TMTduplex™ Isobaric Label Reagent Set, 5 x 0.8 mg

Los reactivos de marcado de masas isobáricas Thermo Scientific TMT™ reactivos a las aminas permiten la cuantificación multiplex de proteínas extraídas de células y tejidos mediante espectrometría de masas en tándem.

Los reactivos Tandem Mass Tag™ 2-Plex (TMTduplex™) son conjuntos de compuestos isobáricos (es decir, tienen la misma masa y estructura, también llamados «isotopómeros») que se activan por NHS para el etiquetado covalente e irreversible de los grupos de aminas primarias (—NH2). Cada reactivo isobárico contiene un número diferente de isótopos pesados en la región indicadora de masas, lo que resulta en una masa indicadora única durante el tándem de MS/MS para la identificación de muestras y la cuantificación relativa. Los reactivos etiquetan todos los péptidos preparados a partir de muestras de células o tejidos para el análisis de dos muestras en un solo análisis de MS.

Características de este set de reactivos para la determinación de etiquetas isobáricas TMTduplex:

• Potente: el análisis simultáneo mediante MS de dos muestras aumenta el rendimiento y permite la cuantificación relativa de dos condiciones de tratamiento diferentes
• Coherente: la estructura y rendimiento idénticos de los reactivos TMTZero™, TMTduplex™, TMTsixplex™ y TMT10plex™ permite una transición eficaz del desarrollo del método a la cuantificación multiplex, lo que posibilita la investigación y detección de biomarcadores en las distintas plataformas y conjuntos de datos.
• Robusto: la química coherente permite transición eficaz del desarrollo del método a la cuantificación multiplex, lo que posibilita la investigación y detección de biomarcadores.
• Eficaz: los reactivos a la amina activados por éster de NHS garantizan un etiquetado eficaz de todos los péptidos independientemente de la secuencia de proteínas o de la especificidad de la enzima proteolítica
• Compatible: optimizado para un uso con plataformas de MS/MS Thermo Scientific de alta resolución, como los instrumentos Q Exactive, Orbitrap Elite™ y Orbitrap Fusion™ Tribrid™ con análisis de datos totalmente compatibles con Proteome Discoverer™ 1.0 y superior

Aplicaciones:
• Determinación del perfil de expresión de proteínas de estado normal frente a estado de enfermedad o de control frente a bajo tratamiento
• Medición de dos muestras diferentes simultáneamente en un solo experimento
• Análisis cuantitativo de proteínas para las cuales no hay anticuerpos disponibles
• Identificación y cuantificación de proteínas de membranas modificadas después de la traslación
• Identificación y cuantificación de cientos a miles de proteínas en un solo experimento

Los reactivos Tandem Mass Tag (TMT) son etiquetas químicas que permiten la identificación y cuantificación de proteínas en diferentes muestras mediante espectrometría de masas en tándem. Los compuestos reactivos a la amina y compuestos activados por éster de NHS se unen de forma covalente al extremo amino de péptidos y al extremo amino libre de residuos de lisina de péptidos y proteínas con alta eficacia, con lo que se consigue el etiquetado de todos los péptidos en una muestra dada independientemente de la enzima utilizada para la digestión. Dado que los reactivos TMT comparten una estructura y masa idénticas (es decir, son isotopómeros), los péptidos etiquetados se coeluyen durante la separación de LC y se coaíslan durante el análisis de MS/MS. Gracias a esto, faltarán menos identificaciones de péptidos entre las muestras. Durante el análisis de MS/MS, cada etiqueta isobárica también se fragmenta para producir una masa iónica de informador única que se utiliza para la identificación y cuantificación de muestras. La cuantificación de proteínas se logra comparando las intensidades relativas de los dos iones informadores en los espectros MS/MS.

El juego de reactivos isobáricos TMTduplex permite el perfilado de proteínas para dos condiciones mediante análisis de MS en tándem. La etiqueta TMTzero permite realizar pruebas y optimizar la preparación, el etiquetado, el fraccionamiento y la fragmentación mediante MS de las muestras para identificar péptidos y detectar indicadores sin necesidad de utilizar los compuestos etiquetados isotópicos más costosos. El conjunto de reactivos isotópicos TMTduplex combina la etiqueta TMTzero con una de las etiquetas TMT6 para la creación de perfiles cuantitativos de proteínas de dos condiciones a nivel de MS similares a SILAC.

Los reactivos TMT se ofrecen como conjuntos independientes o en formatos de kit optimizados que contienen todos los reactivos y controles necesarios para obtener la máxima flexibilidad, comodidad y fiabilidad. Los reactivos de etiquetas de masas tándem combinados con los instrumentos y el software Thermo Scientific líderes del sector proporcionan soluciones de sistema total integradas para el análisis cuantitativo de la expresión de proteínas.

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