Mezcla maestra de 1 paso para virus TaqMan™ Fast
Mezcla maestra de 1 paso para virus TaqMan™ Fast
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Mezcla maestra de 1 paso para virus TaqMan™ Fast
Applied Biosystems™

Mezcla maestra de 1 paso para virus TaqMan™ Fast

La mezcla maestra TaqMan Fast Virus 1-Step se ha diseñado para una RT-PCR en tiempo real rápida y altamente sensible,Más información
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La mezcla maestra TaqMan Fast Virus 1-Step se ha diseñado para una RT-PCR en tiempo real rápida y altamente sensible, incluso en presencia de inhibidores de PCR exigentes. La formulación 4X proporciona una detección mejorada de virus de ARN y ADN y es ideal para estudios de expresión génica multiplex, incluso con una entrada de baja concentración. La mezcla maestra TaqMan Fast Virus 1-Step proporciona un formato de un solo tubo para una manipulación y procesamiento uniformes, al mismo tiempo que proporciona ciclos de qPCR en inferior al 30 minutos, útil cuando se trabaja en flujos de trabajo de alto rendimiento.

Características clave del producto:
Alta sensibilidad: mezcla maestra 4X para amplificar ARN y ADN con alta sensibilidad
Resultados uniformes: formulado para controlar los inhibidores comunes de la RT-PCR detectados en la sangre, las heces y otras muestras difíciles
Aplicación simplificada: mezcla maestra de un paso y un tubo que ofrece un solo ciclo con ARN y ADN, lo que permite combinar fácilmente dianas en una placa
Flexibilidad de dianas: funciona con singleplex, multiplex y controles internos exógenos o endógenos
Alta eficacia: velocidad de qRT-PCR aumentada en instrumentos rápidos y estándar

Alta sensibilidad
Muchas muestras de investigación comunes con ácidos nucleicos víricos tienen niveles muy bajos de diana. Hemos optimizado la mezcla maestra para ofrecer una detección de alta sensibilidad de dianas víricas. La mezcla maestra de mayor concentración le permite configurar reacciones más pequeñas, lo que significa que puede realizar protocolos de ciclos rápidos y obtener como mínimo la misma sensibilidad que la que se espera del qPCR de ciclo estándar. De forma alternativa, se pueden añadir cantidades mayores de entrada de muestras a los volúmenes de reacción estándar para una cuantificación precisa de muestras de títulos bajos (figura 1).

Resultados uniformes en presencia de inhibidores
Las muestras de investigación más analizadas en busca de virus incluyen sangre, suciedad y tejidos. Los componentes del tampón y los aditivos patentados de la mezcla maestra TaqMan Fast Virus 1-Step se han optimizado para ocuparse de inhibidores de RT-PCR (figura 2) y de esa forma poder garantizar un rendimiento uniforme incluso con estas muestras difíciles, para que así pueda confiar más en sus resultados.

Flexibilidad en las dianas
Resulta algo común en los laboratorios analizar en busca de virus de ARN y ADN en una amplia variedad de muestras Para simplificar sus experimentos, se ha desarrollado un solo protocolo de mezcla maestra TaqMan Fast Virus 1-Step para analizar ambos tipos de ácido nucleico; de esta forma podrá realizar consultas de virus de ARN y ADN una junto a la otra, en la misma placa, utilizando los mismos pasos de manipulación (figura 3). Además, puesto que la investigación de virus a menudo incluye sondas y primers multiplexados y controles internos de la reacción, hemos optimizado la mezcla maestra para funcionar con múltiples amplicones diana (figura 4).

Resultados rápidos
La mezcla maestra TaqMan Fast Virus 1-Step acelera la obtención de resultados y maximiza el uso de sus instrumentos de PCR en tiempo real con un protocolo rápido. La formulación de alta concentración permite añadir más muestra de ácido nucleico diana en los volúmenes de reacción más pequeños necesarios para ejecutar protocolos rápidos. Esto le permite mantener la sensibilidad con muestras de investigación de títulos bajos al mismo tiempo que mejora la velocidad y el rendimiento (figura 5).

La mezcla maestra TaqMan Fast Virus 1-Step proporciona un reactivo fiable y eficaz para la RT-PCR en tiempo real de muestras víricas que no sacrifica la precisión. Su sólido rendimiento en presencia de inhibidores de RT-PCR comunes y su preparación de muestras cómoda y flexible le permite tener más confianza en sus resultados.
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Para utilizar con (equipo)7500 Fast System, 7500 System, 7900HT System, QuantStudio 12k Flex, QuantStudio 3, QuantStudio 5, QuantStudio 6 Flex, QuantStudio 6 Pro, QuantStudio 7 Pro, QuantStudio 7 Flex, StepOne, StepOnePlus, ViiA 7 System
FormatoTubo
Inicio en calienteInicio en caliente integrado
Inhibitor Tolerance (Simple)High
Capacidad multiplexUp to 3-plex
N.º de reacciones200 reacciones
Colorante de referencia pasivaROX (premezclado)
PolimerasaADN polimerasa AmpliTaq Fast
Línea de productosTaqMan
Tipo de productoMezcla maestra de 1 paso
Cantidad1 x 1 ml
Transcriptasa inversaM-MLV
Tipo de muestraARN total, ADN vírico, ARN vírico, ARNm
Condiciones de envíoHielo seco
Suficiente para200 reacciones
Especificidad de dianaRNA only, Both RNA and DNA
TermoestabilidadNot Applicable
Método de detecciónSonda de cebado
Para utilizar con (aplicación)Expresión génica, Detección de virus, DNA Quantitation, Presence/Absence
FormularioLíquido
Método de PCRRT-qPCR de 1 paso
Velocidad de reacciónrápida o estándar
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Contiene un tubo de 1 ml de mezcla maestra 4X RT-PCR suficiente para 200 reacciones. Componentes:

• ADN polimerasa AmpliTaq™ Fast, UP

• Transcriptasa inversa de MMLV termoestable

• dNTPs

• inhibidor de ARNasas

• colorante ROX™ (referencia pasiva)


Almacenar los tubos a -20 °C en la oscuridad.

Preguntas frecuentes

What can I do to improve the sensitivity of my qPCR assay?

If you are targeting a low-abundance gene, you may have trouble getting Ct values in a good, reliable range (Ct > 32). To increase the sensitivity of the assay, you may want to consider the following:

- Increase the amount of RNA input into your reverse transcription reaction, if possible
- Increase the amount of cDNA in your qPCR reaction (20% by volume max)
- Try a different reverse transcription kit, such as our SuperScript VILO Master Mix, for the highest cDNA yield possible
- Consider trying a one-step or Cells-to-CT type workflow (depending on your sample type)

How do I set the baseline for my qPCR experiment?

Most times your instrument software can automatically set a proper baseline for your data. Check out our short video, Understanding Baselines, for more information on how to set them (https://www.youtube.com/watch?feature=player_embedded&v=5BjFAJHW-bE).

How do I set the threshold for my qPCR experiment?

In most cases your instrument software can automatically set a proper threshold for your data. Check out our short video, Understanding Thresholds, for more information on how to set them (https://www.youtube.com/watch?feature=player_embedded&v=H_xsuRQIM9M).

I am not getting any amplification with my TaqMan Assay or SYBR Green primer set. What is causing this?

There could be several reasons for no amplification from an assay or primer set. Please see these examples and suggested solutions in our Real-Time Troubleshooting Tool (https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/pcr/real-time-pcr/qpcr-education/real-time-pcr-troubleshooting-tool/gene-expression-quantitation-troubleshooting/no-amplification.html) for more details.

I am getting amplification in my no-template control (NTC) wells in my qPCR experiment. What is causing this?

There could be several reasons for amplification in a NTC well. Please see these examples and suggested solutions in our Real-Time Troubleshooting Tool (https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/pcr/real-time-pcr/qpcr-education/real-time-pcr-troubleshooting-tool/gene-expression-quantitation-troubleshooting/amplification-no-template-control.html) for more details.