Células competentes ElectroMAX™ DH5α-E

Las células competentes ElectroMAX DH5α-E derivan de la cepa DH5α y son adecuadas para la transformación por electroporación. Se puedenMás información

Número de catálogo	Cantidad
11319019	5 x 100 μl

Número de catálogo 11319019

Precio (CLP)

436.418

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Cantidad:

5 x 100 μl

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Las células competentes ElectroMAX DH5α-E derivan de la cepa DH5α y son adecuadas para la transformación por electroporación. Se pueden utilizar en procedimientos que requieren una gran eficacia de transformación, como la generación de bibliotecas de ADNc o la transformación con ADN de entrada limitado. Las células ElectroMAX DH5α-E ofrecen:

• Eficacia de > 1 x 10¹⁰transformantes/µg con electroporación
• Gran aumento de la producción y la calidad plasmídicas gracias a la mutación endA1
• Transformación de gran eficacia con plásmidos de 30 kb de tamaño
• Detección azul/blanca de clones recombinantes gracias a lacZΔM15
• Estabilidad de inserción garantizada debido a la mutación recA1

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.

Especificaciones

Resistencia bacteriana a los antibióticosNo

Tramado azul/blancoSí

Clonación de ADN metiladoNo

Clonación de ADN inestableNo es adecuado para clonar ADN inestable

Contiene el episoma F'Carece de episoma F'

Compatibilidad de alto rendimientoNo compatible con alto rendimiento (manual)

Mejora la calidad de los plásmidosSí

PlásmidoSe puede utilizar para plasmidos > 20 kb

Preparación de ADN no metiladoNo es adecuado para preparar ADN no metilado

Línea de productosDH5a, ElectroMAX

Tipo de productoCélula competente

Cantidad5 x 100 μl

Reduce la recombinaciónSí

Condiciones de envíoHielo seco

Resistente al fago T1 (tonA)No

Nivel de eficiencia de transformaciónAlta eficacia (> 10^9 ufg⁄µ g)

FormatoTubo

EspecieE. coli

Unit SizeEach

Contenido y almacenamiento

Contiene:
• Células competentes ElectroMAX DH5α-E: 5 viales, 100 µl cada uno
• pUC19 DNA (10 pg/µl): 1 vial, 50 µl
• Medio S.O.C.: 2 frascos, 6 ml cada uno

Almacenar las células competentes a -80 °C. Almacene pUC19 DNA a -20 °C. Almacenar el medio S.O.C. a 4 °C o a temperatura ambiente.

Preguntas frecuentes

How do you recommend that I prepare my DNA for successful electroporation of E. coli?

For best results, DNA used in electroporation must have a very low ionic strength and a high resistance. A high-salt DNA sample may be purified by either ethanol precipitation or dialysis.

The following suggested protocols are for ligation reactions of 20ul. The volumes may be adjusted to suit the amount being prepared.

Purifying DNA by Precipitation: Add 5 to 10 ug of tRNA to a 20ul ligation reaction. Adjust the solution to 2.5 M in ammonium acetate using a 7.5 M ammonium acetate stock solution. Mix well. Add two volumes of 100 % ethanol. Centrifuge at 12,000 x g for 15 min at 4C. Remove the supernatant with a micropipet. Wash the pellet with 60ul of 70% ethanol. Centrifuge at 12,000 x g for 15 min at room temperature. Remove the supernatant with a micropipet. Air dry the pellet. Resuspend the DNA in 0.5X TE buffer [5 mM Tris-HCl, 0.5 mM EDTA (pH 7.5)] to a concentration of 10 ng/ul of DNA. Use 1 ul per transformation of 20 ul of cell suspension.

Purifying DNA by Microdialysis: Float a Millipore filter, type VS 0.025 um, on a pool of 0.5X TE buffer (or 10% glycerol) in a small plastic container. Place 20ul of the DNA solution as a drop on top of the filter. Incubate at room temperature for several hours. Withdraw the DNA drop from the filter and place it in a polypropylene microcentrifuge tube. Use 1ul of this DNA for each electrotransformation reaction.

When should DMSO, formamide, glycerol and other cosolvents be used in PCR?

Cosolvents may be used when there is a failure of amplification, either because the template contains stable hairpin-loops or the region of amplification is GC-rich. Keep in mind that all of these cosolvents have the effect of lowering enzyme activity, which will decrease amplification yield. For more information see P Landre et al (1995). The use of co-solvents to enhance amplification by the polymerase chain reaction. In: PCR Strategies, edited by MA Innis, DH Gelfand, JJ Sninsky. Academic Press, San Diego, CA, pp. 3-16.

Additionally, when amplifying very long PCR fragments (greater than 5 kb) the use of cosolvents is often recommended to help compensate for the increased melting temperature of these fragments.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our PCR and cDNA Synthesis Support Center.