Imject™ Ovalbumin (in PBS)

La OVA Imject de Thermo Scientific Imject es una proteína de ovoalbúmina purificada convenientemente formulada para la preparación de conjugados hapteno-proteína portadora.

Características de la OVA Imject:

• Purificada a partir de claras de huevo de pollo y liofilizada en solución salina con tampón y fosfato.
• Proteína polipeptídica única con una masa molecular de 45.000 daltons.
• Contiene 20 residuos de lisina, la mayoría de los cuales tienen aminas primarias capaces de reaccionar con un reactivo de conjugación.
• Contiene 14 restos de ácido aspártico y 33 de ácido glutámico cuyos grupos carboxilo son los responsables de la carga negativa neta (pI 4,63) de la OVA.
• No es tan inmunogénica como la KLH (hemocianina de lapa californiana), pero es más soluble en DMSO (dimetil sulfóxido) para aplicaciones que requieran este disolvente.
• Es útil como proteína portadora irrelevante para detección de anticuerpos y en inmunoensayos tras la utilización de KLH como proteína portadora para generar la respuesta inmunitaria contra el hapteno.

Debido a que la ovoalbúmina es solo levemente inmunogénica, se utiliza principalmente en procesos de producción de anticuerpos como proteína portadora secundaria (independiente) para hacer que los antígenos sean más sensibles a los procedimientos de detección. Por ejemplo, los antígenos peptídicos recubren más fácilmente microplacas de poliestireno cuando están conjugados con ovoalbúmina, facilitando, por tanto la detección de antisueros producidos mediante conjugados de inmunógenos con KLH u otras proteínas portadoras más inmunogénicas.

Las proteínas portadoras son moléculas grandes y complejas capaces de estimular una respuesta inmunitaria tras su inyección. La producción satisfactoria de anticuerpos específicos frente a antígenos pequeños (es decir, péptidos o compuestos farmacológicos) requiere que estos haptenos se conjuguen covalentemente a una molécula más grande y más compleja (normalmente una proteína) para hacerlos inmunogénicos. Las proteínas portadoras se seleccionan en función de su inmunogenicidad, su solubilidad y de si se puede lograr una conjugación adecuada con la proteína portadora.

La ovoalbúmina (OVA), la proteína más abundante en la clara del huevo de gallina, resulta una proteína cómoda para una diversidad de aplicaciones en el laboratorio. La proteína de 45 kDa no es tan inmunogénica como otras proteínas, como por ejemplo la hemocianina de lapa californiana (KLH). No obstante, la estructura independiente de la OVA la convierte en especialmente útil como proteína portadora de péptidos y otros antígenos pequeños que por sí mismos son difíciles de manipular en ensayos de detección habituales como el ELISA. Aunque es más hidrófoba y menos soluble en tampones acuosos que la BSA, la ovoalbúmina permanece soluble en hasta un 70 % de DMSO, lo que hace de ella una proteína útil para la conjugación con haptenos que requieran DMSO para su solubilidad. La ovoalbúmina contiene numerosas aminas primarias y grupos carboxilo que pueden servir como elementos diana para la conjugación con glutaraldehído, éster de NHS, EDC y otros reactivos de entrecruzamiento.

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