Mem-PER™ Plus Membrane Protein Extraction Kit
Mem-PER™ Plus Membrane Protein Extraction Kit
Thermo Scientific™

Mem-PER™ Plus Membrane Protein Extraction Kit

El kit de extracción de proteínas de membranas Mem-PER Plus Thermo Scientific permite la solubilización a pequeña escala y elMás información
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Número de catálogoCantidad
898421 kit
Número de catálogo 89842
Precio (CLP)
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1 kit
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El kit de extracción de proteínas de membranas Mem-PER Plus Thermo Scientific permite la solubilización a pequeña escala y el enriquecimiento de proteínas integrales de membrana y de proteínas asociadas a membrana en un procedimiento con reactivos sencillo.

Características del kit Mem-PER Plus:

Extracción y aislamiento: produce contaminación cruzada mínima (típicamente menos del 10 %) de proteínas citosólicas en la fracción de proteínas de membrana.
Células o tejido: eficaz para la extracción a partir de cultivos de células y tejidos de mamífero
Compatibilidad con aplicaciones posteriores: análisis de extractos de proteínas de membrana mediante electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecilsulfato sódico (SDS-PAGE), Western blot, inmunoprecipitación y ensayos de proteínas
Rápido y simple: aislamiento de proteínas de membrana en aproximadamente una hora
Sin necesidad de equipos especiales: solo se necesitan una microcentrífuga de sobremesa, tubos, homogeneizadores y pipetas

El kit Mem-PER Plus aísla de forma eficaz proteínas de la membrana de tejidos y células en cultivo aplicando un sencillo procedimiento de microcentrífuga de sobremesa. Las proteínas integrales de membrana que tienen uno o dos dominios transmembranales se solubilizan y aíslan de forma eficaz de las proteínas citosólicas. El kit facilita la extracción y el enriquecimiento selectivo de proteínas de membrana integrales y unidas a la membrana a partir de cultivos de células de mamífero, así como de tejidos duros y blandos de mamífero. El kit Mem-PER Plus tiene muchas ventajas en comparación con el kit Mem-PER original. El protocolo es más sencillo y las fracciones son compatibles directamente con muchas aplicaciones posteriores como PAGE-SDS, Western blot, cuantificación de proteínas por ácido bicinconínico (BCA), inmunoprecipitación y técnicas de marcaje de proteínas que reaccionan con grupos amina.

Incluye:
El kit contiene una solución de lavado celular, tampón de permeabilización y tampón de solubilización.

Los métodos tradicionales para el aislamiento de la proteína de membrana son tediosos y requieren mucho tiempo, y requieren la separación de gradientes y el costoso equipo de ultracentrifugación. El kit de extracción de proteínas de membrana Mem-PER Plus permite el enriquecimiento de proteínas integrales de membrana y de proteínas asociadas a membrana a partir de cultivos de células o de tejidos de mamífero mediante un protocolo de extracción selectivo con un detergente suave. El uso de extracción selectiva con detergente elimina la incomodidad de la fase de separación por hidrofobicidad, lo que permite una mejor reproducibilidad y un mayor rendimiento.

En primer lugar, las células se permeabilizan con un detergente suave, lo que permite la liberación de la proteínas citosólicas solubles, después de lo cual las proteínas de membrana se solubilizan con un segundo detergente. La eficacia y el rendimiento de la extracción variarán dependiendo del tipo de células así como del número de veces que la proteína integral de membrana atraviese la bicapa lipídica. Normalmente la eficacia en la extracción de proteínas de membrana con uno o dos dominios transmembranales es superior al 90 %. La contaminación cruzada de proteínas citosólicas en la fracción de membrana normalmente es inferior al 10 %.

Más datos del producto
Extracción eficiente de proteínas de membrana de mamíferos

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Para uso exclusivo en investigación. No apto para uso en procedimientos diagnósticos.
Especificaciones
Cantidad1 kit
Tipo de reactivoTampón de lisis celular, solución detergente, fraccionamiento subcelular
Suficiente para50 muestras
FormularioLíquido
Línea de productosMem-PER
Tipo de productoKit de extracción de proteínas
Unit SizeEach
Contenido y almacenamiento
Tras la recepción, almacenar la solución de lavado celular y el tampón de solubilización a 4 °C. Dividir en alícuotas y almacenar el tampón de permeabilización a -20 °C para evitar la congelación/descongelación. El producto se envía en hielo.

Preguntas frecuentes

I am using the Mem-PER Plus Membrane Protein Extraction Kit with less than 5 X 10E6 cells. Should I scale down the amount of reagents accordingly?

The kit reagents can be scaled up or down as long as the ratio of reagents to cells is maintained. However, we don't have specific guidelines for the range of cell numbers that can be used because protein yields can vary depending on the cell line. It is important to note that the process of scaling the kit reagents up or down and determining the appropriate cell numbers for optimal protein yield will require empirical optimization by the investigator.

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What kind of detergent does the Permeabilization Buffer from the Mem-PER Plus Membrane Protein Extraction Kit (Cat. No 89842) contain?

The composition of the Permeabilization Buffer, including the identity and concentration of any detergent therein, is proprietary. However, the Permeabilization Buffer contains a very small amount of a weak non-ionic detergent to facilitate the permeabilization of the cells and release of the cytosolic proteins.

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Will the Mem-PER Plus Membrane Protein Extraction Kit (Cat. No. 89842) extract membrane proteins from the plasma membrane only or also from other intra-cellular membranes (e.g., nuclear, mitochondrial, endoplasmic reticulum)?

The Permeabilization buffer in the Mem-PER Plus Membrane Protein Extraction Kit (Cat. No. 89842) creates pores in the plasma membrane of cells that releases cytosolic proteins. The permeabilized cells are centrifuged, and the supernatant contains the cytosolic protein fraction. The pellet is then resuspended in the Solubilization buffer containing a proprietary detergent that solubilizes plasma, mitochondrial, and ER membrane proteins. Subsequent centrifugation yields a supernatant containing solubilized membrane and membrane-associated proteins.

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Can microalgae be processed with the Mem-PER Plus Membrane Protein Extraction Kit (Cat. No. 89842)?

The Mem-PER Plus Membrane Protein Extraction Kit is not suitable for any organism that has a cell wall, including algae, plants, yeast, or bacteria.

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Will M-PER Mammalian Protein Extraction Reagent extract membrane or cytoskeletal proteins?

M-PER Mammalian Protein Extraction Reagent can extract some membrane or cytoskeletal proteins, but the extraction efficiency is not consistent. The reagent was not intended to specifically extract these proteins. We recommend using Mem-PER Plus Membrane Protein Extraction Kit (Cat. No. 89842) for membrane protein extraction or Subcellular Protein Fractionation Kit for Cultured Cells (Cat. No. 78840) for compartmental extraction.

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Citations & References (7)

Citations & References
Abstract
P-Rex1 Mediates Glucose-Stimulated Rac1 Activation and Insulin Secretion in Pancreatic β-Cells.
Authors:Thamilselvan V,Gamage S,Harajli A,Chundru SA,Kowluru A
Journal:Cellular physiology and biochemistry : international journal of experimental cellular physiology, biochemistry, and pharmacology
PubMed ID:33347743
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PubMed ID:38607237
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PubMed ID:39626936
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