Reactivo de extracción de proteínas sinápticas Syn-PER™

El reactivo de extracción de proteínas sinápticas Thermo Scientific Syn-PER es un reactivo de lisis celular patentado para el aislamiento eficaz de sinaptosomas que contienen proteínas sinápticas funcionales de tejido neuronal y neuronas cultivadas primarias.

Características del reactivo de extracción de proteínas sinápticas Syn-PER:

• Extracción eficiente: obtenga hasta 10 µg de proteína sináptica por miligramo de tejido neuronal o 4 µg de proteína sináptica por 35 mm de neuronas primarias cultivadas (10⁶ células)
• Formulación suave: aísle sinaptosomas viables, extraiga proteínas sinápticas nativas y preserve la integridad de la fosfoproteína
• Procedimiento rápido: obtenga una suspensión sinaptosomal en menos de una hora
• Protocolo simple: no requiere pasos de ultracentrifugación

Aplicaciones del reactivo de extracción de proteínas sinápticas Syn-PER:
• Aislar los sinaptosomas funcionales para estudiar la liberación de neurotransmisores
• Extraer las proteínas presinápticas y posinápticas para identificar cambios en la composición y función de las proteínas en las sinapsis
• Conservar y estudiar los eventos de fosforilación de proteínas lábiles o transitorias asociados con las sinapsis

El reactivo Syn-PER se utiliza para preparar sinaptosomas que contienen proteínas biológicamente activas presinápticas y posinápticas (es decir, membranas intactas y complejos proteicos de sinapsis). Cuando se utiliza con tejido neuronal fresco o neuronas cultivadas primarias, los sinaptosomas preparados con el reactivo de Syn-PER se pueden utilizar para estudiar la transmisión sináptica. Las proteínas sinaptosomal contenidas en estos extractos también se pueden utilizar para aplicaciones posteriores como inmunotransferencia, inmunoprecipitación, ensayos de actividad enzimática y estudios de interacción proteína-proteína. El reactivo de extracción de proteínas sinápticas Syn-PER minimiza la degradación de las fosfoproteínas y es ideal para estudios que requieren la preservación de la integridad de la fosfoproteína.

El reactivo de extracción de proteínas sinápticas Syn-PER enriquece eficazmente la proteína presináptica y posináptica dentro de los sinaptosomas con alto rendimiento. El reactivo de lisis celular no desnaturalizante es compatible con muchas aplicaciones posteriores, incluidos ensayos de liberación de neurotransmisores, ensayos enzimáticos (p. ej., fosfatasa, quinasas), inmunoensayos, varios procedimientos de cromatografía y electroforesis. Además, el reactivo Syn-PER preserva la integridad de la fosfoproteína mejor que la mayoría de los tampones de extracción disponibles a nivel comercial, incluso en ausencia de inhibidores de fosfatasa. El reactivo Syn-PER no contiene inhibidores de proteasa ni de fosfatasa. Sin embargo, los inhibidores como los inhibidores de proteasa y/o fosfatasa Thermo Scientific Halt se pueden añadir justo antes de su uso para prevenir la proteólisis o para ofrecer protección adicional contra la alta actividad de la fosfatasa que normalmente se presenta en el tejido cerebral.

Los sinaptosomas son terminales nerviosos aislados que se generan durante la homogeneización del tejido nervioso. Los preparados de sinaptosoma pueden usarse para la extracción de proteínas presinápticas y posinápticas porque contienen el terminal presináptico completo, incluyendo mitocondrias y vesículas sinápticas, junto con la membrana posináptica y la densidad posináptica. Los sinaptosomas se usan comúnmente para estudiar la función sináptica porque contienen canales de iones funcionales, receptores, enzimas y vesículas sinápticas intactas, que pueden tomar y liberar neurotransmisores. La preparación del sinaptosoma suele involucrar varios pasos de ultracentrifugación y gradientes de densidad para separar esta fracción celular de otros organelos.

Más datos del producto
• Método para aislar sinaptosomas funcionales

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