La resina UltraLink de estreptavidina Thermo Scientific Pierce es una resina de poliacrilamida granulada procedente de una proteína recombinante inmovilizada que se puede emplear en diversos métodos de purificación por afinidad a la biotina.
Características de la resina UltraLink de estreptavidina:
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Estreptavidina: proteína de estreptavidina recombinante purificada (53 kDa, pl casi neutro); tetramérico con cuatro sitios de unión de biotina por molécula
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Resina UltraLink: el soporte de acrilamida es una alternativa a los soportes de agarosa granulada entrecruzada para aplicaciones de presión media
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Capacidad estándar: esta variedad de gránulos tiene una carga normal de estreptavidina inmovilizada, lo que ofrece una capacidad de unión de al menos 2 mg de BSA biotinilado por ml de resina
Aplicaciones:• Purificación de antígenos de membrana junto con anticuerpos monoclonales biotinilados
• Aislamiento de proteínas de la superficie celular que se han etiquetado con un reactivo biotinilización divisible
• Aislamiento de glicoproteínas de la superficie celular mediante concanavalina A biotinilada
• Recuperación de ADN monocatenario biotinilado para una secuenciación didesoxi
• Placas con revestimiento de estreptavidina utilizadas para la secuenciación directa de la fase sólida
• Mutagénesis
in vitro con placas revestidas de estreptavidina
• Obtención de huellas de ADN con placas con revestimiento de estreptavidina
Propiedades de la resina Thermo Scientific UltraLink:• Estabilidad pH del soporte: entre 1 y 13
• Tamaño medio de partícula: Desde 50 hasta 80 micrones
• Límite de exclusión: superior a 2.000.000 de daltons
• Área media de la superficie: superior a 250 m2 por gramo de microesferas
• Volumen de poro medio: superior a 1,2 ml por gramo de microesferas (> 60 % del volumen de microesferas)
• Tamaño de poro: entre 500 y 1000 angstroms (entre 50 y 100 nm)
• Velocidad lineal máxima: 3000 cm por hora
• Presión máxima: 100 psi (6,9 bar)
La resina UltraLink de estreptavidina Pierce consta de estreptavidina recombinante purificada que se ha inmovilizado covalentemente en un soporte de acrilamida granulada. La estreptavidina es una proteína tetramérica de unión de biotina. Los gránulos UltraLink son hidrófilos, sin carga, muy entrecruzados, rígidos y duraderos. Estas propiedades hacen que la resina de afinidad sea adecuada para una amplia variedad de procedimientos de afinidad de tipo lote o columna que requieran una cromatografía de presión media. La resina ofrece una alternativa a los soportes de agarosa cuando las situaciones así lo piden. Los anticuerpos biotinilados, las proteínas, los péptidos, los ácidos nucleicos y otras moléculas o complejos de interacción se pueden capturar, inmunoprecipitar, eliminar o purificar a partir de muestras utilizando esta resina de estreptavidina.
La estreptavidina es una proteína tetramérica que contiene cuatro sitios de unión de biotina, de forma similar a la avidina. La proteína nativa de
Streptomyces avidinii no posee carbohidratos, tiene un pI acídico de 5,5 y una masa de 75 kDa. La proteína recombinante empleada para la fabricación de resinas de estreptavidina Thermo Scientific Pierce tiene un punto isoeléctrico casi neutro y una masa de 53 kDa. La estreptavidina suele tener menos fuerza de unión inespecífica que la avidina (clara de huevo) debido a la ausencia de carbohidratos.
La resina UltraLink es un soporte de policramida activado por azlactonas, hidrofílico, sin carga, de gran capacidad, muy entrecruzado, rígido y poroso. Este soporte es especialmente útil para técnicas de presión media cuando se utilizan grandes volúmenes de muestras que requieren técnicas de caudal rápido (FPLC) y aplicaciones a gran escala. A diferencia de los soportes de agarosa granulada típicos, el soporte UltraLink no se rompe ni colapsa cuando se somete a caudales elevados que producen una presión superior a 25 psi.
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