Kit de síntesis de cDNA SuperScript™ IV CellsDirect™
Kit de síntesis de cDNA SuperScript™ IV CellsDirect™
Invitrogen™

Kit de síntesis de cDNA SuperScript™ IV CellsDirect™

Green features
El kit de síntesis de ADNc CellsDirect SuperScript IV está optimizado para la síntesis de ADNc de primera cadena directamenteMás información
Have Questions?
Cambiar vistabuttonViewtableView
Número de catálogoN.º de reacciones
1175015050 reacciones
11750350500 reacciones
Número de catálogo 11750150
Precio (CLP)
786.139
Each
Añadir al carro de la compra
N.º de reacciones:
50 reacciones
Pedido a granel o personalizado
Precio (CLP)
786.139
Each
Añadir al carro de la compra
El kit de síntesis de ADNc CellsDirect SuperScript IV está optimizado para la síntesis de ADNc de primera cadena directamente desde un lisado celular de mamíferos sin primero aislar ARN. La lisis celular y la transcripción inversa se realizan en el mismo tubo, y la primera cadena de ADNc resultante está listo para su uso en PCR y qPCR.

Las características del kit SuperScript IV incluyen:
• Compatible con un amplio intervalo de tipos de células de mamíferos cultivados en diferentes condiciones de tratamiento
• El formato de un solo tubo minimiza la pérdida de reactivos, la pérdida de muestras y el tiempo de manipulación
• El volumen total de lisado se puede utilizar en la reacción de síntesis de la primera cadena ADNc, proporcionar mayor rendimiento con un número limitado de células y permitir la detección de transcripciones raras
• ADNc de alta calidad generada para su uso en una variedad de aplicaciones, incluyendo PCR y qPCR
• El protocolo sencillo tarda alrededor de 37 minutos
• Compatible con mezclas maestras TaqMan y SYBR verde qPCR de varios fabricantes
• Rendimiento optimizado para 1–10.000 células por muestra, resultados equivalentes a los de ARN purificado

El kit de síntesis de ADNc SuperScript IV CellsDirect incluye transcriptasa inversa SuperScript IV. Algunas de las características de esta enzima son:
• Actividad de la ARNasa H reducida
• Mayor estabilidad térmica
• Altas tasas de rendimiento del ADNc en la reacción de síntesis de primera cadena, para una mayor sensibilidad y detección mejorada de transcripciones raras
• Tolerancia superior a varios inhibidores de la RT

La transcriptasa inversa SuperScript IV es una opción superior para todas las aplicaciones de RT-PCR y qRT-PCR Mutación de MMLV exclusiva con una resistencia y fiabilidad superiores en las reacciones de RT. Respecto a SuperScript III, ha mejorado ostensiblemente en resistencia al inhibidor, capacidad de procesamiento y velocidad de reacción, al tiempo que retiene todas las ventajas de la enzima anterior, incluido el aumento de la termoestabilidad, la síntesis de ADNc de longitud completa altamente eficaz y la reducción de la actividad de ARNasa.

Cómo funciona
En la RT-PCR tradicional, el ARN se aísla primero de las células en un procedimiento que requiere mucho tiempo y puede llevar a una pérdida de material. Con el kit de síntesis de ADNc CellsDirect SuperScript IV, las células se lisan y el ADNc se genera a partir del lisado en un único tubo con un manejo mínimo y sin pérdida de muestras. El tratamiento con DNasa I es un paso opcional y puede usarse para eliminar el ADN genómico antes de la síntesis de primera cadena. Este kit se ha optimizado para muestras de células pequeñas, que van desde las 10.000 células hasta una sola célula.

Especificaciones
Tipo de producto finalPrimera cadena de ADNc
FormatoKit
Características ecológicasMenos peligroso, menos residuos
N.º de reacciones50 reacciones
Temperatura óptima de reacción50 °C
Cantidad50 reacciones
Formato de reacciónComponentes premezclados
Tipo de reactivoTranscripción reversa
Transcriptasa inversaSuperScript IV
Actividad de la ribonucleasa HReducido
Condiciones de envíoHielo seco
Material de partidaCélulas
TécnicaTranscripción reversa
Para utilizar con (aplicación)RT-PCR, PCR en tiempo real (PCRq)
GC-Rich PCR PerformanceAlto
Velocidad de reacción10 min
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
• Solución de lisis directa CellsDirect SuperScript IV (2 x 1,25 ml)
• Solución de parada directa CellsDirect SuperScript IV (1 x 250 µl)
• Potenciador de lisis (1 x 25 µl)
• ADNasa I (1 x 55 µl)
• Mezcla maestra RT SuperScript IV (1 x 400 µl)
• Mezcla maestra control sin RT SuperScript IV (1 x 400 µl)

Almacenar a –20 °C.

Preguntas frecuentes

What are the RT primers included in the SuperScript IV CellsDirect cDNA Synthesis Kit (Cat. No. 11750150, 11750350)?

The RT master mix contains both random and oligo dT primers.

What primers come in the SuperScript IV CellsDirect cDNA Synthesis Kit (Cat. No. 11750150)? Is it Oligo(dT) primers or random hexamers?

It is both. The RT master mix includes both, random hexamers and Oligo(dT) primers.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our PCR and cDNA Synthesis Support Center.

In your SuperScript IV RT protocols, there is no ezDNase inactivation step. Will ezDNase be active to affect RNA or the RT reaction?

The Invitrogen ezDNase Enzyme is a novel DNase that is highly specific for double-stranded DNA. It has no activity on single-stranded DNA in RT reactions (primers or probes), or on RNA. The enzyme is also thermolabile—it is inactivated quickly at temperatures typical for the SuperScript IV RT reaction (e.g., 50 degrees C). The additional inactivation step is therefore not required for most RT-qPCR applications. If the RNA sample is to be used for RT-PCR of fragments ≥3 kb, incubate the sample for 5 minutes at 55 degrees C in the presence of 10 mM DTT to inactivate the enzyme.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our PCR and cDNA Synthesis Support Center.

Which SuperScript IV RT format do you recommend for real-time PCR applications?

For RT-qPCR applications we recommend using the Invitrogen SuperScript IV VILO Master Mix (Cat. No. 11756050). The cDNA synthesis reaction setup with this master mix requires fewer pipetting steps and therefore reduces variation in the data. SuperScript IV RT, as a component of the master mix, offers the highest efficiency of cDNA synthesis step compared to competitors’ products.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our PCR and cDNA Synthesis Support Center.

Are there any significant changes in the SuperScript IV RT protocol compared to the SuperScript III RT protocol?

The only difference is that the incubation time for the reverse transcription reaction has been reduced to 10 minutes and inactivation time has been reduced to 5 minutes at 85 degrees C.