SuperScript™ VILO™ Master Mix
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SuperScript™ VILO™ Master Mix

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La mezcla maestra SuperScript VILO es una mezcla maestra de síntesis de la primera cadena de ADNc para aplicaciones RT-qPCR de dos pasos. La mezcla maestra combina la transcriptasa inversa SuperScript III (RT) y otros componentes de reacción RT en un formato de tubo único para permitir una síntesis fiable de primera cadena y un alto rendimiento de ADNc a partir de una amplia gama de concentraciones de ARN de entrada. La alta eficacia de RT de la RT SuperScript III y la formulación optimizada permiten que la mezcla maestra proporcione una alta linealidad en la síntesis de ADNc a través de una amplia gama de plantillas de ARN de entrada para ensayos cuantitativos de RT-PCR (qRT-PCR) en dos pasos.

Nota: Para un rendimiento superior de la síntesis de ADNc en aplicaciones de RT-qPCR, recomendamos mezcla maestra SuperScript IV VILO o mezcla maestra SuperScript IV VILO con enzima DNAasa ez. La mezcla maestra IV VILO eleva la fiable tecnología VILO al siguiente nivel con la transcriptasa inversa altamente procesiva y termoestable SuperScript IV y un tampón aún más optimizado. La mezcla maestra permite una síntesis eficaz del ADNc a temperaturas más altas en menos tiempo y proporciona un rendimiento y sensibilidad superiores del ADNc incluso con una pureza subóptima o plantillas escasas.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Tipo de producto finalPrimera cadena de ADNc
FormatoMezcla maestra
N.º de reacciones50 reacciones
Temperatura óptima de reacción42 °C
Cantidad50 reacciones
Formato de reacciónMaster Mix
Tipo de reactivoTranscripción reversa
Transcriptasa inversaSuperScript III
Actividad de la ribonucleasa HReducido
Condiciones de envíoHielo seco
Tamaño (producto final)10 kb o menos
Material de partidaARN
TécnicaTranscripción reversa
Concentración5X
Método de detecciónSonda de cebado
Para utilizar con (aplicación)Real Time PCR (qPCR)
GC-Rich PCR PerformanceAlto
Velocidad de reacción60 min
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
• La mezcla maestra SuperScript VILO contiene RT SuperScript III, inhibidor de la ribonucleasa recombinante RNaseOUT, proteína auxiliar exclusiva, cebadores aleatorios, dNTPs, MgCl2

Almacénese en el congelador (entre -5 y -30 °C).

Preguntas frecuentes

What can I do to improve the sensitivity of my qPCR assay?

If you are targeting a low-abundance gene, you may have trouble getting Ct values in a good, reliable range (Ct > 32). To increase the sensitivity of the assay, you may want to consider the following:

- Increase the amount of RNA input into your reverse transcription reaction, if possible
- Increase the amount of cDNA in your qPCR reaction (20% by volume max)
- Try a different reverse transcription kit, such as our SuperScript VILO Master Mix, for the highest cDNA yield possible
- Consider trying a one-step or Cells-to-CT type workflow (depending on your sample type)

What is the difference between SuperScript III RT and the RT in the SuperScript VILO kit?

The SuperScript VILO cDNA Synthesis Kit contains a mix of SuperScript III RT and helper proteins which help to increase the efficiency of the reverse transcription reaction and thus improve yield. The RT in the SuperScript

The SuperScript VILO cDNA Synthesis Kit (Cat. No. 11754050) contains a mix of SuperScript III RT and helper proteins which help to increase the efficiency of the reverse transcription reaction and thus improve yield. The RT in the SuperScript VILO kit is active at 42 degrees C due to the helper proteins.

How much of the first-strand cDNA reaction should I load for PCR?

While the volume is dependent on the starting amount of RNA used for the first-strand synthesis and the abundance of the target gene, we'd recommend starting with 10% of the first-strand reaction for your PCR reaction.

Citations & References (1)

Citations & References
Abstract
Hypothalamic distribution of somatostatin mRNA expressing neurones relative to pubertal and adult changes in pulsatile growth hormone secretion in mice.
Authors:Tan HY, Huang L, Simmons D, Veldhuis JD, Steyn FJ, Chen C
Journal:
PubMed ID:23855876
'The age-associated decline in growth hormone (GH) secretion may be a consequence of the reduction in the number of GH-releasing hormone (GHRH) positive neurones. However, it remains unclear whether an alteration in the number or distribution of somatostatin (SST) neurones contributes to this change. In the present study, we characterised ... More