El kit Thermo Scientific EZ-Link de biotinilación de sulfo-NHS-LC contiene reactivos suficientes para 10 reacciones de biotinilación (es decir, para 1–10 mg de anticuerpo por reacción). El reactivo EZ-Link sulfo-NHS-LC-biotina incluido en el kit es un reactivo de biotinilación soluble en agua de longitud intermedia para el etiquetado de anticuerpos, proteínas y otras moléculas que tienen aminas primarias.
Características del reactivo EZ-Link sulfo-NHS-LC-biotina:
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Etiquetado de proteínas: biotinile anticuerpos para facilitar la inmovilización, purificación o detección mediante sondas o resinas de estreptavidina.
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Etiquetado de la superficie celular: biotinila solo las proteínas superficiales de células completas, ya que el reactivo cargado negativamente no penetra en las membranas celulares.
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Aminorreactivo: reacciona con aminas primarias (-NH2), como las cadenas laterales de lisina o el extremo amino de polipéptidos.
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Soluble: el grupo sulfo-NHS cargado aumenta la solubilidad en agua del reactivo en comparación con los compuestos de éster de N-hidroxisucinimida (NHS) corrientes.
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Irreversible: forma enlaces de amida permanentes; el brazo espaciador no se puede escindir.
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Longitud media: la longitud del brazo espaciador es de 22,4 angstroms (longitud total añadida al elemento diana); proporciona un equilibrio excelente entre una longitud adecuada (impedimento estérico mínimo para la unión de biotinas) y una masa discreta.
El reactivo sulfo-NHS-biotina es el más corto de tres reactivos EZ-Link muy similares que son solubles en agua y no divisibles, y que permiten una biotinilización de anticuerpos, proteínas y cualquier otra macromolécula que contenga aminas primarias en solución. El etiquetado específico de proteínas de la superficie celular es otra aplicación común de estos reactivos exclusivos solubles en agua que no permean las membranas. Con la única diferencia de la longitud de su brazo del separador, los tres reactivos de éster de Sulfo-NHS ofrecen la posibilidad de optimizar experimentos de etiquetado y detección donde la repulsión estérica de la unión de biotina es un factor importante. El reactivo sulfo-NHS-biotina está disponible en envases de varios tamaños y como kits completos de etiquetado de proteínas.
Fabricamos reactivos de biotina para garantizar la máxima integridad, coherencia y rendimiento global posible del producto en las aplicaciones de investigación previstas.
Los ésteres de N-hidroxisulfosuccinimida (NHS) de biotina son el reactivo de biotinilación que más se utiliza. Las biotinas activadas por NHS reaccionan eficazmente con grupos amino primarios (-NH2) en tampones alcalinos para formar enlaces amida estables. Las proteínas (como los anticuerpos) suelen tener varias aminas primarias que están disponibles como objetivos de etiquetado, incluyendo la cadena lateral de residuos de lisina (K) y el extremo N de cada polipéptido.
Las
variedades de reactivos de éster de NHS de biotina difieren en longitud, solubilidad, permeabilidad celular y capacidad de escisión. Las biotinas de NHS no sulfonadas permean las células, pero deben disolverse en disolvente orgánico, como DMSO o DMF. Las biotinas de sulfo-NHS (y aquellas con separadores pegilados) son solubles en agua directamente, pero no permean las membranas. Las variedades que contienen enlaces de disulfuro se pueden escindir mediante agentes reductores, lo que permite desconectar el grupo de biotina de la proteína etiquetada.
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