O DMEM/F-12 avançado (Dulbecco's Modified Eagle Medium/Ham's F-12) é um meio basal amplamente usado que permite a cultura de células de mamíferos com suplementação reduzida de soro bovino fetal (FBS). Em comparação com o DMEM/F-12 clássico, a suplementação de soro pode ser reduzida em 50–90% sem alteração na taxa de crescimento ou morfologia. As células cultivadas com sucesso em DMEM/F-12 avançado, sem adaptação, incluem MRC-5, SP2, Vero, WI-38 e Jurkat.
Esse DMEM/F-12 é fabricado da seguinte forma:Com | Sem |
• Glicose | • L-glutamina |
• Aminoácidos não essenciais | • HEPES |
• Piruvato de sódio | |
A formulação
completa está disponível.
Utilizando DMEM/F-12 avançadoO DMEM/F-12 avançado é exclusivo de outros meios devido à adição dos seguintes ingredientes para permitir a redução de soro: etanolamina, glutationa, ácido ascórbico, insulina, transferrina, albumina do soro bovino rica em lipídios AlbuMAX™ II para cultura celular e os elementos traço selenito de sódio, metavanadato de amônio, sulfato cúprico e cloreto manganoso. O DMEM/F-12 avançado requer suplementação com 1–5%
de soro bovino fetal e 4 mM de L-glutamina ou suplemento de
GlutaMAX™. Muitas linhagens celulares não requerem adaptação a esse meio. A concentração de FBS deve ser otimizada para cada linhagem celular para obter a redução máxima de soro. O DMEM/F-12 avançado usa um sistema de tampão de bicarbonato de sódio (3,7 g/L) e, portanto, requer um ambiente com 5–10% de CO
2 para manter o pH fisiológico.
Sistema de qualidade e fabricação cGMPPara continuidade da cadeia de suprimentos, fabricamos o DMEM/F-12 avançado em duas instalações separadas localizadas em Grand Island, NY e Escócia, Reino Unido. Ambas as unidades estão em conformidade com os requisitos de fabricação cGMP, são certificadas de acordo com a ISO 13485 e estão registradas na FDA como fabricantes de dispositivos médicos.