EZ-Link™ NHS-PEG Solid-Phase Biotinylation Kit - Mini-Spin Columns

Los kits de biotinilación en fase sólida NHS-PEG Thermo Scientific EZ-Link proporcionan un enfoque en columna de la biotinilación de anticuerpos dirigidos a aminas que proporciona un mayor control sobre la reacción de etiquetado y el proceso de limpieza.

Características del kit de biotinilación en fase sólida NHS-PEG EZ-Link:

• Compatible con reacciones a pequeña escala: anticuerpo de 1 a 10 mg.
• Etiquetado y purificación rápidos: el procedimiento completo solo requiere aproximadamente una hora.
• Fácil eliminación de los restos y el exceso de reactivo de etiquetado: basta con lavar los subproductos de la reacción, no es necesario realizar diálisis o filtración en gel.
• Sin efectos de dilución: el método de fase sólida permite recuperar los anticuerpos inicialmente diluidos en un volumen menor después del etiquetado.
• Protocolos optimizados: los protocolos específicos para los anticuerpos garantizan un nivel adecuado de etiquetado (de 2 a 5 biotinas por molécula de anticuerpo), lo que minimiza la posibilidad de inactivación causada por el sobreetiquetado.
• Reactivo de biotina de alto rendimiento: la biotina NHS-PEG4 utiliza química del éster de NHS específico de la amina eficaz e incluye un espaciador de polietilenglicol hidrofílico (PEG) que estabiliza la solubilidad a largo plazo de los anticuerpos etiquetados.
• Ocho experimentos de etiquetado de biotina por kit: el envasado Thermo Scientific No-Weigh garantiza que el reactivo de biotina esté completamente activo para ocho experimentos independientes.

Este innovador sistema de etiquetado de anticuerpos utiliza agarosa quelada de níquel para inmovilizar temporalmente las moléculas de anticuerpos a través de sus regiones Fc ricas en histidina. Una vez sujeto sobre la resina, el anticuerpo puede ser biotinilado en aminas primarias con el reactivo biotina NHS-PEG4 de alta calidad, estabilizante de la solubilidad. El exceso de reactivo de etiquetado y subproductos se eliminan antes de recuperar el anticuerpo etiquetado y purificado de la resina utilizando una solución de imidazol suave. No se necesita filtración de gel ni diálisis.

Los kits de biotinilación en fase sólida EZ-Link utilizan una estrategia innovadora para la biotinilación de anticuerpos que simplifica el proceso en muchos aspectos, haciendo posible que tanto el principiante como el experto obtengan una biotinilación exitosa. La estrategia consiste en inmovilizar el anticuerpo en un soporte de afinidad con quelado metálico y realizar la biotinilación en la fase sólida.

Los anticuerpos se unen fácilmente a los soportes con quelado metálico, como el níquel o el cobalto, uniéndose principalmente a través de la región FC rica en histidina de los anticuerpos de clase IgG. Esta característica permite que la química de derivatización se realice fácilmente mientras el anticuerpo está unido al soporte. Esta estrategia facilita la administración de reactivos y la eliminación de reactivos gastados. El anticuerpo modificado resultante se elimina de forma selectiva del soporte mediante elución con una solución tamponada de imidazol.

El enfoque en fase sólida de la biotinilación de anticuerpos proporciona un mayor control sobre la reacción. Por ejemplo: La proporción de reactivos y anticuerpos y los tiempos de reacción pueden ajustarse para lograr el grado adecuado de biotinilación para la aplicación prevista.

Los kits contienen un reactivo soluble acuoso específico del grupo amino (biotina NHS-PEG4) que se dirige a los grupos amino accesibles (-NH2) en la superficie del anticuerpo. El formato se puede aplicar al nivel de anticuerpo multimiligramo en el kit de columna de 1 ml (n.º de referencia 21440) o a niveles bajos de anticuerpos de microgramo para biotinilaciones mediante el kit de minicolumna de centrifugación (n.º de referencia 21450).

Productos relacionados
Kit EZ-Link™de biotinilación en fase sólida NHS-PEG (columna de 1 ml)