatin in pancreatic cancer cells, so as to provide new targets for clinical treatment of pancreatic cancer. ... More