Indo-1 AM Calcium Sensor Dye es un tinte que penetra en la membrana utilizado para determinar los cambios en concentraciones de calcio dentro de la célula mediante microscopía de fluorescencia, citometría de flujo, espectroscopia de fluorescencia y lectores de microplacas de fluorescencia. Una vez que Indo-1 se introduce en la célula, las esterasas disocian el grupo AM y permiten el acceso de un tinte sin capacidad de permear la membrana. El pico de emisión de Indo-1 libre es de 475 nm. Tras unirse al calcio, el pico de emisión desciende a 410 nm.
Esto puede medirse a través de la citometría de flujo a lo largo de un periodo de tiempo y representarse como una relación entre las dos longitudes de onda de emisión. Para optimizar la relación entre las dos emisiones, la fluorescencia de Indo-1 libre se debe recoger mediante un filtro de más de 485 nm (525 nm es una buena opción); por el contrario, la fluorescencia de Indo-1 unido se debe recoger mediante un filtro de menos de 400 nm. Debido a que el perfil de emisión de Indo-1 es amplio, no es posible realizar un análisis de flujo multicolor utilizando eFluor ™ 450, eVolve™ 605 o eVolve™ 655. Sin embargo, los anticuerpos conjugados con fluorocromo que utilizan 488 nm o 633 nm son bastante compatibles con Indo-1.
Peso molecular: 1009,91
Pico de excitación: 346 nm
Pico de emisión: 475 nm
Indo-1 AM se debe reconstituir en DMSO de alta calidad y recién abierto. Concentración recomendada: 1 mM.
Una vez reconstituido, debe protegerse de la luz y almacenarse a - 20 °C; se deben evitar los ciclos de congelación y descongelación.
Pureza
> 90 % mediante HPLC
Aplicación declarada
Análisis mediante citometría de flujo, microscopía, tinción inmunohistoquímica
Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.