El kit de etiqueta HA para IP/Co-IP Thermo Scientific Pierce proporciona la resina de afinidad, control positivo y los reactivos necesarios para llevar a cabo reacciones de inmunoprecipitación (IP) o co-inmunoprecipitación (co-IP) utilizando una proteína cebo marcada con HA.

Características del kit de marcador HA para IP/Co-IP:

• Mejorado: el kit actualizado incluye más resina de anticuerpo inmovilizada y un protocolo mejorado junto con la proteína de fusión GST-PI3K-SH2-HA como control positivo
• Específico: el anticuerpo monoclonal altamente específico anti-HA proporciona productos de inmunoprecipitación de alta producción y la detección mediante Western blot
• Compatible: incluye protocolos y reactivos para múltiples condiciones de elución para acomodar diferentes sensibilidades proteicas y aplicaciones posteriores
• Robusto: el kit y el anti-HA agarosa son compatibles con varios lisados celulares y sistemas de tampón fisiológicos (no desnaturalizantes)
• Cómodo y fácil: el kit completo incluye todos los reactivos necesarios, columnas de centrifugación prácticas e instrucciones fáciles de seguir

Este kit está basado en agarosa granulada entrecruzada a la que se ha inmovilizado covalentemente un anticuerpo anti-HA altamente específico. La resina de afinidad lista para su uso, junto con los tampones incluidos, las columnas de centrifugación para microcentrífugas, el control positivo y las instrucciones fáciles de seguir, constituyen un conjunto completo de reactivos suficientes para 25 ensayos de IP o co-IP. Tras la incubación con una muestra que contiene la proteína de fusión marcada, se capturan en los gránulos de agarosa los complejos de interacción en los que interviene la proteína cebo marcada con HA. Después de varios pasos de lavado sencillos, el complejo de interacción de la proteína específica se eluye fácilmente desde la resina al tampón de elución suministrado o al tampón de carga de la muestra SDS-PAGE para su análisis posterior.

El péptido hemaglutinina (HA) (YPYDVPDYA), derivado de la proteína HA del virus de la gripe humana, es una de las diversas etiquetas de proteínas de fusión que se utilizan en la expresión de proteínas recombinantes. Utilizando un anticuerpo específico inmovilizado de alta afinidad, las proteínas de fusión marcadas con HA se pueden purificar rápidamente a partir de lisados de células bacterianas y de mamíferos, así como de las reacciones de traducción in vitro de Pierce Human. Para las reacciones de coinmunoprecipitación, los sencillos pasos de lavado permiten el enriquecimiento y elución de complejos de interacción de proteínas específicos en el tampón de elución suministrado o tampón de carga de muestras SDS-PAGE para análisis posteriores.

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