Kit TaqMan™ RNA-to-CTde un paso
Kit TaqMan&trade; RNA-to-C<sub>T</sub>&trade; <i>de un paso</i>
Applied Biosystems™

Kit TaqMan™ RNA-to-CTde un paso

El kit de 1 paso TaqMan RNA-to-CT de Applied Biosystems proporciona una cuantificación de ARN coherente para una amplia variedadMás información
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Número de catálogoN.º de reacciones
4392938200 reacciones
439265340 reacciones
43926562000 reacciones
Número de catálogo 4392938
Precio (CLP)
1.100.487
Each
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N.º de reacciones:
200 reacciones
Precio (CLP)
1.100.487
Each
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El kit de 1 paso TaqMan RNA-to-CT de Applied Biosystems proporciona una cuantificación de ARN coherente para una amplia variedad de ensayos y está validado con la completa biblioteca de Applied Biosystems TaqMan de ensayos de expresión génica.El kit se recomienda para una variedad de aplicaciones, incluidos estudios generales de expresión génica, descubrimiento de biomarcadores y validación de micromatrices.

Las características del kit de 1 paso TaqMan RNA-to-CT incluyen:
•Precisión en un amplio rango dinámico para un rendimiento fiable
• Validado con ensayos de expresión génica TaqMan para una configuración experimental sencilla
• Rendimiento constante con una amplia variedad de objetivos, incluidas secuencias largas y ricas en GC y GC
• El formato de 1 paso implica menos pasos de pipeteo, lo que genera menos posibilidades de errores

Eficacia en una amplia gama de concentraciones de entrada
La máxima flexibilidad en la cantidad de entrada de plantilla de ARN requiere una eficacia de PCR en tiempo real óptima en una amplia gama de cantidades de plantilla.La Figura 1 muestra la excelente eficacia de amplificación en seis órdenes de magnitud.El resultado es comparable al del kit de 2 pasos TaqMan RNA-to-CT y supone una importante mejora en el intervalo dinámico y la sensibilidad con respecto a los reactivos de mezcla maestra RT-PCR de un paso TaqMan.

Alta sensibilidad con baja concentración de objetivo
La sensibilidad del kit de 1 paso TaqMan RNA-to-CT se validó con una plantilla de ARN sintético del que se conoce el número exacto de copias.Se produce un error de muestreo importante al medir cantidades bajas de objetivo, por lo que se requiere realizar un análisis estadístico con varias réplicas para una correcta evaluación.La figura 2 muestra la cantidad prevista de objetivo y los valores CT medios correspondientes.El análisis estadístico indica una alta fiabilidad de la cuantificación de la muestra basada en un T-test (Tabla I), de conformidad con tan solo 10 copias de objetivo*.

*Los resultados dependen de diversos factores, incluido el diseño del ensayo.

Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Para utilizar con (equipo)Sistema 7000, sistema 7300, sistema 7500, sistema 7700, sistema 7900HT, sistema de PCR en tiempo real StepOnePlus™ de Applied Biosystems, StepOne™, Standard Mode, StepOnePlus™, modo estándar
N.º de reacciones200 reacciones
Colorante de referencia pasivaROX (premezclado)
PolimerasaADN polimerasa AmpliTaq Gold
Línea de productosRNA-to-CT, TaqMan
Tipo de productoKit de un solo paso de RT-PCR
Grado de pureza o calidadUP (ultrapura)
Cantidad200 reactions
Transcriptasa inversaArrayScript™ UP
Tipo de muestraARN
Condiciones de envíoHielo húmedo
Suficiente para200 reacciones
Método de detecciónSonda de cebado
Para utilizar con (aplicación)Expresión génica
Método de PCRRT-qPCR de 1 paso
Velocidad de reacciónEstándar
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Contiene suficientes reactivos para 200 reacciones con volúmenes de reacción de 50 µl Incluye:
• 1 × tubo de 5 ml de mezcla maestra (2X) que contiene ADN polimerasa AmpliTaq Gold™ UP, dNTPs (incluido dUTP), referencia pasiva 1 y componentes de tampón optimizados. Almacenar entre -15 y -25 °C.
• 1 tubo de 250 µl de mezcla de enzimas 40X RT que contiene la transcriptasa inversa ArrayScript™ UP y el inhibidor de la ARNasa. Almacenar entre -15 °C y -30 °C.

Preguntas frecuentes

What can I do to improve the sensitivity of my qPCR assay?

If you are targeting a low-abundance gene, you may have trouble getting Ct values in a good, reliable range (Ct > 32). To increase the sensitivity of the assay, you may want to consider the following:

- Increase the amount of RNA input into your reverse transcription reaction, if possible
- Increase the amount of cDNA in your qPCR reaction (20% by volume max)
- Try a different reverse transcription kit, such as our SuperScript VILO Master Mix, for the highest cDNA yield possible
- Consider trying a one-step or Cells-to-CT type workflow (depending on your sample type)

How do I set the baseline for my qPCR experiment?

Most times your instrument software can automatically set a proper baseline for your data. Check out our short video, Understanding Baselines, for more information on how to set them (https://www.youtube.com/watch?feature=player_embedded&v=5BjFAJHW-bE).

How do I set the threshold for my qPCR experiment?

In most cases your instrument software can automatically set a proper threshold for your data. Check out our short video, Understanding Thresholds, for more information on how to set them (https://www.youtube.com/watch?feature=player_embedded&v=H_xsuRQIM9M).

I am not getting any amplification with my TaqMan Assay or SYBR Green primer set. What is causing this?

There could be several reasons for no amplification from an assay or primer set. Please see these examples and suggested solutions in our Real-Time Troubleshooting Tool (https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/pcr/real-time-pcr/qpcr-education/real-time-pcr-troubleshooting-tool/gene-expression-quantitation-troubleshooting/no-amplification.html) for more details.

I am getting amplification in my no-template control (NTC) wells in my qPCR experiment. What is causing this?

There could be several reasons for amplification in a NTC well. Please see these examples and suggested solutions in our Real-Time Troubleshooting Tool (https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/pcr/real-time-pcr/qpcr-education/real-time-pcr-troubleshooting-tool/gene-expression-quantitation-troubleshooting/amplification-no-template-control.html) for more details.