Pierce™ His Protein Interaction Pull-Down Kit
Pierce™ His Protein Interaction Pull-Down Kit
Thermo Scientific™

Pierce™ His Protein Interaction Pull-Down Kit

El kit «pull-down» de interacción de proteínas con etiqueta His Thermo Fisher Scientific Pierce contiene los componentes necesarios para capturarMás información
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Número de catálogoCantidad
212771 kit
Número de catálogo 21277
Precio (CLP)
544.555
Each
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Cantidad:
1 kit
Precio (CLP)
544.555
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El kit «pull-down» de interacción de proteínas con etiqueta His Thermo Fisher Scientific Pierce contiene los componentes necesarios para capturar y purificar proteínas que interactúan con las proteínas de fusión con etiqueta His.

Características del kit «pull-down» de interacción de proteínas con etiqueta His:

Método «pull-down» 6xHis (n.° de referencia 21277): purifica los interactores de proteínas de cualquier proteína de fusión con etiqueta His.
Kit completo: proporciona todos los componentes y el protocolo detallado para la purificación de interacciones entre proteínas.
No se necesita un equipo especial: puede emplear reactivos y equipos de laboratorio corrientes (por ejemplo, microcentrífuga).
Práctico: las columnas de centrifugación de microcentrífuga facilitan la manipulación sencilla y eficaz de los gránulos de agarosa, incluido un procesamiento sencillo de múltiples muestras.
Flexible: las instrucciones incluyen protocolos para el uso con proteínas de cebo y presa expresadas a partir de una amplia variedad de tipos de muestras.
Menos uniones no específicas: la resina de quelato de cobalto es más específica para las proteínas de fusión con etiqueta de histidina que las resinas de níquel, lo que da como resultado menos uniones no específicas.
Unión: une de 10 a 25 mg de proteína de fusión marcada con histidina por ml de resina.

Aplicaciones:

• Detectar nuevas interacciones proteína-proteína a partir de un lisado celular
• Confirmar posibles interacciones a partir de un lisado celular o con una proteína purificada previamente
• Extraer información de las interacciones proteína-proteína a partir de lisados de transcripción/transducción in vitro

El usuario suministra la proteína de fusión etiquetada como el «cebo» y las células que expresan el objetivo de interacción de proteína putativa («presa»), y los kits de «pull-down» proporcionan todo lo demás: el tampón de lisis celular, las columnas de centrifugación de microcentrífuga, la resina de afinidad específica de etiquetas (gránulos de agarosa) y los tampones y protocolos optimizados. Los kits de «pull-down» se han diseñado como un método de aprendizaje para los usuarios noveles y para aumentar la facilidad y comodidad de uso en el caso de los investigadores expertos.

Productos relacionados
Kit de «pull-down» de interacciones de proteínas GST Pierce™
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
ensayoPurificación por afinidad
Para utilizar con (aplicación)Extracción (basada en etiquetas)
Para utilizar con (equipo)Microcentrífuga
FormatoKit
Cantidad1 kit
Suficiente para25 reacciones
ObjetivoSin especificidad
Línea de productosPierce
TipoKit de extracción
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Suficiente para: Al menos 25 reacciones de «pull-down», cada una con 25 µl de resina
• Resina de agarosa de quelato de cobalto, 750 µl
• Tampón de lisis de «pull-down» de 250 ml
• Solución de imidazol (4M), 5 ml
• Paquete de TBS (produce 500 ml), 1 paquete
• Columnas de centrifugación Pierce y accesorios, 27 columnas
• Tubos de recogida de microcentrífuga, 100 tubos

Tras recibirlo, almacene el tampón de lisis Pierce a temperatura ambiente. Guarde los componentes restantes del kit a 4 °C.

Preguntas frecuentes

If my protein is endogenously expressed, which Thermo Scientific Protein:Protein Interaction (PPI) kit should I choose?

We recommend the biotin kit for endogenously expressed proteins. The reason for this is the wide variety of biotinylation reagents that can be used to label the detection protein of the binding pair. For help choosing a biotinylation reagent, refer to the Biotinylation Selection Guide available at our website.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Protein Assays and Analysis Support Center.

How is the tagged protein detected on the membrane using the Thermo Scientific Protein:Protein Interaction (PPI) kits?

The biotin kit utilizes streptavidin-HRP to detect the biotinylated protein bound to the prey protein on the membrane. The GST kit utilizes a polyclonal goat anti-GST antibody for detection of the glutathione-S-transferase tagged fusion protein bound to another protein on a membrane.

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How many reactions can be performed using one Thermo Scientific Protein:Protein Interaction (PPI) kit?

The Thermo Scientific Pull-Down Protein:Protein Interaction Kits contain a complete, validated set of reagents specifically developed for performing pull-down assays.The kits contain sufficient materials for conducting 25 pull-down assays.

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Are all of the conditions for binding the prey protein to the bait protein described in the Thermo Scientific Protein:Protein Interaction (PPI) kits?

No. Every protein pair will require unique conditions in order to bind with one another. Factors to consider are pH, ionic strength of the buffer, need for cofactors, whether the interaction is long term or transient, etc. The researcher is recommended to perform a literature search or try several different conditions in order to determine what conditions are best for the binding of their proteins of interest. The kit includes a “universal“ wash buffer formed by diluting the lysis buffer 1:1 in TBS.

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With the Thermo Scientific Protein:Protein Interaction (PPI) kits, what methods can be used to detect the prey protein?

The prey protein can be detected following transfer on a membrane. The membrane procedures uses 1:100,000 - 1:500,000 dilution of the anti-GST antibody.

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