El tampón de «stripping» (lavado) de inmunotransferencia (Western blot) Thermo Scientific Restore elimina de forma segura y eficaz los anticuerpos primarios y secundarios de las membranas de fluoruro de polivinilideno (PVDF) y nitrocelulosa que permiten una nueva detección de las inmunotransferencias (Western blot) quimioluminiscentes.

Características del tampón de lavado de inmunotransferencia (Western blot) Restore:

• Ahorra tiempo: sin necesidad de volver a procesar geles y blots
• Ahorra muestras costosas: vuelva a detectar la membrana con la misma muestra
• Efectivo: la formulación es más eficaz en anticuerpos de lavado que en tampones caseros
• Respetuoso: no daña el antígeno objetivo durante el lavado, lo que permite una nueva detección eficaz
• Inodoro: la ausencia de mercaptanos permite que no se produzcan olores acres
• Económico: más barato que otros tampones de lavado del mercado

Detalles del producto
La realización de la electroforesis en gel y los ensayos de inmunoblotting duplicados para probar los nuevos anticuerpos primarios o las concentraciones de anticuerpos resulta prolongada y cara. El tampón de lavado de inmunotransferencia (Western blot) Restore elimina esta pérdida de tiempo y dinero al detectar los inmunoblots con sustratos de inmunotransferencia (Western blotting) quimioluminiscente. El tampón de lavado Restore proporciona una extracción rápida y eficaz de anticuerpos primarios y secundarios de inmunoblots sin eliminar ni dañar el antígeno inmovilizado que permite lavar y volver a detectar las inmunotransferencias con confianza.

La detección mediante inmunotransferencia (Western blotting) quimioluminiscente con reactivos como los sustratos Thermo Scientific SuperSignal para peroxidasa de rábano picante es uno de los métodos más comunes y sensibles. Dado que estos sustratos no se precipitan ni se unen a las superficies de las membranas, las inmunotransferencias (Western blot) detectadas con quimioluminiscencia se pueden lavar con reactivos que eliminan los anticuerpos primarios y secundarios unidos por afinidad. Para que el tampón de lavado sea eficaz debe ser lo suficientemente potente para desasociar anticuerpos unidos y lo suficientemente suave para dejar intactas las proteínas diana de la membrana de PVDF o nitrocelulosa. El tampón de lavado de inmunotransferencia (Western blot) Restore tiene las siguientes características.

Mediante el lavado y la nueva detección, no es necesario desperdiciar muestras raras o costosas mediante el procesamiento de varios geles para detectar distintas dianas. Es posible lavar una sola membrana de un gel con el tampón de lavado de inmunotransferencia (Western blot) Restore para eliminar los anticuerpos primarios. El lavado de la inmunotransferencia solo tarda entre 15 y 30 minutos, en función de la afinidad del anticuerpo primario. Después del lavado, bloquee y vuelva a detectar con un nuevo anticuerpo primario. Como alternativa, una inmunotransferencia se puede lavar y volver a detectar con concentraciones de anticuerpos ajustadas para optimizar las condiciones después de obtener unos malos resultados iniciales.

Aplicaciones
• Reutilice un blot de nitrocelulosa o PVDF para detectar un objetivo diferente con un anticuerpo primario diferente
• Vuelva a detectar un blot para corregir u optimizar las concentraciones de anticuerpos que no fueron efectivas la primera vez

Resumen del protocolo
• Lave la inmunotransferencia para eliminar el sustrato quimioluminiscente.
• Incube el blot en el tampón de lavado de inmunotransferencia (Western Blot) Restore de 5 a 15 minutos a 37 °C (la temperatura ambiente es suficiente para algunos anticuerpos)
• Retire la inmunotransferencia y lávela en un tampón de lavado (TBS-T o PBS-T).
• Compruebe si la extracción de anticuerpos es suficiente.
• Realice el siguiente experimento de inmunoblotting.