Para proteínas y otras muestras biológicas, como ácidos nucleicos, con MWCO de 50 000, los concentradores de proteínas de PES Thermo Scientific Pierce ofrecen una concentración rápida de proteínas, una excelente recuperación de muestras y compatibilidad de instrumentos. Este material para centrífuga cuenta con una membrana de polietersulfona de alto flujo (PES) para la concentración, la desalinización y el intercambio de tampones de muestras biológicas. Este producto tiene un corte de peso molecular de 50 000, y se puede utilizar para procesar volúmenes de muestras de 0,5 a 100 ml.

Las características de los concentradores de proteínas de PES de MWCO de 50 000 incluyen:
• Concentración proteica rápida: puede conseguirse una concentración de la muestra de 10 a 30 veces en 15 minutos o menos
• Excelente recuperación de proteínas: la recuperación típica de proteínas es del > 90 % (cuando la masa de la muestra es al menos dos veces mayor que el MWCO publicado)
• Compatibilidad de instrumentos: se puede utilizar una microcentrífuga estándar con rotores oscilantes (excepto 88504) o de ángulo fijo; la muestra se puede recolectar y recuperar sin centrifugado invertido
• Versátil: realizar fácilmente la concentración de muestras, la diafiltración o el intercambio de tampones de muestras biológicas

Para una fácil identificación, el valor de MWCO está grabado en el lateral de cada dispositivo. Para facilitar la adición y recuperación de muestras, hay una ventana transparente con graduaciones en el lateral de cada dispositivo, lo que permite la determinación visual del volumen de retención. El diseño vertical de la membrana permite altas velocidades de flujo, baja unión no específica y una agregación proteica insignificante en la membrana; y proporciona resultados fiables y coherentes para procesar volúmenes de muestras entre 0,5 y 100 ml. La recuperación de proteínas habitual es del 90 % cuando la masa de las proteínas de la muestra es al menos dos veces mayor que el MWCO del dispositivo utilizado. Por ejemplo, cuando utilice muestras de IgG (MW ∼ 150 000), utilice los concentradores de MWCO de 5000, 10 000, 30 000 o 50 000. La concentración de la muestra de 10 a 30 veces se puede lograr en 15 minutos.

Concentradores de proteínas para aplicaciones PES
• Concentración de proteínas de medios de cultivo de tejidos, antisuero o preparaciones de anticuerpos monoclonales
• Concentración de picos de proteínas después de la cromatografía de permeación en gel
• Eliminación de la etiqueta no incorporada después de las reacciones de modificación de proteínas
• Concentración y desalinización/intercambio de tampones después de la elución de proteínas de columnas de intercambio iónico, interacción hidrofóbica (HIC), quelato metálico o cromatografía de afinidad
• Separación de moléculas de diferentes tamaños

Los concentradores de proteínas Pierce PES contienen una membrana clasificada para retener moléculas con un peso molecular al menos dos veces mayor que la clasificación MWCO de la membrana PES dentro del dispositivo. La recuperación reducida puede ocurrir cuando se usa un concentrador con moléculas más pequeñas que la masa recomendada. La recuperación de proteínas variará según la proteína específica de la muestra y su concentración inicial.

El volumen de punto muerto para los concentradores de 0,5 ml, 2–6 ml, 5–20 ml y 20–100 ml es de aproximadamente 15 µl, 30 µl, 50 µl y 350 µl, respectivamente.

Para lograr una recuperación de proteína del > 90 % con los concentradores de 0,5 ml, la concentración mínima de proteína en la muestra debe ser de 0,05 mg/ml. Para todos los demás concentradores, la concentración mínima de proteína en la muestra debe ser de 0,1 mg/ml.

Centrífugas y velocidades óptimas
Los concentradores de 0,5 ml se pueden utilizar de forma eficaz con una fuerza centrífuga máxima de 15 000 × g utilizando únicamente una centrífuga de ángulo fijo.

Para los concentradores de 2-6 ml, se pueden utilizar modelos de centrífuga de ángulo fijo o basculante. Se recomiendan centrífugas basculantes capaces de generar de 2000 a 4000 × g y una fuerza centrífuga máxima de 4000 × g. Con centrífugas de ángulo fijo, se recomiendan modelos capaces de generar de 5000 a 10 000 × g y una fuerza centrífuga máxima de 8000 × g.

Para los concentradores de volumen de 5 a 20 ml, se pueden usar modelos de centrífuga de ángulo fijo o basculante. Se recomiendan centrífugas basculantes capaces de generar de 2000 a 5000 × g y una fuerza centrífuga máxima de 4000 × g. Con centrífugas de ángulo fijo, se recomiendan modelos capaces de generar de 5000 a 8000 × g y una fuerza centrífuga máxima de 6000 × g.

Para los concentradores de 20 a 100 ml, solo se recomiendan centrífugas basculantes capaces de generar de 1000 a 2000 × g. Utilice una fuerza centrífuga máxima de 2000 × g. Estos concentradores no se recomiendan para su uso en rotores de ángulo fijo.

La fuerza centrífuga, la temperatura y el volumen de la muestra, la concentración y la viscosidad afectarán a la velocidad de filtración. Por lo tanto, el tiempo de centrifugación debe optimizarse para cada aplicación.