El kit Thermo Scientific EZ-Link de biotinilación sulfo-NHS contiene reactivos suficientes para 10 reacciones de biotinilación (es decir, para 1–10 mg de anticuerpos por reacción). El reactivo EZ-Link sulfo-NHS-biotina incluido en el kit es un reactivo de biotinilación soluble en agua de cadena corta utilizado para etiquetar anticuerpos, proteínas y otras moléculas que tienen aminas primarias.
Características del reactivo EZ-Link sulfo-NHS-biotina:
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Etiquetado de proteína: biotinile anticuerpos para facilitar la inmovilización, purificación o detección mediante sondas o resinas de estreptavidina.
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Etiquetado de la superficie celular: biotinila solo las proteínas superficiales de células completas, ya que el reactivo cargado negativamente no penetra en las membranas celulares.
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Aminorreactivo: el producto reacciona con las aminas primarias (-NH2), como las cadenas laterales de lisina o el extremo aminoterminal de los polipéptidos.
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Soluble: el grupo sulfo-NHS cargado aumenta la solubilidad en agua del reactivo en comparación con los compuestos de éster de N-hidroxisucinimida (NHS) corrientes.
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Irreversible: forma enlaces amida permanentes; el brazo espaciador no se puede escindir.
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Muy corto: el brazo espaciador (longitud total añadida al elemento diana) es de 13,5 angstroms; se compone de un grupo de ácido valérico de la biotina natural
El reactivo sulfo-NHS-biotina es el más corto de tres reactivos EZ-Link muy similares que son solubles en agua y no divisibles y que permiten una biotinilización de anticuerpos, proteínas y cualquier otra macromolécula que contenga aminas primarias en solución. El etiquetado específico de las proteínas de la superficie celular es otro uso habitual de estos reactivos exclusivos solubles en agua que no penetran las membranas. Los tres reactivos de éster de sulfo-NHS, que solo se diferencian en la longitud del brazo espaciador, permiten optimizar los experimentos de etiquetado y detección en los que el impedimento estérico de la unión de biotina es un factor importante. El reactivo sulfo-NHS-biotina está disponible en envases de varios tamaños y como kits completos de etiquetado de proteínas.
Fabricamos reactivos de biotina para garantizar la máxima integridad, coherencia y rendimiento global posible del producto en las aplicaciones de investigación previstas.
Los ésteres de N-hidroxisulfosuccinimida (NHS) de biotina son el reactivo de biotinilación que más se utiliza. Las biotinas activadas por NHS reaccionan eficazmente con los grupos amino primarios (-NH2) en tampones alcalinos para formar enlaces de amidas estables. Las proteínas (como los anticuerpos) suelen tener varias aminas primarias que están disponibles como elementos diana del etiquetado, incluidas las cadenas laterales de los residuos de lisina (K) y el extremo N de cada polipéptido.
Distintos tipos de biotina Los reactivos de éster de NHS se diferencian en cuanto a su longitud, solubilidad, permeabilidad celular y capacidad para escindirse. Las biotinas de NHS no sulfonadas penetran en las células, pero deben disolverse en disolventes orgánicos, como DMSO o DMF. Las biotinas de sulfo-NHS (y aquellas con separadores pegilados) son solubles en agua directamente, pero no traspasan las membranas. Las variedades que contienen enlaces de disulfuro se pueden escindir mediante agentes reductores, lo que permite desconectar el grupo de biotina de la proteína etiquetada.
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