EZ-Link™ NHS-SS-PEG4-Biotin

El reactivo Thermo Scientific EZ-Link NHS-SS-PEG4-biotina incluye grupos de disulfuro y polietilenglicol (PEG) en su brazo espaciador para proporcionar una biotinilación escindible que mejora la solubilidad.

Características del reactivo EZ-Link NHS-SS-PEG4-biotina:

• Etiquetado de proteínas: biotinile anticuerpos u otras proteínas para la detección o purificación mediante resinas o sondas de estreptavidina.
• Aminorreactivo: reacciona con aminas primarias (-NH2), como la cadena lateral de los lisinos (K) o los extremos de aminas de los polipéptidos.
• Escindible: el enlace de disulfuro del brazo espaciador permite eliminar la etiqueta de biotina mediante el uso de agentes reductores como la DTT; solo un pequeño grupo sulfhidrilo permanece conectado a la molécula.
• Pegilado: el brazo espaciador contiene un grupo de polietilenglicol (PEG) hidrófilo, de cuatro unidades.
• Mejora la solubilidad: la pegilación proporciona solubilidad en agua a la molécula biotinilada, lo que ayuda a evitar la acumulación de anticuerpos biotinilados almacenados en la solución.
• Largo alcance: la longitud del brazo espaciador es de 37,9 angstroms (longitud total añadida al elemento diana); esto reduce el impedimento estérico al unirse a las moléculas de avidina.

El reactivo NHS-SS-PEG4-biotina permite un etiquetado de biotina simple y eficaz de anticuerpos, proteínas y otras macromoléculas primarias que contienen aminas. El grupo de éster N-hidroxisuccinimida (éster de NHS) reacciona de forma específica y eficaz con las lisinas (K) de proteínas y péptidos, así como con los grupos aminos con extremo N a pH 7-9 para formar enlaces de amida estables. El brazo espaciador de polietilenglicol hidrófilo (PEG) proporciona solubilidad en agua que se transfiere a la molécula biotinilada, lo que reduce la acumulación de proteínas etiquetadas almacenadas en la solución. El enlace de disulfuro integral permite que el grupo de biotina se escinda de la molécula marcada mediante DTT u otros agentes reductores, lo que permite una recuperación eficaz de los complejos proteínicos enlazados a la avidina en ensayos basados en afinidad.

Fabricamos reactivos de biotina para garantizar la máxima integridad, coherencia y rendimiento global posible del producto para las aplicaciones de investigación previstas.

Los ésteres N-hidroxisulfosuccinimida (NHS) de biotina son el reactivo de biotinilación que más se utiliza. Las biotinas activadas por NHS reaccionan eficazmente con grupos amino primarios (-NH2) en tampones alcalinos para formar enlaces amida estables. Las proteínas (como los anticuerpos) suelen tener varias aminas primarias que están disponibles como objetivos de etiquetado, incluyendo la cadena lateral de residuos de lisina (K) y el extremo N de cada polipéptido.

Las variedades de reactivos de éster de NHS de biotina difieren en longitud, solubilidad, permeabilidad celular y capacidad de escisión. Las biotinas de NHS no sulfonadas permean las células, pero deben disolverse en disolvente orgánico, como DMSO o DMF. Las biotinas de sulfo-NHS (y aquellas con separadores pegilados) son solubles en agua directamente, pero no permean las membranas. Las variedades que contienen enlaces disulfuro se pueden escindir mediante agentes reductores, lo que permite desconectar el grupo de biotina de la proteína etiquetada.