El colorante reactivo a aminas Thermo Scientific DyLight 550 es un derivado activado por ésteres NHS de DyLight 550 de alto rendimiento que se utiliza para marcar con fluorescencia anticuerpos y otras proteínas que luego se utilizan como sondas moleculares para adquisición de imágenes de células y otros métodos de detección de fluorescencia.
DyLight 550 proporciona una fluorescencia vibrante de naranja a rojo con un mejor rendimiento que otros derivados de la rodamina, incluidos Alexa Fluor™ 555, TRITC y Cy3™ para aplicaciones fluorescentes. La alta solubilidad en agua de los flúores DyLight significa que se puede alcanzar una alta relación colorante-proteína sin causar precipitación de los conjugados. El colorante reactivo a las aminas DyLight 550 también está disponible como parte de dos kits de etiquetado de anticuerpos.
Características del DyLight 550 de éster NHS:
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Alto rendimiento: DyLight 550 muestra una fluorescencia más brillante que los colorantes Alexa Fluor 555, TRITC y Cy3.
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Específico: el colorante activado con éster NHS etiqueta proteínas y otras moléculas en aminas primarias (-NH2).
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Procedimiento optimizado: seguir el protocolo estándar da como resultado anticuerpos con excelentes relaciones colorante-proteína y tasas de recuperación para una actividad y etiquetado de fluorescencia óptimos.
Aplicaciones:• Etiquetado de anticuerpos primarios para microscopia de inmunofluorescencia, inmunohistoquímica (IHC), Western blotting o pruebas ELISA
• Etiquetado de proteínas diana para las estrategias de detección fluorescente
in vitro e
in vivoEl colorante reactivo a las aminas DyLight 550 se activa con una fracción de éster
N-hidroxisuccinimida (NHS) para reaccionar con los grupos α-amino con terminación de tipo N o los grupos ε-amino de residuos de lisina expuestos para formar enlaces de amidas estables. Obtenga más información sobre la
química del éster NHS.
Las reacciones típicas de etiquetado requieren que el colorante amino-reactivo DyLight 550 se disuelva primero en dimetilformamida anhidra (DMF) u otro disolvente orgánico adecuado antes de añadir una cantidad molar específica de colorante a un tampón sin aminas que contenga la proteína que se va a etiquetar. No obstante, la alta solubilidad de los flúores DyLight permite añadir soluciones proteicas directamente a cantidades específicas del reactivo de etiquetado. Esta característica permite ofrecer el colorante reactivo a aminas DyLight 550 en múltiples formatos con protocolos flexibles para lograr grados eficientes de etiquetado.
También ofrecemos kits de etiquetado de anticuerpos DyLight 550 en formato estándar y microescala para el etiquetado fluorescente rápido y eficaz de anticuerpos para su uso en métodos de fluorescencia. El kit de tamaño estándar contiene todos los componentes necesarios para llevar a cabo tres reacciones de etiquetado independientes utilizando 1 mg de IgG o cantidades similares de otras proteínas. El kit a microescala contiene todos los componentes necesarios para realizar cinco reacciones de etiquetado independientes utilizando 100 µg de IgG. Ambos tamaños de kit incluyen el DyLight 550 de éster NHS reactivo a las aminas en prácticos viales de un solo uso, así como resina de purificación y columnas de centrifugación para la preparación de conjugado listo para su uso.
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