Agarosa estreptavidina Pierce™

La agarosa estreptavidina Thermo Scientific Pierce es una resina de agarosa granulada y capacidad estándar procedente de una proteína recombinante inmovilizada que se puede emplear en diversos métodos de purificación por afinidad a la biotina.

Características de la agarosa estreptavidina:

• Estreptavidina: proteína de estreptavidina recombinante purificada (53 kDa, pI casi neutro); tetramérico con cuatro sitios de unión de biotina por molécula.
•Resina de agarosa: el soporte agarosa granulada entrecruzada al 6 % (CL-6B), la resina más popular para los métodos de purificación por afinidad de proteínas.
• Inerte y estable: la estreptavidina se inmoviliza mediante uniones covalentes, sin cargas y resistentes a la lixiviación, lo que produce una unión inespecífica y permite múltiples usos sin disminuir el rendimiento.
• Capacidad estándar: esta variedad de gránulos tiene una carga normal de estreptavidina inmovilizada, lo que ofrece una capacidad de unión de 1 a 3 mg de BSA biotinilada por ml de resina.

Propiedades de la agarosa granulada entrecruzada al 6 % (CL-6B):
• Estabilidad pH del soporte: de 2 a 14 (corto plazo); de 3 a 13 (largo plazo)
• Tamaño medio de partícula: de 45 a 165 micrómetros
• Límite de exclusión: de 10 000 a 4 000 000 de daltons
• Caudal volumétrico máximo: aprox. 1 ml/minuto (en una columna de 1 cm de diámetro)
• Velocidad lineal máxima: 30 cm por hora
• Presión máxima: menos de 25 psi (1,5 bar)

Aplicaciones:
• Purificación de antígenos de membrana junto con anticuerpos monoclonales biotinilados
• Aislamiento de proteínas de la superficie celular que se han etiquetado con un reactivo biotinilización divisible
• Aislamiento de glicoproteínas de la superficie celular mediante concanavalina A biotinilada
• Recuperación de ADN monocatenario biotinilado para una secuenciación didesoxi
• Placas con revestimiento de estreptavidina utilizadas para la secuenciación directa de la fase sólida
• Mutagénesis in vitro con placas revestidas de estreptavidina
• Obtención de huellas de ADN con placas con revestimiento de estreptavidina

La estreptavidina agarosa Pierce consta de estreptavidina recombinante purificada que se ha inmovilizado covalentemente en agarosa granulada entrecruzada al 6 % de alta calidad. La estreptavidina es una proteína tetramérica de unión de biotina. Los gránulos de agarosa tienen propiedades fisicoquímicas que permiten su uso en distintos procedimientos de afinidad en columnas o en lotes. Los anticuerpos biotinilados, las proteínas, los péptidos, los ácidos nucleicos y otras moléculas o complejos de interacción se pueden capturar, inmunoprecipitar, eliminar o purificar a partir de muestras utilizando esta resina de estreptavidina.

La estreptavidina es una proteína tetramérica que contiene cuatro sitios de unión de biotina, de forma similar a la avidina. La proteína nativa de Streptomyces avidinii no posee carbohidratos, tiene un pI acídico de 5,5 y una masa de 75 kDa. La proteína recombinante empleada para la fabricación de resinas de estreptavidina Thermo Scientific Pierce tiene un punto isoeléctrico casi neutro y una masa de 53 kDa. La estreptavidina suele tener menos fuerza de unión inespecífica que la avidina (clara de huevo) debido a la ausencia de carbohidratos.

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