La sonda fluorescente Thermo Scientific DRAQ5™ es una tinción de ADN de rojo lejano para células vivas o fijas y de fácil multiplexado con otros fluoróforos, como las células que expresan las proteínas de fusión de la proteína verde fluorescente (GFP).

DRAQ5™ es una tinción de ADN de rojo lejano para aplicaciones de adquisición de imágenes celulares fluorescentes con células vivas o fijas. Debido a su excitación y emisión en rojo lejano, la tinción DRAQ5 se puede multiplexar con muchos otros fluoróforos. Se suele elegir para la contratinción de núcleos y la medición del contenido de ADN en estudios de proliferación celular que abarcan células que expresan las proteínas de fusión de la GFP. La sonda fluorescente DRAQ5 es compatible con muchos protocolos existentes a través de una amplia gama de plataformas de instrumentación.

Características de la sonda fluorescente DRAQ5:

• Colorante DRAQ5: un tinte fluorescente de rojo a infrarrojo específico para el ADN (núcleos y cuantificación de ADN)
• Práctico: suministrado como soluciones de tinción DRAQ5 fáciles de usar (5 mM)
• Adquisición de imágenes celulares: colorante lipofílico y que permea las membranas que resulta eficaz para la tinción de células vivas y células fijas, así como para la cuantificación del contenido de ADN
• Contratinción: ideal para utilizar junto con otros indicadores de fluoróforos para la microscopía de fluorescencia o la detección de alto contenido (HCS)

Aplicaciones:
• Citometría de flujo
• citometría de barrido de flujo y láser
• Adquisición de imágenes de células vivas
• Ensayos basados en células

Propiedades de la estructura del colorante fluorescente DRAQ5
•: Nombres alternativos exclusivos
•: Compuesto antraquinónico
• Nomenclatura química: 1,5-bis{[2-(dimetilamino) etil]amino}-4, 8-dihidroxiantraquinona-9,10-diona
• Fórmula molecular: No disponible
• Peso molecular: 412.54
• Longitud de onda de excitación: 647 nm de línea óptima (Exλmáx. = 646 nm)
• Longitud de onda de emisión: > 665 nm a infrarrojo > 800 nm (Emλmáx. = 681 nm/697 nm intercalado con ADNbc)
• Coeficiente de extinción: No disponible
• N.º CAS: No disponible
• Pureza: > 99 %
• Solubilidad: Soluble en concentraciones de trabajo en agua y tampones habituales
• Grupos reactivos: Ninguno; une un surco menor del AT de ADN mediante la imitación de la distribución de la histona 2b, lo que produce un aumento del rojo en 16 nm

Los ensayos de fluorescencia basados en células, como la citometría de flujo, ELISA intracelular, la microscopía de fluorescencia y la adquisición de imágenes de alto contenido requieren una etiqueta fluorescente para identificar las células individuales. Cuando se utilizan varias sondas fluorescentes para detectar objetivos o actividades celulares diferentes, cada sonda debe tener un espectro fluorescente distinto de las otras sondas. Las sondas de unión de ADN en azul fluorescente, Hoechst y DAPI, se utilizan frecuentemente; sin embargo, dichas sondas no se pueden utilizar cuando no se dispone de iluminación UV o se emplean otras sondas fluorescentes emisoras de luz azul. Por lo tanto, las sondas nucleares que emiten en un color distinto del azul son útiles para la identificación y el conteo celular, así como para la determinación del contenido de ADN y la morfología nuclear.

La sonda fluorescente DRAQ5 emite en la región de rojo lejano, es lipofílica y cruza las membranas celulares y nucleares de tejidos y células vivas y fijas para una tinción rápida del ADN. Esta tinción es soluble en agua, se suministra lista para su uso y no requiere de ARNasa, lisis celular o un paso de lavado, de manera que resulta compatible con la automatización. Como la tinción de ADN es estequiométrica, la sonda fluorescente DRAQ5 puede emplearse para el análisis de contenido de ADN en estudios de proliferación celular. La sonda fluorescente DRAQ5 se suele añadir como la última tinción en un procedimiento de etiquetado, ya que no es necesario realizar ningún proceso de lavado. También puede añadir esta sonda a un medio de ensayo para un ensayo en células vivas.