O PureLink™ RNA Mini Kit é um kit baseado em coluna usado para isolar o RNA total de alta qualidade de uma ampla variedade de tipos de amostras em 20 minutos usando equipamentos de laboratório padrão. O kit inclui soluções de lavagem e lise livre de RNase que protegem o RNA de RNases enquanto liberam o RNA do DNA, proteínas e outros resíduos celulares. O fluxo de trabalho rápido da coluna giratória é ideal para processar tamanhos de lote de baixo a médio rendimento . O design avançado da coluna giratória PureLink RNA Mini permite uma entrada de quantidade máxima de amostra (200 mg de tecido) e recuperação de RNA (até 1000 µg). Isso significa que os usuários podem processar quantidades grandes e pequenas de amostras com o mesmo kit de isolamento de RNA.
• Processar quantidades de entradas de amostra de 5–200 mg de tecido animal/vegetal ou de 0,5 x 10
8 a 10
8 células de cultura de tecidos com uma coluna giratória em 20 minutos
• Isolar mais RNA do que as minicolunas giratórias concorrentes: até 1000 µg de RNA total com uma coluna
• Usar RNA isolado na maioria das aplicações sem a necessidade de tratamento de DNase (contaminação mínima de DNA residual muito baixa)
• Flexível–tratamento de DNase pós-isolamento ou na coluna é opcional e está disponível com o conjunto de
DNase PureLink para fácil remoção de DNA residual
Alta capacidade de ligação permite purificação rápida de RNA utilizando equipamentos de laboratório padrão O PureLink™ RNA Mini Kit oferece purificação rápida de RNA total a partir de uma ampla gama de células e tipos de tecidos para produzir até 1000 µg de RNA purificado a partir de uma única extração (consulte a Figura 1). O RNA total de alta qualidade pode ser obtido a partir de quantidades pequenas e grandes de material inicial com apenas vestígios de contaminação residual de DNA genômico. A alta capacidade de ligação permite que um kit atenda à maioria das necessidades de isolamento de RNA em um protocolo rápido de 20 minutos sem a necessidade de instrumentos especiais de processamento de amostras.
Tratamento de DNase na coluna, fácil e opcional para aplicações sensíveisAs colunas do PureLink RNA Mini Kit são altamente eficientes para isolar o RNA total de alta qualidade enquanto removem a maioria do DNA genômico. Em geral, a maioria das aplicações que requerem RNA de linhagens celulares de mamíferos ou tecido animal não requer tratamento de DNase adicional. No entanto, algumas aplicações, como a análise de expressão gênica por qRT-PCR sem primers intron-spanning ou trabalho com amostras de organismos com íntrons muito pequenos ou ausentes, podem exigir a remoção mais completa do DNA contaminante residual. O Conjunto de
DNase PureLink permite uma digestão conveniente de DNA na coluna durante o protocolo de isolamento de RNA. O tratamento com DNase “na coluna” é mais fácil e permite maior recuperação do RNA do que o tratamento com DNase após o isolamento do RNA. O Conjunto de DNase PureLink também pode ser usado para remover o DNA residual do RNA que foi previamente purificado. Os fluxos de trabalho de purificação “na coluna” e pós-RNA são opções disponíveis com o Conjunto de DNase PureLink.
Purificação de RNA simplificada e não tóxicaO PureLink RNA Mini Kit utiliza tampão de lise com guanidina-isotiocianato não tóxica para proteger o RNA durante as etapas de isolamento. Reagentes especiais livres de RNase combinados com membranas de sílica certificadas livre de RNase em uma configuração de coluna exclusiva permitem um procedimento seguro e fácil que pode ser tipicamente concluído em menos de 20 minutos sem a necessidade de extração perigosa com fenol/clorofórmio, centrifugação com CsCl ou precipitação com LiCl ou álcool.
O PureLink RNA Mini Kit é recomendado para uso com o Homogeneizador (Cat. Nº 12183026) projetado para homogeneizar lisados de célula ou tecidos por meio de centrifugação, antes da purificação de ácido nucleico. O Homogeneizador é especialmente eficaz para purificar partículas de tecidos vegetais.
Para tecidos vegetais ricos em polifenóis ou amido (por exemplo, agulhas de pinheiro, tubérculos de batata), recomendamos o uso do reagente PureLink Plant RNA (Cat. Nº 12322012) junto com o PureLink RNA Mini Kit.