EZ-Link™ Hydrazide-PEG4-Biotin

La hidracida-PEG4-biotina Thermo Scientific EZ-Link (también llamada biotina-PEG4-hidracida) es un reactivo de biotinilación reactivo en aldehído que contiene un brazo separador de cuatro unidades de polietilenglicol (PEG) para aumentar la hidrofilicidad.

Características de la hidracida-PEG4-biotina EZ-Link:

• Etiquetado de glicoproteína: proteínas glicosiladas biotiniladas en residuos de ácido siálico para la detección o purificación utilizando sondas o resinas de estreptavidina
• Etiquetado de superficie celular: biotinilar y aislar las glicoproteínas de la superficie celular; el reactivo no permea las membranas de células completas
• Reactivo al aldehído: reacciona con aldehídos formados por la oxidación de periodato de grupos de azúcar
• Activado por hidracida: realice reacciones a pH de 4 a 6 en tampones, como el acetato de sodio
• Pegilado: el brazo espaciador contiene un grupo de polietilenglicol (PEG) hidrófilo de cuatro unidades
• Mejora la solubilidad: la pegilación aporta hidrosolubilidad a la molécula biotinilada, lo que ayuda a evitar la agregación de anticuerpos biotinilados que se almacenan en solución
• Irreversible: forma enlaces semipermanentes de hidrazona; el brazo separador no se puede escindir
• Solubilidad: normalmente disuelta en DMSO para hacer la solución madre concentrada
• Alcance largo: el brazo espaciador (longitud total añadida al objetivo) es de 31,3 angstroms

La biotina-PEG4-hidracida permite la biotinilación de glicoproteínas y otras moléculas que contienen aldehídos o grupos de azúcar oxidable. El grupo de hidracida reacciona espontáneamente con grupos de aldehídos o cetonas para formar un enlace estable de hidrazona. Los grupos de aldehídos se pueden crear por la oxidación suave del periodato de cis-diols en ácido siálico y otros azúcares en los carbohidratos. El agente separador hidrofílico de cuatro unidades de polietilenglicol (PEG) imparte solubilidad en agua que se transfiere a la molécula biotinilada, reduciendo así la agregación de proteínas etiquetadas almacenadas en la solución. El segmento PEG también añade longitud y flexibilidad al brazo espaciador, minimizando el impedimento estérico que implica la unión a las moléculas de avidina.

Fabricamos reactivos de biotina para garantizar la máxima integridad, consistencia y rendimiento global posible del producto para las aplicaciones de investigación previstas.

Los reactivos de biotinilación difieren en reactividad, longitud, solubilidad, permeabilidad celular y capacidad de ruptura. Las hidracidas y las alcoxiaminas son dos tipos de grupos reactivos al carbonil. Las hidracidas (—NH-NH2) reaccionan específicamente con grupos de aldehídos en condiciones ligeramente ácidas para formar enlaces de hidrazona; estos pueden reducirse aún más a enlaces de aminas secundarias estables mediante cianoborohidruro de sodio (n.° de referencia 44892). La reacción es más eficaz en presencia de anilina (n.° de referencia 88944). Alternativamente, las hidracidas pueden conjugarse a ácidos carboxílicos gracias a la química carbodiimida de EDC.

Los grupos de aldehídos reactivos se pueden generar en glicoproteínas y otros compuestos de polisacáridos por oxidación de los dioles de azúcar constitutivos con periodiato de sodio (n.° de referencia 20504). Los residuos de ácido siálico son componentes comunes de la glicosilación de proteínas y se convierten fácilmente a aldehídos con 1 mM de NaIO4.